In order to establish yeast cells that produce leucocin A, a bacteriocin, the 117 bp leucocin A gene with start and stop codons was synthesized and cloned in pAUR123, a yeast vector. Transformed yeast cells showed antibacterial activity against Bacillus subtilis. The leucocin A gene was confirmed by means of PCR methods with plasmid prepared from transformed yeast cells as template and two leucocin A-specific primers. In this results, yeast cells that produce mass amounts of bacteriocin to use as food preservative or antibiotics were established.
Mei Chow Yen;Ti Tey Beng;Ibrahim Mohammad Nordin;Ariff Arbakariya;Chuan Ling Tau
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.10
no.3
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pp.280-283
/
2005
The adsorption of a model protein bovine serum albumin (BSA) in expanded bed chromatography was undertaken by exploiting a commercially available expanded bed column (20 mm i.d.) from UpFront Chromatography and Streamline DEAE $(\rho=1.2g/cm^3)$ from Amersham Pharmacia Biotechnology. The influence of whole yeast cells on the adsorption capacity of column was explored by employing yeast cells in a concentration ranged of 0 to $15\%(w/v)$. Equilibrium isotherms for adsorption of BSA on Streamline DEAE were correlated by using Langmuir equation. The presence of yeast cells resulted in decreased of BSA binding capacity in both batch binding and expanded bed chromatography. Results indicated that the yeast cells act as competitor for proteins to bind to the sites on adsorbents.
Two-hundred two yeast strains were isolated from rhizosphere(87 strains) and nonrhizosphere(115 strains) areas of potato, maize, vegetable marrow, and cabbage plants. On the basis of 26 morphological and physiological properties, the isolated yeast strains were assigned to 9 genera and 15 species. Trichosporon beigelii, Kluyveromyces marxianus and Torulaspora delbrueckii were the dominant species. Cryptococcus humicolus and Candida tropicalis were represented by considerable numbers of strains. Of low occurrence were Saccharomyces cerevisiae and Candida blankii. Other yeast species were represented by single or two strains. Total counts of yeast cells per gram dry soil ranged from $1.1{\times}10^3$ to $6.6{\times}10^3$ in soil samples of rhizosphere areas and from $6.5{\times}10^2$ to $5.6{\times}10^3$ in soil samples of nonrhizosphere areas. Types of the tested plants affected not only the total counts of yeast cells but also spectra of yeast species. Relationships of age of potato plant, moisture contests of soil samples, and its pH values and total counts of yeast cells were discussed.
For the purpose of the production of yeast cell protein from rice bran oil, it's assimillating yeast(E222) was isolating from soil and the resulting of identification was shown that it was belonging to Candida aibican species Total free amino acids from yeast cells were shown 0.05% per gram. Nine other species of amino acids as well as glycine, glutamic acid, alanine, leucine and aspartic acid were produced from yeast cells.
RNA accumulating strain of Torulopsis versatilis MT-1 was cultured in molasses medium for higher contents of RNA in cell. Yeast cells were harvested at logarithmic phase on synchronous culture. Yield of cells on dry base to input sugar was 59.5%. Crude protein content was 55.1% in cell. RNA content was 13.9%. Some problems found in the process for the preparation of yeast extracts were improved by the addition of culture broth of Streptomyces faecalis MSF which secrete RNase (5' nuclease and 5' adenylic acid deaminase). When the culture broth of S. faecalis MSF was added in autolysis process 46% of RNA in cell was converted to I and G(5' inosinic acid and 5' guanylic acid) in extract. By addition of 3-7% culture broth of S.faecalis MSF in autolysis or enzymolysis process at the start or early stage, RNA in extract was converted easily to I and G and protein in cells was easily extracted and hydrolyzed to amino acid. Taste of those yeast extracts was delicious. The yeasty smell in yeast extracts was removed. And cell debris was easily removed from extract.
It was attempted in this study to investigate the effect of ginseng saponin on several glycolytic enzymes of yeast cell and the following results were obtained. The amount of $CO_2$formed during the incubation of yeast cells in medium containing saponin fraction of Panax ginseng C.A. Meyer was greater than that of control cells and found that the $CO_2$ formation was greatest when the cells were grown in the medium containing 10$^{-3}$% of the saponin fraction, at which the uptake of inorganic phosphate and glucose consumption were also increased. Radioactivity study of several glycolytic intermediates of yeast cells cultured in the medium containing [U-$^{14}$C]-glucose showed that the radioactivity of fructose 6-phosphate of test cells was as much as 1.6times that of control group. On the other hand, the radioactivity of pyruvate of test cells was considerably decreased compared to control. Investigation of the effect of ginseng saponin on yeast hexokinase, phosphoglucose isomers, pyruvate kinase and perverted decarboxylase in vitro showed that the maximum activities of the above enzymes were observed when the concentration of ginseng saponin was 10-$^{-5}$% in the reaction mixture. It seemed that the ginseng saponin stimulated both glycolytic enzymes such as hexokinase, phosphoglucose isomers and perverted decarboxylase significantly.
Optimum conditions for vacuum-drying ad cultivation of yeast cells for the production of active dry yeast were examined. At lower temperature, more drying time was required to dry the yeast pellet to reach the desirable water content(8%). Optimum temperature of vaccum oven and time for drying was 63$^{\circ}C$ and 90 min, respectively. Optimum medium composition for flask culture using cane molasses as the substrate were 0.25% sugar, 0.013% $K_2$HPO$_4$, 0.1% $K_2$HPO$_4$. and 0.125% (NH$_4$)$_2$SO$_4$. Culture temperature $25^{\circ}C$ gave the highest survival rate of dired yeast. After finishing fed-batch culture and the culture was left in the fermentor without adding any sugar or nutrient, survival of the dried yeast harvested from the fermentor increased to 86.0% after 36 hr. It was also observed that the yeast cells with higher budding rates showed lower survival rate.
Exposing yeast cells with a certain genotype to different inducers, the ability of the yeast cells (Saccharomyces cerevisiae) to obtain enhanced fermentation for carbohydrates was observed. Regardless of the preexposure to any substrate, the inherent character incapable of fermenting a certain carbohydrate was maintained, while utilization of carbohydrates by the cells with a certain gene markers was varied by the previous conditions where they were exposed. Galactose was the best inducer for the cells to elaborate melibiase, even the galactose was not utilized as a substrate. Preexposure to galactose seemed to be necessary for the cells to utilize galactose and melibiose. Galactose fermentation by GA cells was enhanced by the exposure of the cells to galactose, but not to melibiose, raffinose, sucrose or glucose. Delayed fermentation of sucrose by the cells exposed to glucose or melibiose, but not to galactose, was observed. Raffinose fermentation was obtained by the cells with either SU RAF or GA ME genes, but the enhanced fermentation of raffinose seemed to be dependent on which inducer the cells were exposed previously and enzymes induced by the inducer to break either one of the linkages of raffinose molecule, the alpha0galactosidic or the beta-fructo-furanosidic.
An extremely cadmium-tolerant budding yeast, Hansenula anomala B-7 underwent a morphological switch in response to either heat shock treatment or cadmium stress, respectively. It exhibited a morphological transition from a unicellular yeast form to a pseudohyphae-like coagulation when subjected to prolonged heat shock treatment. In contrast, the yeast cells showed an irregularity in surface morphology when given thermal stress for a short time. Patterns of proteins expressed in the pseudohyphae-like cells demonstrated that several proteins were overexpressed while others were underexpressed in comparison with those prepared from the cells in the yeast form. It was a striking feature, however, that nearly 40% of the proteins extracted from the cells in the pseudohyphae form appeared to be composed of a single polypeptide. This polypeptide was apparently overexpressed during the pseudohyphae phase and its molecular weight was estimated to be 58 kDa according to SDS-PAGE analysis. However, a significant level of the protein was not observed in the cells before transition to pseudohyphae. The architecture of the cell shape was also damaged when incubated in a medium containing more than 1,000 ppm (8.9mM) of cadmium ions, although able to proliferate at a slow rate. However, the irregularity in the cell morphology exerted either by the brief heat shock treatment or by the cadmium stress with the high concentrations of the metal ions was not repaired, even though the damaged cells were allowed to grow for sufficient time in fresh, cadmium-free medium.
An in vitro gas production technique was used in this study to elucidate the effect of two strains of active live yeast on methane ($CH_4$) production in the large intestinal content of pigs to provide an insight to whether active live yeast could suppress $CH_4$ production in the hindgut of pigs. Treatments used in this study include blank (no substrate and no live yeast cells), control (no live yeast cells) and yeast (YST) supplementation groups (supplemented with live yeast cells, YST1 or YST2). The yeast cultures contained $1.8{\times}10^{10}$ cells per g, which were added at the rates of 0.2 mg and 0.4 mg per ml of the fermented inoculum. Large intestinal contents were collected from 2 Duroc${\times}$Landrace${\times}$Yorkshire pigs, mixed with a phosphate buffer (1:2), and incubated anaerobically at $39^{\circ}C$ for 24 h using 500 mg substrate (dry matter (DM) basis). Total gas and $CH_4$ production decreased (p<0.05) with supplementation of yeast. The methane production reduction potential (MRP) was calculated by assuming net methane concentration for the control as 100%. The MRP of yeast 2 was more than 25%. Compared with the control group, in vitro DM digestibility (IVDMD) and total volatile fatty acids (VFA) concentration increased (p<0.05) in 0.4 mg/ml YST1 and 0.2 mg/ml YST2 supplementation groups. Proportion of propionate, butyrate and valerate increased (p<0.05), but that of acetate decreased (p<0.05), which led to a decreased (p<0.05) acetate: propionate (A: P) ratio in the both YST2 treatments and the 0.4 mg/ml YST 1 supplementation groups. Hydrogen recovery decreased (p<0.05) with yeast supplementation. Quantity of methanogenic archaea per milliliter of inoculum decreased (p<0.05) with yeast supplementation after 24 h of incubation. Our results suggest that live yeast cells suppressed in vitro $CH_4$ production when inoculated into the large intestinal contents of pigs and shifted the fermentation pattern to favor propionate production together with an increased population of acetogenic bacteria, both of which serve as a competitive pathway for the available H2 resulting in the reduction of methanogenic archaea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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