Bilal Bakir;Mehmet Tanyuksel;Fatma Saylam;Sultan Tanriverdi;R. engin Araz;Hacim, Ali-Kasim;Metin Hasde
Journal of Microbiology
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v.41
no.2
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pp.148-151
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2003
Waterborne parasite infections are considered a reemerging threat. Most studies on the epidemiology of human cryptosporidiosis, giardiasis, and amebiasis have been carried out in developed countries, and there is little data on the occurrence of these infections in other areas. The objective of this study was to investigate the presence of waterborne parasites such as Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia and Entamoeba histolytica in various water samples in Ankara, turkey. A total of 85 samples were examined, 43 from the municipal water supply, 34 from wells, 6 from the Ankara River, and 2 from two untreated dams; by conventional microscopy, immunologically and by polymerase chain reaction (PCR). Oocysts of C. parvum and cysts of G. lamblia were detected by using an indirect fluorescence (antigen) assay, whereas an enzyme linked immunosorbent assay was used to detect the cysts of E. histolytica and E. dispar. In addition, PCR was used for E. histolytica, E. dispar, C. parvum and G. lamblia detection. G. lamblia was found in 2 of the 34 well water samples, and parasites were found in 3 of the 6 Ankara River samples. The 1$\^$st/ contained E. histolytica cysts and Strongyloides stercoralis larvae. the 2$\^$nd/ E. histolytica cysts, and Trichuris trichiura eggs, and the 3$\^$rd/ C. parvum oocysts only. No parasite was observed in the municipal water samples and untreated dam water samples. These results extend our knowledge on waterborne parasites, such occurrence information on waterborne pathogens assists the management and treatment of municipal water.
This study aimed to develop a new multiplex real-time PCR detection method for 3 species of waterborne protozoan parasites (Cryptosporidium parvum, Giardia lamblia, and Cyclospora cayetanensis) identified as major causes of traveler's diarrhea. Three target genes were specifically and simultaneously detected by the TaqMan probe method for multiple parasitic infection cases, including Cryptosporidium oocyst wall protein for C. parvum, glutamate dehydrogenase for G. lamblia, and internal transcribed spacer 1 for C. cayetanensis. Gene product 21 for bacteriophage T4 was used as an internal control DNA target for monitoring human stool DNA amplification. TaqMan probes were prepared using 4 fluorescent dyes, $FAM^{TM}$, $HEX^{TM}$, $Cy5^{TM}$, and CAL Fluor $Red^{(R)}$ 610 on C. parvum, G. lamblia, C. cayetanensis, and bacteriophage T4, respectively. We developed a novel primer-probe set for each parasite, a primer-probe cocktail (a mixture of primers and probes for the parasites and the internal control) for multiplex real-time PCR analysis, and a protocol for this detection method. Multiplex real-time PCR with the primer-probe cocktail successfully and specifically detected the target genes of C. parvum, G. lamblia, and C. cayetanensis in the mixed spiked human stool sample. The limit of detection for our assay was $2{\times}10$ copies for C. parvum and for C. cayetanensis, while it was $2{\times}10^3$ copies for G. lamblia. We propose that the multiplex real-time PCR detection method developed here is a useful method for simultaneously diagnosing the most common causative protozoa in traveler's diarrhea.
Almeida, Andre;Moreira, Maria Joao;Soares, Sonia;Delgado, Maria de Lurdes;Figueiredo, Joao;Silva, Elisabete;Castro, Antonio;Da Cosa, Jose Manuel Correida
Parasites, Hosts and Diseases
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v.48
no.1
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pp.43-48
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2010
Cryptosporidium and Giardia are 2 protozoan parasites responsible for waterborne diseases outbreaks worldwide. In order to assess the prevalence of these protozoans in drinking water samples in the northern part of Portugal and the risk of human infection, we have established a long term program aiming at pinpointing the sources of surface water, drinking water, and environmental contamination, working with the water-supply industry. Total 43 sources of drinking water samples were selected, and a total of 167 samples were analyzed using the Method 1623. Sensitivity assays regarding the genetic characterization by PCR and sequencing of the genes, 18S SSU rRNA, for Cryptosporidium spp. and $\beta$, -giardin for G. duodenalis were set in the laboratory. According to the defined criteria, molecular analysis was performed over 4 samples. Environmental stages of the protozoa were detected in 25.7% (43 out of 167) of the water samples, 8.4% (14 out of 167) with cysts of Giardia, 10.2% (17 out of 167) with oocysts of Cryptosporidium and 7.2% (12 out of 167) for both species. The mean concentrations were 0.1-12.7 oocysts of Cryptosporidium spp. per 10 L and 0.1-108.3 cysts of Giardia duodenalis per 10 L. Our results suggest that the efficiency in drinking water plants must be ameliorated in their efficiency in reducing the levels of contamination. We suggest the implementation of systematic monitoring programs for both protozoa. To authors' knowledge, this is the first report evaluating the concentration of environmental stages of Cryptosporidium and Giardia in drinking water samples in the northern part of Portugal.
The present status of control measures for public health important helminthic infections in Korea was surveyed in 1969 and the following results were obtained. The activities of parasitic examination and Ascaris treatment for the positives which were done during 1966 to 1969 were brought in poor result and could not decrease the infection rate. It is needed to improve or strengthen the activities. The mass treatment activities for paragonimiasis and clonorchiasis in the areas which were designated by the Ministry of Health were carried out during 1965 to 1968 with no good results in decrease of estimated number of the patients. There were too many pharmaceutical companies where many kinds of anthelmintics were produced. It may be better to reduce the number of anthelmintics produced and control the quality. The human feces, the most important source of helminthic infections, was generally not treated in sanitary ways because of the poor sewerage system and no sewage treatment plant in urban areas and insanitary latrines in rural areas. The field soils of 170 specimens were collected from 34 areas out of 55 urban and tourist areas where night soil has been prohibited by a regulation to be used as a fertilizer, and examined for parasites contamination with the result of Ascaris egg detection in 44%. Some kinds of vegetables of 64 specimens each from the supply agents of parasite free vegetables and general markets were collected and examined for parasites contamination with the results of Ascaris egg detection in 25% and 36% respectively. The parasite control activities and the ability of parasitological examination techniques in the health centers of the country were not satisfactory. The budget of the Ministry of Health for the parasite control was very poor. The actual expenditure needed for cellophane thick smear technique was 8 Won per a specimen. As a principle the control of helminthic infections might be led toward breaking the chain of events in the life cycle of the prasites and eliminating environmental and host factors concerned with the infections, and the following methods nay be pointed out. 1) Mass treatment might be done to eliminate human reservoirs of an infection. 2) Animal reservoirs which are related with human infections night be eliminated. 3) The excretes of reservoirs, particularly human feces, should be treated in sanitary ways by the means of sanitary sewerage system and sewage treatment plant in urban areas and sanitary latrines such as waterborne latrine, aqua privy and pit latrine in rural areas. The increase of national economical development and prohibition of the habit of using night soils as a fertilizer might be very important factors to achieve the purpose. 4) The control of vehicles and intermediate hosts might be done by the means of prohibition of soil contamination with parasites, food sanitation, insect control and snail control. 5) The improvement of insanitary attitudes and bad habits which are related with parasitic infections night be done by the means of prohibition of habit of using night soils as a fertilizer, and improving eating habits and personal hygiene. 6) Chemoprophylactic measure and vaccination may be effective to prevent the infections or the development of a parasite to adult in the bodies when the bodies were invaded by parasites. Further studies and development of this kind of measures are needed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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