Multiple species of muridae and arvicolidae rodents serve as the natural reserviors of hantaviruses. Hantaviruses are distributed in rodent populations world-widely even in geographical areas where hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) has not been reported. Serologic diagnosis of infection, using hantaviral antigen, indicates that hantaviruses are widey distributed in wild rodents. This study was designed to intended the hantavirus infection among wild rodents captured in Kyebang mountain, Kangwon-do in Korea. A total of 216 wild rodents in 3 species were trapped in July and September in 1995. Serological evidence for hantaviruses infection were tested against five hantavirus antigens by indirect immunofluorescent antibody technique (IFA). Among 100 Eothenomys regulus, 78 Apodemus peninsulae and 38 Apodemus agrarius; 12 C. regulus, 15 A. peninsulae and 6 A. agrarius were IF antibody positive against hantaviruses. This data suggest that Eothenomys regulus and Apodemus peninsulae would be a natural reservoir of hantaviruses.
The HIV-1 p24(202-221) sequence ETINNEEEWDRVHPV HAGP contains a B-cell epitope with the earliest immune response and the highest antibody titer against anti-mouse sera obtained by immunization with p24 antigens. A novel mouse monoclonal antibody (mAb) was generated against the immunodominant B-cell epitope of the HIV-1 p24 capsid protein, p24(202-221). BALB/c mice were immunized with the four branched multiple antigenic peptide (MAP) containing the HIV-1p24(202-221) sequence, and antibody-secreting hybridoma were produced by fusion of mouse splenocytes with P3X63Ag8.653, mouse myeloma cells. One clone which produced the antigen-specific mAb named KI-24 (Isotype IgG1, light chain: ${\kappa}$) was identified. mAb KI-24 was highly specific for both the p24(202-221) and p24 proteins when analyzed by ELISA and Western blotting. Since p24(202-221) also contains a cytotoxic T-lymphocyte epitope, this specfic peptide epitope and the monoclonal antibody with specific reactivity against the p24 protein and p24(202-221) can be used in peptide vaccine development and p24 antigen detection from HIV patients.
Park, Tae-Jung;Park, Jong-Pil;Lee, Seok-Jae;Hong, Hyo-Jeong;Lee, Sang-Yup
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.11
no.2
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pp.173-177
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2006
In this study, a novel strategy was developed for the highly selective immobilization of proteins, using the polyhydroxyalkanoate (PHA) depolymerase substrate binding domain (SBD) as an active binding domain. In order to determine the appropriacy of this method for immunodiagnostic assays, the single-chain antibody (ScFv) against the hepatitis B virus (HBV) preS2 surface protein and the severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) envelope protein (SCVe) were fused to the SBD, then directly immobilized on PH A-coated slides via microspotting. The fluorescence-labeled HBV antigen and the antibody against SCVe were then utilized to examine specific interactions on the PHA-coated surfaces. Fluorescence signals were detected only at the spotted positions, thereby indicating a high degree of affinity and selectivity for their corresponding antigens/antibodies. Furthermore, we detected small amounts of ScFv-SBD (2.7 ng/mL) and SCVe-SBD fusion proteins (0.6ng/mL). Therefore, this microarray platform technology, using PHA and SBD, appears generally appropriate for immunodiagnosis, with no special requirements with regard to synthetic or chemical modification of the biomolecules or the solid surface.
A total of 5 animals including 3 raccoons, 1 badger, and 1 fennec fox kept in outdoor exhibits at the Everland Zoological Gardens showed depression, anorexia, dyspnea, serous oculonasal discharge, diarrhea, and convulsions. All the affected animals died within 10 days after the onset of clinical signs. This outbreak lasted about 4 months. On necropsy, major gross lesions were confined to the lungs. Red to grey sublobular to lobular consolidations with various sized tan to reddish spots were observed in the lungs. Histopathologically, the pulmonary lesions were characterized by acute to subacute bronchointerstitial pneumonia with secondary bacterial or adenoviral infections. Intracytoplasmic eosinophilic inclusion bodies compatible with canine distemper virus (CDV) were found in the lung, urinary bladder, kidney, intrahepatic bile duct, stomach, small and large intestines. Multifocal areas of severe demyelination and accumulation of gitter cells or nonsuppurative inflammation were seen in the brains of 2 raccoons. CDV -specific antigens were demonstrated in the lung sections on immunofluorescent assay. The present report describes an outbreak of CDV infection in a zoo and indicates the range of susceptible zoo animal species.
Kang, Shien-young;Nagaraja, Kakambi V.;Newman, John A.
Korean Journal of Veterinary Research
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v.33
no.2
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pp.217-225
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1993
Commercial turkey poults not previously exposed to avian rotavirus were inoculated orally with the virus alone or in combination with E coki serotype 078 at 1, 7, 14 and 21 days of age. Turkey poults of 1, 7 and 14 days of age were susceptible to infection despite the presence of maternal antibodies against avian rotavirus in their serum. However, turkey poults at 21 days of age were less susceptible compared to those ages 1, 7 and 14 days. The clinical signs in poults of all ages were mild. Viral antigens were demonstrated in the mature villous epithelial cells of the duodenum, jejunum and ilem. Histopathological lesions were characterized by vacuolation of the epithelial cells and heterophil infiltration in infected turkey poults. A significant difference in D-xylose absorption was observed between control and rotavirus infected groups at 1 and 3 days post-infection in 14 days old turkey poults.
Lee, Boram;Ahn, Soomin;Kim, Haeryoung;Han, Ho-Seong;Yoon, Yoo-Seok;Cho, Jai Young;Choi, Young Rok
Korean Journal of Transplantation
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v.32
no.4
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pp.108-112
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2018
Antibody-mediated rejection (AMR) is a major complication after ABO-incompatible liver transplantation. According to the 2016 Banff Working Group on Liver Allograft Criteria for the diagnosis of acute AMR, a positive serum donor specific antibody (DSA) is needed. On the other hand, the clinical significance of the histological findings of AMR in the absence of DSA is unclear. This paper describes a 57-year-old man (blood type, O+) who suffered from hepatitis B virus cirrhosis with hepatocellular carcinoma. Pre-operative DSA and cross-matching were negative. After transplantation, despite the improvement of the liver function, acute AMR was observed in the protocol biopsy on postoperative day 7; the cluster of differentiation 19+ (CD19+) count was 0% and anti-ABO antibody titers were 1:2. This paper presents the allograft injury like AMR in the absence of DSA after ABOi living donor liver transplantation with low titers of anti-ABO antibody and depleted serum CD19+ B cells.
African swine fever (ASF) is a highly contagious disease of domestic pigs and wild boars (WBs). Without a vaccine, early antibody and antigen detection and rapid diagnosis are crucial for the effective prevention of the disease and the employment of control measures. In Sardinia, where 3 different suid populations coexisted closely for a long time, the disease persists since 1978. The recent ASF eradication plan involves more stringent measures to combat free-ranging pigs and any kind of illegality in the pig industry. However, critical issues such as the low level of hunter cooperation with veterinary services and the time required for ASF detection in the WBs killed during the hunting season still remain. Considering the need to deliver true ASF negative carcasses as early as possible, this study focuses on the evaluation and validation of a duplex pen-side test that simultaneously detects antibodies and antigens specific to ASF virus, to improve molecular diagnosis under field conditions. The main goal was to establish the specificity of the two pen-side tests performed simultaneously and to determine their ability to detect the true ASF negative carcasses among the hunted WBs. Blood and organ samples of the WBs hunted during the 2018/2019 hunting seasons were obtained. A total of 160 animals were tested using the pen-side kit test; samples were collected for virological and serological analyses. A specificity of 98% was observed considering the official laboratory tests as gold standards. The new diagnostic techniques could facilitate faster and cost-effective control of the disease.
Park, Jung-Won;Chun, Ji-Eun;Yang, Dong-Kun;Bak, Eun-Jung;Kim, Han;Lee, Myeong-Heon;Hwang, Eui-Kyung;Lee, Chung-Bok;Woo, Gye-Hyeong
Korean Journal of Veterinary Research
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v.52
no.2
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pp.125-131
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2012
Rabbit hemorrhagic disease is a highly acute and fatal viral disease caused by rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV). Since first outbreak in Korea 1987, RHDV has been continually affected in the country, but the pattern of outbreak seem to be changed. In this study, to understand the pathogenesis of the new RHDVa serotype, we therefore carried out to inoculate RHDVa to rabbits, and to examine the sequential histopathologic changes and viral distribution. Macroscopically, various sized dark red or white spots or appearance were observed in the liver, lung, kidney uterus and ureter. In euhanized rabbits, significant pathologic findings such as infiltration of heterophils and mononuclear cells were observed at 24 hours after inoculation (HAI), and these were sequentially extended periportal to centrilobular area. However, in dead rabbits, severe hepatic degeneration and/or necrosis with relatively weak inflammatory responses were observed. RHDV antigens began to detect in liver, spleen, and lung from 12 HAI by PCR. Immunohistochemically, RHDV positive cells were seen in only liver from 24 HAI, and the degree of immunogen reactivity was stronger in dead rabbits than in euthanized ones. In conclusion, RHDVa caused the subacute or chronic infection accompanying low mortality and moderate to severe inflammatory reaction in rabbits, suggesting the possibility that RHD could become endemic.
Park, Mirye;Suh, Sung-Suk;Hwang, Jinik;Kim, Donggiun;Park, Jongbum;Chung, Young-Jae;Lee, Taek-Kyun
Journal of Life Science
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v.24
no.9
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pp.995-1000
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2014
The studies of marine viruses in terms of viral isolation and detection have been limited due to the high mutation rate and genetic diversity of marine viruses. Of the modern methods currently used to detect marine viruses, serological methods based on enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) are the most common. They depend largely on the quality of the antibodies and on highly purified suitable antigens. Recently, a new experimental system for using viral capsid protein as an antigen has been developed using the yeast surface display (YSD) technique. In the present study, the capsid protein gene of the red-spotted grouper nervous necrosis virus (RGNNV) was expressed and purified via YSD and HA-tagging systems, respectively. Two regions of the RGNNV capsid protein gene, RGNNV1 and RGNNV2, were individually synthesized and subcloned into a yeast expression vector, pCTCON. The expressions of each RGNNV capsid protein in the Saccharomyces cerevisiae strain EBY100 were indirectly detected by flow cytometry with fluorescently labeled antibodies, while recognizing the C-terminal c-myc tags encoded by the display vector. The expressed RGNNV capsid proteins were isolated from the yeast surface through the cleavage of the disulfide bond between the Aga1 and Aga2 proteins after ${\beta}$-mercaptoethanol treatment, and they were directly detected by Western blot using anti-HA antibody. These results indicated that YSD and HA-tagging systems could be applicable to the expressions and purification of recombinant RGNNV capsid proteins.
Background: The impact of the immune response on cancer gene therapy using viral vectors to deliver a "suicide gene" is currently unclear. A vigrous immune response targeted at viral proteins or transgene may enhance the efficacy of tumor destruction and even augment responses to tumor antigens. These responses may involve the release of cytokines and stimulation of tumor specific cytotoxic T-lymphocytes that enhance therapeutic efficacy. On the other hand, a vigorous rapid cellular immune response may destroy cells expressing the therapeutic gene and attenuate the response to therapy. Furthermore, development of neutralizing antibody responses may prevent readministration of virus, a potentially significant limitation. Evaluating the significance of these limitations in animal models and developing solutions are therefore of obvious importance. Methods: After retroviral transduction of mouse mesothelioma cell line(AB12) with Herpes Simplex Virus thymidine kinase (HSVtk) gene in vitro, subcutaneous flank tumors were established. To study the effect of intact immune system on efficacy of tumor erradication, the ability of the HSVtk/ganciclovir system to inhibit tumor growth was compared among normal Balb/c mice, immunodeficient Balb/c-nude and SCID mice, and Balb/c mice immunosuppressed with cyclosporin. Results: Ganciclovir treatment resulted in greater inhibition of tumor growth in Balb/c mice compared with immunodeficient Balb/c-nude mice and SCID mice(in immunodeficient mice, there were no growth inhibition by ganciclovir treatment). Ganciclovir treatment resulted in greater inhibition of tumor growth in noncyclosporin (CSA) treated Balb/c mice compared with CSA treated Balb/c mice. On day 8, mean ganciclovir-treated tumor volume were 65% of control tumor volume in Balb/c mice versus 77% control tumor volume in CSA-treated Balb/c mice. This effect was still evident during therapy (day 11 and 13). On day 13, non-CSA treated tumor volume was 35% of control tumor volume versus 60% of control tumor volume in CSA treated Balb/c mice. Duration of expression of HSVtk was not affected by the immunosuppression with CSA. Conclusion: These results indicate that the immune responses against retrovirally transduced cells enhance the efficacy of the HSVtk/ganciclovir system. These findings have important implications for clinical trials using currently available retrovirus vectors as well as for future vector design.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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