• 미생물학회지
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• 제37권1호
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• pp.42-48
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• 2001

출아 효모인 Saccharomyces cerevisiae의 베타-1,3-글루칸 생합성의 결함을 초래하는 돌연변이 유전자(sool-1)를 분리하여 돌연변이 부위의 염기서열을 결정하고 그 특성을 분석하였다. cool-1 유전자의 염기서열 분석 결과, 681번의 염기인 G가 A로 치환되어 Soolp의 $Gly^{227}$이 Asp로 치환되는 결과를 나타내는 것으로 판명되었고, cool-1 유전자는 기존에 보고된 retl-1 유전자와 동일한 돌연변이 유전자로 판명되었다. 그러나, ret1-1이 나타내는 온도감수성 형질은 배지에 1.2 M sorbitol 등의 삼투안정제를 첨가하면 극복될 수 있으며, cool-l/retl-1의 돌연변이 부위가 세포벽합성 관련 단백질의 번역 후 수식과정에 영향을 미친 것임을 확인하였다. 한편, Soolp/$\alpha$-COP의 N-말단에 존재하는 6개의 WD40 domain중 5번째 WD40 domain이 효모의 세포벽 합성이나 구조유지에 중요한 역할을 담당할 것임을 시사하는 결과를 얻었다.

• 한국미생물학회:학술대회논문집
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• 한국미생물학회 2000년도 추계학술발표대회
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• pp.39-45
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• 2000

It hab been proposed that CHS3-mediated chitin synthesis during the vegitative cell cycle is regulated by CHS4. To investigate direct protein-protein interaction between their coding products, we used yeast two hybrid system and found that a domain of Chs3p was responsible for interaction with Chs4p. This domain, termed MIRC3-4 (maximum interacting region of chs3p with chs4p), spans from 647 to 700 residues. It is well conserved among CHS3 homologs of various fungi such as Candida albicans, Emericella nidulans, Neurospora crassa, Magnaporthe grisea, Ustilago maydis, Glomus versiforme, Exophiala dermatitidis, Rhizopus microsporus. A series of mutaion in the MIRC3-4 resulted in no appearance of chitin ring at the early G 1 phase but did not affect chitin synthesis in the cell wall after cytokinesis. Absence of chitin ring could be caused either by delocalization of Chs3p to the septum or by improper interaction with Chs4p. To discriminate those two, not mutually exclusive, alternatives, mutants cells were immunostained with Chs3p-specific antibody. Some exhibited localization of chs3p to the septum, while others failed. These results indicate that simultaneous localization and activation Chs3p by Chs4p is required for chitin ring synthesis.

• 한국식품영양과학회지
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• 제12권4호
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• pp.387-394
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• 1983

zymolyase(${\beta}-1$, 3-glucanase)의 효모(酵母) 세포벽(細胞壁)에 대한 용해작용(溶解作用)을 촉진(促進)시키는 인자(因子)를 zymolyase의 조효소(粗酵素)로부터 분리(分離)하여 Sephadex G-75 gel 여과(濾過) 및 조제용(調製用) PAG-전기영동법(電氣泳動法)에 의하여 전기영동적(電氣泳動的)으로 균일(均一)하게 정제(精製)하였다. SDS-PAG 전기영동법(電氣泳動法)에 의하여 측정한 정제(精製) 인자(因子)의 분자량(分子量)은 40,500이었고, 등전점(等電點)은 pH 9.6이었다. 정제(精製)된 촉진인자(促進因子)는 395개(個)의 아미노산 잔기(殘基)로 구성(構成)되는 단일(單一) polypeptide의 염기성(鹽基性) protease임이 밝혀졌으며, 이 protease의 흡광계수(吸光係數)($E_{208,cm}^{1%}$)는 11.9, 분자흡광계수(分子吸光係數)(${\varepsilon}_{280,}mole/l$)는 $4.83{\times}10^4$이었다.

• 대한세포병리학회지
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• 제4권2호
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• pp.156-159
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• 1993

Cryptococcosis is a systemic mycosis that most often involves the central nervous system, followed by subclinical or symptomatic pulmonary involvement. We describe a case of unsuspected pulmonary cryptococcosis in a 69-year-old woman, diagnosed by sputum cytology. Sputum smears revealed numerous yeast like organisms typical of Cryptococcus neoformans measuring from 7 to 17 um in diameter. Mucicarmine, PAS, and methenamine sliver stains showed positive reaction of capsule and cell wall of Cryptococcus neoformans.

• 약학회지
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• 제47권3호
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• pp.190-194
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• 2003

As previously reported, an immunoglobulin M (IgM) monoclonal antibody (MAb) B6.1, specific for a cell wall B-l,2-mannotriose, was protective against vaginal infection due to Candida albicans when mice were treated with the antibody. In this study, the role of neutrophil was examined in the protective effect of MAb B6.1 against vaginal infection. To deplete neutrophils, mice were given intravenously rat anti-mouse neutrophile MAb RB6-8C5 prior to intraperitoneal administration of MAb B6.1 to these mice. The mice were examined for antibody in their reproductive tract. By an ELISA, MAb B6.1 was found in the vaginal homogenates, but no antibody was detected in vaginal lavage materials. The neutropenia was induced by a single dose of the anti-neutrophil antibody, but lymphocytes were also partially depleted. The protective effect of MAb B6.1 was decreased when mice pretreated with MAb RB6-8C5 were given the anti-Candida antibody before challenge with C. albicans yeast cells intravaginally. These results show that neutrophils are involved in the MAb B6.1 protection against Candida vaginal infection.

• 한국가금학회지
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• 제30권1호
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• pp.41-47
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• 2003

본 실험에서는 항생제 대체물질 탐색의 일환으로 톳에서 추출한 crude fucoidan의 미생물에 대한 항균능력을 in vitro 및 in vivo 상에서 검토하였고, 병아리 장내 응모의 형태적 변화에 대해 조사하였다. 본 실험에서는 갓 부화한 육계 수평아리 84두를 7처리 3반복으로 반복당 4수를 공시하여 3일령에 Salmonella typhimurium을 감염시킨 오염구와 비오염구를 두었으며, 오염구에는 항생제, fucoidan, 톳건조분말, 미역건조분말 및 yeast cell debris를 첨가하였다. 국내산 톳분말에서 추출한 조 fucoidan의 추출 수율은 5.45%로 비교적 높은 추출율을 나타냈다. in vitro 실험에서 fucoidan의 항균능력은 inhibition zone test 및 미생물 성장 실험결과 확인되지 않았다. in vivo실험에서 육계 초생추의 성장률은 fucoidan 첨가구와 YCD 첨가구가 대조구 및 다른 처리구에 비하여 높은 경향을 보였으나, 유의적인 차이는 없었다. 또한 in vivo 실험에서 Salmonella typhimurium에 대한 균의 출현율 및 생균수는 항생제 첨가구와 fucoidan 첨가구에서 낮게 나타났다. 각점막 융모의 길이는 fucoidan 첨가구와 해조류 건조분말 첨가 시 짧아진 경향을 나타내었으며, 대부분 대장벽면에 매우 촘촘하게 분포되어 있었으며, 형태는 처리구별로 크게 다르지 않았다. 따라서 본 실험의 결과만으로 fucoidan이 항생제 대체물질로 이용될 가능성을 명확하게 제시할 수는 없었으나, 연구할 가치는 충분히 있는 물질임이 확인되었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제29권5호
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• pp.758-764
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• 2019

${\beta}$-Glucan is a chief structural polymer in the cell wall of yeast. ${\beta}$-Glucan has attracted intensive attention because of its wide applications in health protection and cosmetic areas. In the present study, the ${\beta}$-glucan biosynthesis pathway in S. Cerevisiae was engineered to enhance ${\beta}$-glucan accumulation. A newly identified bacterial ${\beta}-1$, 6-glucan synthase GsmA from Mycoplasma agalactiae was expressed, and increased ${\beta}$-glucan content by 43%. In addition, other pathway enzymes were investigated to direct more metabolic flux towards the building of ${\beta}$-glucan chains. We found that overexpression of Pgm2 (phosphoglucomutase) and Rho1 (a GTPase for activating glucan synthesis) significantly increased ${\beta}$-glucan accumulation. After further optimization of culture conditions, the ${\beta}$-glucan content was increased by 53.1%. This study provides a new approach to enhance ${\beta}$-glucan biosynthesis in Saccharomyces cerevisiae.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제30권1호
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• pp.62-70
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• 2020

Zygosaccharomyces rouxii is an important yeast that is required in the food fermentation process due to its high salt tolerance. In this study, the responses and resistance strategies of Z. rouxii against salt stress were investigated by performing physiological analysis at membrane level. The results showed that under salt stress, cell integrity was destroyed, and the cell wall was ruptured, which was accompanied by intracellular substance spillover. With an increase of salt concentrations, intracellular Na⁺ content increased slightly, whereas intracellular K⁺ content decreased significantly, which caused the increase of the intracellular Na⁺/K⁺ ratio. In addition, in response to salt stress, the activity of Na⁺/K⁺-ATPase increased from 0.54 to 2.14 μmol/mg protein, and the ergosterol content increased to 2.42-fold to maintain membrane stability. Analysis of cell membrane fluidity and fatty acid composition showed that cell membrane fluidity decreased and unsaturated fatty acid proportions increased, leading to a 101.21% rise in the unsaturated/saturated fatty acid ratio. The results presented in this study offer guidance in understanding the salt tolerance mechanism of Z. rouxii, and in developing new strategies to increase the industrial utilization of this species under salt stress.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제10권4호
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• pp.245-252
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• 1982

적색효모 세포벽 용해효소의 기질특이성을 밝히기 위해 기질로 사용가능한 다당을 screening하여 Rh.glutinis IFO 0695가 생산하는 mannan을 얻었다. 이 mannan의 구조는 $\beta$-1,3과 $\beta$-1,4 결합이 교대로 연결된 직쇄상의, 중합도 약 650인 수용성의 다당으로 밝혀졌다. 이 다당을 기질로하여 양 효소의 기질특이성을 조사한 결과, Bacillus생산효소는 $\beta$-1. 3, $\beta$-1. 4 mannan을 4당 또는 6당 단위로 가수분해하는 효소로서 그 절단점은 $\beta$-1, 4결합 이었다. 이 $\beta$-1,4 결합을 가수분해하기 위해서는 인접 결합이 $\beta$-1,3결합이어야만 하는 새로운 type의 $\beta$-1,4 mannauase이었다. 한편, Penicillium생산효소는 $\beta$-1, 3, $\beta$-1, 4 mannan의 $\beta$-1, 3결합을 2당 또는 4당의 단위로 가수분해하여 최종적으로는 2당을 생성하는 $\beta$-1, 3 mannanase의 일종이었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권4호
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• pp.368-375
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• 1990

세포내 및 세포벽 뿐만 아니라, 세포외에도 invertase를 구성적으로 생산하는 효모 Rh.glutinis K-24로 부터 세포외 invertase를 disc 전기 영동상으로 단일한 상태로까지 정제하였다. 정제 효소의 효소화학적 성질을 밝힌 후 이미 보고한 바 있는 세포내 및 세포벽 invertase와 그 개락적 성질을 비교 검토하였다.