Virgiamycin 생산 우도 인자인 virginiae butanolide C(VB-C)의 전달기구 해명을 위한 기초적 연구로서 receptor성 VB-C 결합단백질의 recycle 가능성 및 인산화가능성을 검토하였다. 배양 시간에 따른 [$^{3}$H] $VB-C_{7}$ 와의 결합활성은 virginiamycin 생산중지와 함께 증대되어 VB-C 결합단백질의 recycle 이 추정되었으며, S. virginiae 의 genome DNA 공존시 40-50% 의 결합 활성 저하로부터 DNA 와 결합에 의한 signal 전달가능성과 $\lambda-^{32}P$ ATP 에 의해 분자량 36, 000 의 VB-C결합단백질이 인산화된 결과로부터 인산화를 통한 signal 전달가능성이 시사되었다.
The present study was conducted to evaluate the effect of the dietary supplementation of Bacillus amyloliquefaciens-based direct-fed microbial (DFM) on growth performance, nutrient utilization, intestinal morphology and cecal microflora in broiler chickens. A total of two hundred and eighty eight 1-d-old Arbor Acres male broilers were randomly allocated to one of four experimental treatments in a completely randomized design. Each treatment was fed to eight replicate cages, with nine birds per cage. Dietary treatments were composed of an antibiotic-free basal diet (control), and the basal diet supplemented with either 15 mg/kg of virginiamycin as antibiotic growth promoter (AGP), 30 mg/kg of Bacillus amyloliquefaciens-based DFM (DFM 30) or 60 mg/kg of Bacillus amyloliquefaciens-based DFM (DFM 60). Experimental diets were fed in two phases: starter (d 1 to 21) and finisher (d 22 to 42). Growth performance, nutrient utilization, morphological parameters of the small intestine and cecal microbial populations were measured at the end of the starter (d 21) and finisher (d 42) phases. During the starter phase, DFM and virginiamycin supplementation improved the feed conversion ratio (FCR; p<0.01) compared with the control group. For the finisher phase and the overall experiment (d 1 to 42) broilers fed diets with the DFM had better body weight gain (BWG) and FCR than that of control (p<0.05). Supplementation of virginiamycin and DFM significantly increased the total tract apparent digestibility of crude protein (CP), dry matter (DM) and gross energy during both starter and finisher phases (p<0.05) compared with the control group. On d 21, villus height, crypt depth and villus height to crypt depth ratio of duodenum, jejunum, and ileum were significantly increased for the birds fed with the DFM diets as compared with the control group (p<0.05). The DFM 30, DFM 60, and AGP groups decreased the Escherichia coli population in cecum at d 21 and d 42 compared with control group (p<0.01). In addition, the population of Lactobacillus was increased in DFM 30 and DFM 60 groups as compared with control and AGP groups (p<0.01). It can be concluded that Bacillus amyloliquefaciens-based DFM could be an alternative to the use of AGPs in broilers diets based on plant protein.
Ramiah, Suriya Kumari;Zulkifli, Idrus;Rahim, Nordiana Asyikin Abdul;Ebrahimi, Mahdi;Meng, Goh Yong
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제27권3호
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pp.375-382
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2014
The competency of garlic and pennywort to improve broiler chicken growth and influence intestinal microbial communities and fatty acid composition of breast meat were studied. Two hundred forty, "day-old" chicks were randomly allocated to 4 treatment groups consisting of 6 replications of 10 chicks in each pen. The groups were assigned to receive treatment diets as follows: i) basal diet (control), ii) basal diet plus 0.5% garlic powder (GP), iii) basal diet plus 0.5% pennywort powder (PW) and iv) 0.002% virginiamycin (VM). Birds were killed at day 42 and intestinal samples were collected to assess for Lactobacillus and Escherichia coli. The pectoralis profundus from chicken breast samples was obtained from 10 birds from each treatment group on day 42 and frozen at $-20^{\circ}C$ for further analyses. Fatty acid profile of breast muscles was determined using gas liquid chromatography. Feed intake and weight gain of broilers fed with GP, PW, and VM were significantly higher (p<0.05) compared to control. Feeding chicks GP, PW, and VM significantly reduced Escherichia coli count (p<0.05) while Lactobacillus spp count were significantly higher (p<0.05) in the gut when compared to control group on day 42. Supplemented diet containing pennywort increased the C18:3n-3 fatty acid composition of chickens' breast muscle. Garlic and pennywort may be useful in modulating broiler guts as they control the enteropathogens that help to utilize feed efficiently. This subsequently enhances the growth performances of broiler chickens.
닭에 대한 생균제 및 항생제의 성장촉진 효과 및 장내세균총에 미치는 영향을 측정하기 위하여 산란계 숫병아리 180수를 무첨가 대조구, 항생제구(virginiamycin 5ppn), 생균제구로 나누어 처리당 60수를 10수씩 battery에 완전 임의배치하여 사양실험을 하고 이어서 대사시험과 장기관 무게 및 소장내용물의 세균총 분석을 실시하였다. 실험에서 얻어진 결과에 의하면 증체량과 사료섭취량에는 처리간에 유의차가 없었으나 사료효율에 있어서는 항생제구가 생균제와 대조구에 비하여 유의하게 좋았다 (P〈0.01). 건물, 조단백질, 조지방, NEE, Ca, P의 이용율에 있어서는 처리간에 통계적 유의성이 없었으나 조섬유의 이용율은 항생제구가 유의하게 낮았다 (P〈0.05). 대사체중당 소장의 무게는 항생제구가 타 처리구에 비하여 유의하게 가벼웠다 (P〈.0.05). 맹장의 무게에 있어서 통계적 유의성은 없었으나 생균제구가 타 처리구에 비해 가벼운 경향이 있었다. 소장내용물의 세균총 변화는 생균제를 급여 한 구에서 Bacillus subtilis와 Lactobacilli 의 수가 타처리구에 비하여 유의하게 (P〈0.01) 많았으며 Coliforms 의 수는 생균제와 항생제구가 대조구에 비하여 유의하게 적었다 (P〈0.01).
본 연구는 육계 및 산란계 맹장에서 분리하여 유기산 생성 능력, 내산성, 내담즙성 및 성장특성을 토대로 선발된 유산균 6종(Lacto- bacillus reuteri BLA5, Lactobacillus crispatus avibro1, Lactobacillus reuteri avibro2, Lacto- bacillus amylovorus LLA7, Lactobacillus crispatus avihen1, Lactobacillus vaginalis avihen2)의 효소, 항균 활성 및 항생제 감수성을 조사하여 생균제로서의 이용 가치를 구명하고자 실시하였다. 육계 및 산란계 맹장 유래 유산균은 효소 활성에 있어서는 균주마다 차이가 있었으나, 일반적으로 amylase와 lipase 활성이 강한 것으로 나타났고 반면, cellulase 및 protease의 활성은 약한 것으로 나타났다. 유산균 배양액은 병원성 E. coli에 대하여 강한 항균 활성을 보였으며, 주요 억제 요인으로는 유기산 분비에 의한 pH 저하에 의한 것으로 나타났다. 병원성 Salmo- nella에 대해서는 유산균 배양액의 억제성이 약한 것으로 나타났다. 유산균은 치료용 항생제로 이용되는 ampicillin과 amoxicillin에 대해서는 높은 감수성을 보인 반면 사료용 항생제(virginiamycin 및 salinomycin)의 경우 정상적인 첨가 수준에서는 영향을 받지 않았다.
Streptomyces virginiae가 생산하는 virginimycin 생산 유도인자(virginiae butanolide C,VB-C) 결합 단백질의 ligand(VB-C)와의 결합활성에 미치는 일반적인 성질을 검토한 결과, 본 VB-C 결합단백질은 막성분을 제외한 세포질에 90% 이상 존재하며, 최적 pH는 7.0인 것으로 입증되었다. KCL 존재하 약 15%의 결합활성이 증대되었으며,$Mo^{6+}$ 이온 존재시 60%의 결합활성 저하를 보였다.
먹는물(정수) 중에 잔류하는 버지니아마이신을 비롯한 macrolide 계열 의약물질 3종과 시메티딘을 동시에 정량 및 정성 분석하는 방법을 확립하였다. HLB 카트리지를 사용하여 분석물질을 추출/정제 및 농축한 후, HPLC/ESI-MS/MS를 이용하여 4종의 물질들을 효과적으로 분리하고 감도 좋게 검출할 수 있었다. 정량분석을 위해서 0.01~2.0 ng/mL 범위에서 $r^2$=0.995이상의 높은 직선성을 나타내는 검량선을 얻었으며, 시메티딘(37.7~48.1%)을 제외한 macrolide 계열 3종 의약물질은 64.7~118.1% 범위의 양호한 회수율을 나타내었다. 바탕 정수에 소량 첨가하여 얻은 분석방법의 검출한계와 정량한계는 각각 1.6~74.8 pg/mL 와 5.5~249.7 pg/mL 범위의 높은 감도를 나타내었다.
This study was carried out to select the lactic acid bacteria(Lactobacillus, Streptococcus and Bifidobacterium) and yeast for probiotic use in pigs. Acid-tolerant 536 strains were isolated from the feces of 30 pigs. To select useful strains, the first screened strains were treated with strong acid solution(pH 2.5 to 3.0) for 3 hours and subsequentely treated with the anaerobic diluent solution containing 0.15% Oxgall for 3 hours. Among these strains, 151 strains showed strong tolerance to both acid and bile. Lactobacillus and Streptococcus tolerant to the acid and bile were treated with heat at $80^{\circ}C$ for 15 min, and at $70^{\circ}C$ for 5 min in Bifidobacterium and yeast. As a result of heat treatment, 38 strains were obtained as heat-tolerant strains. All of heat-tolerant strains were tested for antibiotic resistance against virginiamycin, sulfathiazole, aureomycin, neomycin, linsmycin, tiamulin and ASP250 which were used as feed additives for growth promotion in pigs. Finally, one strain each from Lactobacillus, Streptococcus, Bifidobacterium and yeast that showed resistance to acid, bile, heat and antibiotics was selected for probiotic use in pigs.
본 연구에서는 사료 내 복합 유기산제의 첨가급여가 육계 생산성, 맹장 미생물 균총, 혈액 특성 및 면역 활성에 미치는 영향을 조사하고 이를 통해 유기산의 성장촉진용 항생제 대체 가능성을 구명하고자 수행하였다. 1일령 육계 수평아리(Ross$\times$Ross 308) 480수를 공시하여 4처리, 4반복, 반복당 30수씩 배치하여 5주간 사양시험을 실시하였다. 시험구는 항생제 무첨가구, 항생제 첨가구(virginiamycin 10 ppm+salinomycin 60 ppm)를 대조구로 하였으며, 시험사료에 유기산을 0.3% 및 0.5% 첨가하여 유기산 처리구를 두었다. 5주 종료체중, 증체량에 있어서 유기산 0.5% 처리구가 무항생제 처리구에 비해 유의하게 증가하였으며(P<0.05), 유기산 첨가 급여시 무항생제 처리구에 비해 사료 요구율이 유의하게 개선되었다(P<0.05). 도체율 및 조직의 상대적 중량에서는 처리구간 차이가 관찰되지 않았다. 소장 중량 및 길이는 항생제 첨가구가 다른 처리구에 비해 유의하게 감소하였으나(P<0.05), 유기산 처리구와 항생제 무첨가구간에는 차이가 없었다. 맹장 내 미생물 균총에 있어서 대조구인 항생제 첨가구와 유기산 처리구에서 맹장내 Coliform bacteria 및 Salmonella가 유의하게 감소하였으며 유산균에는 영향을 미치지 않았다. 혈액 내 총콜레스테롤, 중성지방, BUN, AST 및 ALT에 있어서는 통계적 유의성이 인정되지 않았다. Total protein 및 globulin 수치에 있어서는 항생제 첨가구 및 유기산 처리구가 항생제 무첨가구에 비해 유의하게 감소하였으며(P<0.05), albumin 수치에서는 차이가 없었다. 이로인해 항생제 첨가구 및 유기산 처리구의 혈청 내 albumin : globulin 비율이 항생제 무첨가구에 비해 유의하게 증가하는 결과를 보였다(P<0.05). WBC, heterophil, lymphocyte 및 스트레스 지표인 heterophil:lymphocyte 비율에 있어서 처리구간 차이가 관찰되지 않았으며, 비장 조직내 IL-2 및 IL-6 mRNA의 발현양상에 있어서도 유기산 첨가급여에 따른 변화는 관찰되지 않았다. 결론적으로 복합 유기산제의 육계 사료 내 첨가급여는 육계 생산성을 향상시키고, 유해균의 성장 및 증식을 억제하여 장내 미생물 균총의 안정화에 긍정적인 영향을 미치는 한편, 조직 발달 및 혈액 성상에 부정적인 영향을 미치지 않았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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