With the indirect immunobead antisperm antibody test(IBT) a prospective study was conducted to evaluate the immune status of 38 men before and after vasovasostomy. The pregnancy and postoperative semen analysis were evaluated. The results were compared between pregnant (n=14) and non-pregnant(n=24) group. The postoperative sperm motility was inversely correlated with the titer of the preoperative and postoperative IgG(p<0.01). The preoperative and postoperative titer of IgG were significantly higher than the titer of IgA or IgM(p<0.05). The mean percentage of the positive IBT(20 per cent binding or more) of the pregnant group was significantly lower than non-pregnant group in the preoprative and postoperative IgG(p<0.05). Immunobead binding restricted to the head and tail of a sperm in IgG was predominant and significantly lower in the pregnant group (p<0.05). In conclusion, IgG especially immunobead binding to the head and tail can be used as a sensitive screening assay for antisperm antibodies after vasovasostomy.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.18
no.1
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pp.295-301
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2017
Botulinum neurotoxin (BoNT/A) is a neurotoxin that selectively attacks the peripheral cholinergic nerve endings. It is produced by Gram -positive, endospore-forming strict anaerobic bacteria, Clostridium botulinum. Since BoNT/A could be a biothreat agent, as well as a contaminator of food and water supplies, the development of sensitive assays for toxin detection and potent antitoxin for the treatment of intoxication is necessary. In this study, for the purpose of producing monoclonal antibodies (mAbs) that are capable of neutralizing Botulinum neurotoxin type A (BoNT/A), scFv (single-chain variable domain fragment) libraries from the rabbit antisera against BoNT/A was fused to a human IgG. The resulting recombinant scFvIgG antibody protein was expressed in stable cell lines and was purified using a protein A affinity chromatography. The efficacy of scFvIgG mAb was confirmed by ELISA and was evaluated for the neutralization of BoNT/A in vivo. Such an in vivo toxin neutralization assay was performed using mice. Although scFvIgG antibody proteins (10 ug) failed to fully protect the mice challenged with BoNT/A (100,000 $LD_{50}$), it significantly prolonged the survival time. These results suggest that scFvIgG mAb may be capable of neutralizing BoNT/A single-chain variable domain fragment.
Kim, Deog-Yoon;Kim, Sang-Eun;Lee, Dong-Su;Ahn, Cu-Rie;Chung, June-Key;Lee, Myung-Chul;Koh, Chang-Soon
The Korean Journal of Nuclear Medicine
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v.25
no.2
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pp.259-265
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1991
The purpose of this study is to investigate the ability of I-131 labeled polyclonal human immunoglobulin to localize an infection. In our country, indium-111 labeled leukocyte or Tc-99m labeled IgG are not readily available because of compex, time-consuming procedure and cost. So we tried to localize infection with I-131 labeled IgG which could be easily prepared. Six rats, infected with staphylococcus aureus in a thigh muscle, received I-131 labeled IgG intravenously and I-131 labeled bovine serum albumin (BSA) were injected to other 5 infected rats. Scintigrams were made at 1, 4, 24, 48, 72 hour later. The radiopharmaceutical demonstrated significant accumulation at the site of infection. The accumulation of I-131 labeled IgG at the site of infection was significantly (P<0.05) higher than that of I-131 labeled BSA at 48, 72 hour. Similar finding could be found at 24 hour imaging, but it was not significant statistically. Therefore it was found that vascular permeability alone could not account for the mode of action of I-131 labeled IgG and it was considered that specific binding played a role. In conclusion, focal sites of inflammation can be detected with I-131 labeled nonspecific human polyclonal IgG and it seems that this method can also be applied to localization of human infection.
Leptin and IGFBP-3 are two proteins that play an important role in growth and metabolism of the animals. They are also involved in the immune function of animals and, thus, are candidate genes for the study of association with immune functions. Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) of these two genes was done to screen 64 crossbred (Holstein Friesian${\times}$Hariana) female calves of one year of age. From each RFLPs (fragments) three genotypes were observed. In all the RFLPs the mutant homozygotes were very less in numbers and, hence, were excluded from the least squares analysis. The serum IgG level was estimated using SRID assay. The mean level of serum IgG was $28.83{\pm}2.73mg/ml$. The effect of these identified genotypes on serum IgG level of calves at one year of age was analysed using least squares analysis. The HaeIII RFLP-AB genotype had significantly (p<0.05) higher serum IgG level ($31.86{\pm}3.05$) than the HaeIII RFLP-AA ($25.62{\pm}2.96$) genotype. There was no significant effect of leptin genotypes on the IgG level. The present results indicated a role of the IGFBP-3 gene on serum IgG level of cattle calves.
In this study, hybridoma techniques were applied to produce monoclonal antobodies to Paragonimus westermani, commonly known as lung distoma. Balb/c mice were immunized intraperitoneally every week with increasing doses of purfied protein of Paragonimus westermani adult worms begining with 0.3/mg/mouse/7 days and ending with 0.5mg at 28th day. Spleen cells from these immunized mice were hybridized with myeloma cells (NS-1) and the hybridized cells were selected in HAT media. The antibody secreting cells among the hybrid cells were initially selected by ELISA. Those initially selected cells were further screened by the criteria of antibody producing activity, and seneral cell lines among them were further tested with immunodiffusion method. One hybridoma clone produced IgM and another clone produced IgG1. The supernatant of the hybridoma clone producing IgM had titer 1:64 and the hybridoma clone producing IgG1 had titer 1:256 measured by immunofluorescence technique.
Emelianov, Vladimir U;Skvortsova, Tatiana;Mikhailova, Lilia V;Shamitova, Elena N
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.17
no.1
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pp.281-283
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2016
The Cholangiocarcinoma is a. The risk of development of cholangiocarcinoma, generally a rare type of a liver tumor, increases during infection of Opisthorchiasis. For this reason the timely detection of Opisthorchiasis is important for Cholangiocarcinoma prevention. There are many studies which concern the detection of pathogenesis of Opisthorchis viverrini infection but a little known about Opisthorchis felineus. In this study we investigate a correlation of the eggs which are found in a faeces and are comparable with a serum Ig G and Ig M antibody level that were detected with ELISA test in a large group of patients. The result is showing positive correlation between evidence of the Opisthorchis felineus eggs that were found in a faeces and antibody Ig G and Ig M level in a serum. Moreover the combination of two methods can improve the Opisthorchiasis diagnostic: the serum antibody and faeces investigation of eggs.
This work was conducted to examine the variation of immunoglobulins (Igs) in serum, immune milk, normal milk and colostrum upon implantation of a new Antigen Releasing Device (ARD). The core of each ARD housed an immunostimulating complex (ISCOM) that was made of adjuvant Quil A and type XIII lipase from a Pseudomonas sp. Each ARD was coated with polylactic acid, known as polylactide, that controls antigen release. Twenty lactating Chinese Holstein cows were divided into 2 groups (n = 10): test group and control group. All cows in the test group were implanted with a single injection in the right iliac lymph node with 3 types of ARDs, which were designed to release the antigens at d 0, 14 and 28 post-implantation. Blood and milk samples were collected from both groups, and colostrum samples were also collected from other post-partum cows in the same farm. Concentrations of $IgG_1$, IgA and IgM in whey and serum were measured by sandwich ELISA. The results showed that the $IgG_1$, IgA and IgM concentrations in serum and whey from the test group were higher than from the control group. Among the three Igs measured, the $IgG_1$ concentration in serum was significantly higher at d 40 after ARD implantation, and the $IgG_1$ concentration in whey peaked at d 9, 17 and 30, which corresponded with release of the antigen. Based on Pearson's correlation between Ig concentration and production parameters, IgA concentration in normal milk was positively correlated with lactation period, which reflected IgA changes during the lactation period in immune milk. In colostrum, $IgG_1$, IgA and IgM decreased abruptly from d 0 to 3, and then decreased slightly. In conclusion, serum $IgG_1$ concentration can be affected by controlled release of the ARD, while whey IgA levels are primarily affected by lactation period. These results may be useful in future studies designed to regulate concentrations of Igs in immune milk.
To evaluate the immature eggs of Paragonimus westermani as a source of diagnostic antigen, about a million eggs which were excreted by 104 adult worms were collected; their saline extract(soluble egg antigen; PwSEA) was prepared. The specific IgG and IgM antibody levels were observed in experimental dog paragonimiasis by micro ESISA, using PwSEA as well as whole worm extract of 12 week-old P. westermani(PwWWE). The protein composition of the PwSEA was observed by disc-PAGE. The results could be summarized as follows: 1. Specific IgG antibody to PwSEA begant to increase on 8 weeks after the experimental infection; it maintained its high level until the observation period of 13 weeks. The levels of IgM antibody to PwSEA however, did not show any significant change. 2. Specific IgG antibody to PwWWE began to increase earlier from 2 weeks after the infection and continued to increase until the observation period of 13 weeks. Its level was much higher than that to PwSEA. Specific IgM antibody to PwWWE increased temporarily during 2-8 weeks after the infection. 3. By disc-PAGE, PwSEA showed 2 protein bands of very low motility. The bands of PwSEA corresponded to the frist and second bands in the electrophoretic pattern of PwWWE of the 12 week-old worms. The above results indicated that the PwSEA induced antibody production in dog paragonimiasis, but its antigenicity was weaker than PwWWE to be used as a diagnostic antigen.
The present study were carried out to investigate the effects of Vomitoxin(Deoxynivalenol, DON) induced dysregulation of IgA synthesis. The data presented here demonstrate that exposure to dietary DON increases serum IgA and concurrently decreases IgG and IgM. Peyer's path(PP) and splenocytes from mice fed dietary DON produced increased IgA in mitogen stimulated and macrophage(MØ) perform essential role for Ig synthesis and was affected by the presence of DON. The synthesis and secretion of IgM and IgG under the presence of DON do not require T cell helper activity, whereas those of IgA do require such activity. These results suggest that dietary DON alters the regulation of IgA production and may act as an immunostimulator.
The levels of the serum and colostral total protein and immunoglobulins of the Korean native cows immediately after parturition and colostrum-conferred passive immune status of the Korean native calves were studied, and the results obtained were summerized as follows: The mean total protein, total immunoglobulin, IgG, IgM, and IgA concentrations in sera of 10 Korean native cows immediately after parturition were $6.8{\pm}0.4g/dl$, $24.39{\pm}3.41mg/ml$, $19.49{\pm}2.70mg/ml$, $4.56{\pm}1.14mh/ml$, and $0.35{\pm}0.08mg/ml$ respectively. And the mean total protein, total immunoglobulin, IgG, IgM, and IgA concentrations in colostrum were $15.0{\pm}1.1g/dl$, $116.13{\pm}23.07mg/ml$, $101.51{\pm}22.59mg/ml$, $9.46{\pm}1.99mg/ml$, and $5.17{\pm}1.59mg/ml$ respectively. The mean concentrations of total protein and immunoglobulins in colostrum were 2.1 times to 14.8 times higher than those in serum. The mean concentrations of total protein, total immunoglobuln, IgG, IgM, and IgA in sera from 211 Korean native calves at 2 days old were $6.7{\pm}0.9g/dl$, $35.74{\pm}9.56mg/ml$, $29.06{\pm}8.07mg/ml$, $4.91{\pm}2.99mg/ml$, and $1,9{\pm}0.99mg/ml$ respectively. Although the calves had been suckled the dam's colostrum, each of calves was considerably various in levels of serum total protein and immunoglobulins and 16.1 percent of the calves were in a state of hypoglobulinemia.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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