Porcine circovirus-2 (PCV2) 는 돼지에서 여러 형태의 질병과 증후군의 발생과 관련이 되어있어 현재는 PCV-associated diseases (PCVAD)로 총괄적으로 분류된다. PCVAD에 의한 높은 경제적 손실 때문에 많은 양돈장들이 PCV2의 감염을 확인하기 위하여 혈청을 검사하고 있다. 하지만, 기존의 혈액채취법은 비용이 높고 많은 인력이 소요되므로 큰 규모의 병원체 검사에는 어려움이 있었다. 이에 본 연구에서는 혈액채취법을 이용한 돈군의 PCV2 검사법에 대한 대체방법으로 돈방 단위의 구강액채취법의 유용성을 실제 농장에서 평가하였다. 세 곳의 다른 양돈 농장들에서 각각 6개의 25두 규모의 돈방들을 선정하여 생후 3, 5, 8, 12, 16주에 돈방 마다 하나의 구강액과 5개의 혈청을 채취하였다. 모든 시료들은 real-time PCR을 이용하여 PCV2 DNA를 검사하였고 IgG 또는 IgA 간접형광항체 검사법및 세 가지의 ELISA 검사법 (blocking ELISA, indirect ELISA, and IgG/IgM sandwich ELISA)을 이용하여 PCV2에 대한 항체를 검사하였다. 구강액에서 PCV2 DNA는 8주까지는 간헐적으로 검출이 되다가 16주에는 모든 돈방에서 검출이 되었으며, 모체유래 PCV2 특이 IgG는 3주부터 검출이 되었고 모든 농장에서 5-8주까지 지속이 되었다. 16주에는 한 농장 (Site 1)의 모든 돈방에서 감염에 의한 IgG와 IgA가 검출되었다. 혈청에서의 PCV2 DNA와 PCV2 항체의 검출은 구강액에서의 검출과 높은 상관관계를 보였다. 따라서 구강액은 돈군의 PCV2 감염을 모니터링 하기 위해 혈청대신 사용할 수 있는 저비용, 고효율의 시료가 될 수 있을 것으로 사료된다.
목 적 : 우리나라 성인을 대상으로 홍역 특이 IgG 항체의 혈중 농도를 측정하여 각 연령층의 홍역특이 IgG 항체의 양성들과 항체 역가를 알아봄으로써 우리 나라의 홍역 집단 면역의 실태를 파악하고 궁극적으로 홍역 퇴치를 위한 자료를 제시하고자 본 연구를 시행하였다. 방 법 : 1997년 6월부터 7월까지 고대 안산 병원 외래 검사실을 방문한 20세 이상의 성인 156명(남 78, 여 78)을 대상으로 혈액을 채취하여 효소결합흡착검사(ELISA)로 홍역 특이 IgG를 측정하였다. 검사는 SIATM Measles IgG kit(Sigma Co. St Louis)를 이용하였으며, 홍역 특이 IgG의 농도는 정해진 방법에 따라 110AU/ml 이상인 경우 항체 양성으로 판정하였다. 결 과 : 1) 홍역 특이 IgG 항체 양성률은 전체적으로 94.9% 였고, 연령 별로는 20대 90.3%, 30대 96.9%, 40대 96.7%, 50대 95.5%, 60대 94.7%, 70대 95.5% 였으며, 연령별 항체 양성률에 있어서 유의한 차이는 없었다. 2) 전체 대상자들의 평균 홍역 항체 역가(평균${\pm}$표준편차, AU/ml)는 전체적으로 $238{\pm}84$이었으며, 연령별로 20대 $251{\pm}117$, 30대 $208{\pm}72$, 40대 $235{\pm}82$, 50대 $268{\pm}76$, 60대 $232{\pm}58$, 70대 $240{\pm}67$ AU/ml 등이었으며, 30대에서 평균 홍역 항체 역가가 다른 연령군에 비해 유의하게 낮았으나, 연령증가와 평균 홍역 항체 역가사이의 상관관계는 없었다. 결 론 : 성인기의 홍역 특이 IgG 양성률은 94.9%였으며, 연자들의 이전의 연구에서 나타난 소아 및 청소년기의 항체 양성률에 비해 성인층에서의 홍역에 대한 집단 연역이 높은 수준임을 보여주었다. 성인중 홍역 항체 음성률이 소아 및 청소년에 비해 낮고 또한 성인층에서 항체 음성인 경우에 대한 대책이 현실적으로 불가능한 만큼 앞으로는 백신 접종세대인 소아 및 청소년기의 홍역 유행의 주요 문제인 일차 백신 실패를 최소화하기 위한 더욱 더 많은 노력이 기울여 져야 할 것이다.
폐흡충증의 유행정도를 측정하는 데 사용하여 온 피내반응과 충란검사가 각각 특이도와 민감도에 문제를 갖고 있어 주민 중 현증 환자를 적절히 찾았다고 하기가 어렵게 되어가고 있다. 이러한 점을 개선하는 방법으로 폐흡충 특이 IgG항체를 검사함으로써 항체양성자의 수를 현증 환자의 수로 하는 방법을 폐흡충증 역학조사에 응용하고자 하였다. 이 연구에서는 특이항체를 면역효소진단법으로 측정하였을 때 그 효용성을 평가하고자 하였다. 전라남도 해남군 북평면과 북일면의 6개 국민학교, 2개 중학교, 1개 고등학교 학생과 2개 부락 주민 등 모두 4,285명을 우선 피내 반응으로 검사하고 폐흡충 피내반응 양성자에서 가래 검사를 한번 실시하였고 혈청을 채취하여 면역효소진단법으로 폐흡충 특이 IgG항체를 측정하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 총 대상자 4,285명 중 폐홉충 피내반응 양성자는 244명 (5.7%)이었고, 피내반응 양성자 중 충란 양성자는 7명 (4.2%), 면역효소진단법에 의한 특이 IgG항체 양성자는 40명 (16.7%)이었다. 전체 조사 대상자에 대한 충란 양성자의 비율은 0. 16%, 특이 IgG항체 양성자는 0.93%에 해당하였다. 2. 폐흡충 특이 IgG항체 양성자는 충란 양성자에서는 100%, 폐흡충 피내 반응은 양성이나 충란검사 음성자에서는 14.2%에서 나타났으나, 간흡충 피내반응 양성자 또는 피내반응 음성 자에서는 나타나지 않았다. 3. 폐흡충 특이 IgG항체 양성자는 피내반응 구진의 크기 9mrn이하에서는 없었고, 10mm에서는 5.5%, 11∼12mm에서는 26.1% 및 18.2%, 13mm이상에서는 평균 42.4%에서 양성이었다. 4. 특이항체 양성자 31명을 임상적으로 조사한 바 검사소건(흉부 X-선, 충란검사 및 호산구 비율)에서 폐흡충증에 합치하는 이상소견이 24례에서 나타나 현증 폐홉충증 환자로 생각할 수 있었고, 나머지 7례중 3례는 폐흡충증의 과거력이나 쳔증 증상을 갖고 있었으며 4례에서는 특이항체 양성소견 이외에는 어느 검사로도 폐흡충증임을 증명할 수가 없었다. 5. 폐홉충 특이 IgG항체 양성자 수의 피내반응 양성자 수에 대한 비율은 연령별로 7∼9세에서는 16.6%, 10∼14세에서 25.4%, 15w18세 군에서는 18.3%이었고 20세 이상에서는 10.0%로 떨어지고 있었다. 6. 체홉충 특이 IgG항체 양성자는 북평면의 산골 마을에서 주로 나타나고 있었다. 이상과 같은 결과에서 면역효소 진단법에 의하여 폐흡충 특이 IgG항체 양성자를 조사함으로써 어느 지역의 폐흡충중 현증 환자를 피내 반응이나 충란 검사보다도 더 사실에 가깝게 측정할 수 있다고 생각하였다. (이 연구를 수행하는데 현지조사를 직접 간접으로 도와 주신 해남군 보건소 민 경 소장님과 김용팔 주사, 북평면 면사무소 직원여러분과 해남군 교육청, 각급학교 교직원 여러분께 감사드립니다. 환자의 흉부 X-선 사진을 판독하여 주신 중앙의대 부속 성심병원 방사선과 과장 정전상 부교수께 도 감사드립니다. )
살모넬라 타이피무리움 JOL389와 χ3339는 마우스에 강한 독력을 가진 균주들이며, χ8554는 χ3339로부터 유도되었다. 고스트 카세트를 운반하는 플라스미드 pMMP184가 제조된 후에, BALB/c 마우스의 구강 경로를 경유하여 투여되었다. 총 IgG의 함량 변화는 χ8554 고스트 세포의 부스팅으로 발현 함량이 낮게 나타났지만, 3차 접종의 2주 경과 후, 6주차에서 증가되는 양상을 보였다. 그러나, 혼합 백신 그룹인 JOL389/χ8554 그룹에서는 총 IgG의 함량이 일차 접종 후 2주차부터 상승되는 경향을 보였고, 추가접종이 진행되므로써 많은 상승 폭을 나타내었다. 총 IgG의 함량은 백신 접종 후 10주차에서 χ8554그룹에 비교하여 JOL389/χ8554은 8배 이상 높은 것으로 관찰되었다. IgG1, IgG2a, 분비IgA의 함량은 백신화 후 4주차에서 상승되었다. 독력 살모넬라 타이피무리움 χ3339로 도전실험결과, χ8554 [pMMP184]과 χ8554 [pMMP184]/JOL389은 대조구에 비교하여 50% 이상의 보호효과가 관찰되었다. 이들 결과는 χ8554 [pMMP184]/JOL389은 χ8554 [pMMP184]보다 더 높은 면역 응답을 유도하는 것이 가능한 것으로 추정된다.
Purpose: To evaluate the clinical and microbiological effects of the local use of egg yolk immunoglobulin against Porphyromonas gingivalis (anti-P.g. IgY) as an adjunct to scaling and root planing (SRP) in the treatment of moderate to severe chronic periodontitis. Methods: This was a randomized, placebo-controlled, double-blind trial involving 60 systematically healthy patients with moderate to severe chronic periodontitis. Subjects (n=20/group) were randomly assigned to receive SRP combined with subgingival irrigation of anti-P.g. IgY and anti-P.g. IgY mouthwash, subgingival irrigation of 0.2% chlorhexidine and 0.2% chlorhexidine mouthwash, or subgingival irrigation of placebo and placebo mouthwash for 4 weeks. Probing pocket depth, clinical attachment level, bleeding on probing, and the plaque index were evaluated at baseline and at 4 weeks. Subgingival plaque, gingival crevicular fluid, and saliva were simultaneously collected for microbiological analysis. Results: Our results showed that anti-P.g. IgY mouthwash was as effective as chlorhexidine at improving clinical parameters over a 4-week period. All the groups showed a significant reduction in levels of P.g. at 4 weeks. No significant difference was observed in the test group when compared to placebo regarding the reduction in the levels of P.g. Anti-P.g. IgY significantly suppressed the numbers of red complex bacteria (RCB) in subgingival plaque and saliva in comparison with placebo. No adverse effects were reported in any of the subjects. Conclusions: Within the limitations of the study, the present investigation showed that passive immunization with anti-P.g. IgY may prove to be effective in the treatment of chronic periodontitis due to its ability to improve clinical parameters and to reduce RCB. No significant differences were found between the anti-P.g. IgY and placebo groups in the reduction of P.g.
Background: Toll-like receptors (TLRs) have been extensively studied in recent years. However, functions of these molecules in murine B cell biology are largely unknown. A TLR4 stimulant, LPS is well known as a powerful polyclonal activator for murine B cells. Methods: In this study, we explored the effect of a murine TLR9 stimulant, M6-395 (a synthetic CpG ODNs) on B cell proliferation and Ig production. Results: First, M6-395 was much more potent than LPS in augmenting B cell proliferation. As for Ig expression, M6-395 facilitated the expression of both TGF-${\beta}1$-induced germ line transcript ${\alpha}$ ($GLT{\alpha}$) and IL-4-induced $GLT{\gamma}1$ as levels as those by LPS and Pam3CSK4 (TLR1/2 agonist) : a certain Ig GLT expression is regarded as an indicative of the corresponding isotype switching recombination. However, IgA and IgG1 secretion patterns were quite different--these Ig isotype secretions by M6-395 were much less than those by LPS and Pam3CSK4. Moreover, the increase of IgA and IgG1 production by LPS and Pam3CSK4 was virtually abrogated by M6-395. The same was true for the secretion of IgG3. We found that this unexpected phenomena provoked by M6-395 is attributed, at least in part, to its excessive mitogenic nature. Conclusion: Taken together, these results suggest that M6-395 can act as a murine polyclonal activator but its strong mitogenic activity is unfavorable to Ig isotype switching.
In order to determine the role of Peyer's patch lymphocytes (PPL) in self-clearing of Cryptosporidium parvum infection in murine models, changes in PPL subsets, their cytokine expression, and in vitro IgG1 and IgA secretions by PPL were observed in primary- and challenge-infected C57BL/6 mice. In primary-infected mice, the percentages of CD4+ T cells, CD8+ T cells, slgA+ B cells, IL-2+ T cells, and $IFN-{\gamma}+$ T cells among the PPL, increased significantly (P < 0.05) on day 10 post-infection (PI). Secretion of IgG1 and IgA in vitro by PPL also increased on day 10 PI. However, all these responses, with the exception of IgG1 and IgA secretions, decreased in challenge-infected mice on day 7 post-challenge (= day 13 PI); their IgG1 and IgA levels were higher (P > 0.05) than those in primary-infected mice. The results suggest that murine PPL play an important role in self-clearing of primary C. parvum infections through proliferation of CD4+, CD8+, IL-2+, and $IFN-{\gamma}+$ T cells, and IgG1 and IgA-secreting 8 cells. In challenge infections, the role of T cells is reduced whereas that of 8 cells secreting IgA appeared to be continuously important.
Serum immunoglobulins (Igs) from Israeli carp were purified using affinity chromatography. Fish were immunized with purified mouse IgG, and the specific fish antibodies were purified from the immune serum on a mouse IgG-immobilized agarose gel. Rabbit anti-Israeli carp Igs (R $\alpha$ I. carp Igs) antibodies were produced following hyperimmunization with mouse IgG specific carp antibodies. SDS-PAGE analysis under reducing condition showed that Israeli carp Igs were composed of two $\mu$-like heavy chains with about 82 and 50 kd, respectively, and one light chain with about 25 kd. On immunoblotting analysis, however, R $\alpha$ I. carp Igs failed to react with the light chain. When both protein A and protein G-purified normal carp Ig were compared with mouse IgG-specific Israeli carp Ig, no significant structural differences among them were observed. To investigate if there is any homology between other fish Ig molecules, cross-reactivity of R $\alpha$ I. carp Igs against Ig molecules from 6 different fish sera and mouse control serum was checked on immunoblotting analysis. As a result, R $\alpha$ I. carp Igs responded to Israeli carp, common carp, and tilapia Ig molecules. In flow cytometry study, however, R $\alpha$ I. carp Igs appeared to recognize 42.0%, 35.8% and <5% of Israeli carp, common carp and tilapia $Ig^+$ head kidney cells, respectively. The result suggests the heterogeneity between receptor Igs on B-like lymphocytes and soluble Igs in serum. It is crucial to obtain pure fish Igs to produce reagent antibodies as tools for the study on their specific immune responses.
An experiment was conducted to establish a large scale production method of anti-serum against chicken IgA and to profile the developmental changes of serum IgA levels during the feeding period(from hatching to 7 weeks of age) in broiler chicks. Blood samples were taken from Hubbard chicken at the age of hatching, 3 days of age, and weekly thereafter till to 7 weeks of age. The pure IgA was isolated from ammonium sulfate treated chicken bile juice by gel filtration chromatography ( Sepharose GL-6B) - The quantitative assay of serum IgA were carried by RID method. Developmental changes of serum IgA concentrations were 0.42 mg /mL at hatching, thereafter dicreased gradually, lowest at 1 week of age(0.17 mg /mL), and gradually increased to 7 weeks of age(2.73 mg /mL). There was no sexual difference in serum IgA level, but female chicks showed higher IgA levels than male chicks during the experimental period.
우리 나라에서 가장 감염자가 많은 기생충인 간흡충의 현 감염에 특이한 항원 분획을 찾고자 면역이적법을 이용하여 감염자의 혈청을 검색하였다. 실험적으로 토끼에서 얻은 간흡충 성충의 조항원에 시스테인계 단백질분해효소 억제제인 I-64를 첨가하였을 때 큰 분자량의 분획을 가장 잘 보존하여 200-14 kDa의 범위에 20개 이상의 분획을 관찰하였다. 이 조항원을 이용하여 경북 상주군 주민의 혈청을 면역이적법으로 검사하였다 대변검사, 피내반응검사, 효소면역법검사(ELISA)를 이 용하여 검사한 73명 중 충란양성자 49명의 혈청 내에 특이 IgG와 IgE 항체가 생성되었고, IgM과 IgA 항체는 특이하게 반응하지 않았다. 여러 항원 분획 중에서 43, 34, 28-25 kDa 항원이 현 감 염에 특이한 분획이고. 항체와 반응한 94, 80, 72, 68, 64, 62, 52, 47, and 40 kDa 분획은 특이하지 않은 분획임을 확인하였다. 추후에 각 항원과 이에 대한 혈청반응에 대하여 특성을 더 연구 할 필요가 있으며, 특히 치료후 추적검사를 통하여 혈청내 항체의 소실을 구명하여야 할 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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