Vibrio vulnificus is a gram-negative bacterium that can cause serious, potentially fatal infections. V. vulnificus causes three distinct syndromes: an overwhelming primary septicemia caused by consuming contaminated seafood, wound infections acquired when an open wound is exposed to contaminated warm seawater, and gastrointestinal tract-limited infections. Case-fatality rates are higher than 50% for primary septicemia, and death typically occurs within 72 hours of hospitalization. Risk factors for V. vulnificus infection include chronic liver disease, alcoholism, and hematological disorders. When V. vulnificus infection is suspected, appropriate antibiotic treatment and surgical interventions should be performed immediately. Third-generation cephalosporin with doxycycline, or quinolone with or without third-generation cephalosporin, may be potential treatment options for patients with V. vulnificus infection.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.132.2-132.2
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2003
Vibrio vulnificus, a Gram-negative estuarine bacterium, is the causative agent of food-borne diseases, such as life-threatening septicemia. V. vulnificus penetrating into the intestinal epithelial barrier stimulates an inflammatory response in the adjacent intestinal mucosa. Therefore, interaction between V. vulnificus and intestinal cells is important for understanding of both the immunology of mucosal surfaces and V. vulnificus. In this study we investigated the effects of V. vulnificus infection on cytokine gene expression of human intestinal epithelial cells, Caco-2 and INT-407 cells. (omitted)
Monoclonal antibodies were prepared in order to an assay method for Vibrio vulnificus. Sixteen mouse ybridoma cell lines were established by immunization of whole cell antigen to BALB/c mice, fusion with SP2/O myeloma cells, and cloning. Most of them secreted IgM.lambda. antibodies. A sandwich enzyme-linked immunosorbent assay was developed with rabbit anti-V. vulnificus polyclonal antibodies as capture antibody, an IgM monoclonal antibody as detector antibody, and goat anti-mouse IgM-alkaline phosphatase conjugate as developer antibody. The range of detection was 10$\^$4/ to 10 V. vulnificus cells per microplate well. When four related Vibrio species were tested for cross-reactions, V. parahaemolyticus showed 3.5% reactively and V. carchariae, V. fluvialis, and V. furnisii showed negligibal (<1%) cross-reactivity.
To prevent food-poisoning outbreaks by Vibrio vulnificus the antimicrobial efficacy of grapefruit seed extract (GFSE) was examined. Minimal inhibitory concentration (in vitro) for the microorganism was found to be 50∼100 ppm. Transmission electron micrographs of Vibrio vulnificus showed the biocidal action of this natural antimicrobial agent would be related to specific respiratory effect coupled with the destruction of permeable function of microbial cell membrane. After Anguilla japonica GFSE-injected to the body was incubated in the seawater contaminated by Vibrio vulnifiucs the fish meats were taken up, mixed with control diet and used as a diet in the feeding experiment. In this experiment the effect of GFSE treated with fish muscle on body weight, protein efficiency ratio, serum enzymes and serum blood components of broiler chicks was investigated. It is proved from this study that there is neither Vibriosis nor toxicity associated with GFSE itself an fish meats treated with it when it is injected to the fish body at a level of 250 ppm or less.
The cells of Vibrio vulnificus can be induced to the viable but nonculturable (VBNC) state by natural environmental parameters. The V. vulnificus cells in the VBNC state can not be recovered by ordinary laboratory techniques. This nonculturability could often hamper development of effective processing strategies to minimize the number of V. vulnificus in seafoods. Even with V. vulnificus cells in a culturable state, the length of time required to identify the bacteria in contaminated food by phenotyphic characterization may prevent appropriate in-time responses by public health agencies to infections of the bacteria. In the present study, we used polymerase chain reaction (PCR) to develop a rapid and direct detection method for V. vulnificus in small octopus (Octopus variabilis) which is consumed as a raw food in Korea. The region targeted was a 704-base pair (bp) portion of the hemolysin gene, vvhA, of V. vulnificus. The primers designed for PCR amplification were specific for all V. vulnificus sp. tested. Several methods were examined to extract total DNA directly from V. vulnificus seeded into the octopus homogenate and the guanidine isothiocyanate (CITC) method appeared to be most effective. From the octopus homogenate seeded by V. vulnificus at an initial level of $10^2$ CFU/ml of the homogenate and then incubated for 12 h, the targeted sequence was successfully amplified by PCR and the 704-bp DNA fragment was observed by gel electrophoresis. The total completion of this assay requires less than one day.
This study evaluated the risk of foodborne illness from highly pathogenic Vibrio spp. (Vibrio vulnificus and V. cholerae) by raw whip-arm octopus (Octopus minor) consumption. In total 180 samples of raw whip-arm octopus were collected from markets and examined for the prevalence of V. vulnificus and V. cholerae. Predictive models describing the kinetic behavior of Vibrio spp. in raw whip-arm octopus were developed, and the data on amounts and frequency of raw whip-arm octopus consumption were collected. Using the collected data, a risk assessment simulation was conducted to estimate the probability of foodborne illness raw whip-arm octopus consumption using @RISK. Initial contamination levels of Vibrio spp. in raw whip-arm octopus were -3.9 Log colony-forming unit/g, as estimated by beta distribution fitting. The developed predictive models were appropriate to describe Vibrio spp. in raw whip-arm octopus during distribution and storage with R2 values of 0.946-0.964. The consumption frequency and daily consumption amounts of raw whip-arm octopus per person were 0.47% and 57.65 g, respectively. The probability of foodborne illness from raw whip-arm octopus consumption was estimated to be 8.71 × 10-15 for V. vulnificus and 7.08 × 10-13 for V. cholerae. These results suggest that the risk of Vibrio spp. infection from raw whip-arm octopus consumption is low in South Korea.
The pathogenic Vibrio genus contains halophilic bacteria that are distributed in marine and freshwater environments. Vibrio cholerae, Vibrio vulnificus, and Vibrio parahaemolyticus are potent human pathogens and leading causes of septicemia, wound infection, and seafood-borne gastroenteritis. The aim of this study was to investigate the presence of pathogenic Vibrio species in seawater off the west coast of Korea. Sixty-four seawater samples were obtained from different sites in Gomso Bay and Byeonsan from April 2018 to November 2018. Pathogenic Vibrio species were detected using a combination of most probable number (MPN)-polymerase chain reaction methods. V. cholerae, V. vulnificus, and V. parahaemolyticus were found in 0.0%, 20.3%, and 65.6% of seawater samples, respectively. Quantitative results revealed 3.6-23 MPN/100 mL of V. vulnificus, and 3.6-930 MPN/100 mL of V. parahaemolyticus in the samples. Overall, these results provide new insight into the necessity for seawater sanitation in Gomso Bay and Byunsan; they also provide evidence that will help reduce outbreaks of seafood-borne illness caused by pathogenic Vibrio species.
감염성 Vibrio vulnificus에 의한 패혈증과 같은 질병의 원인을 알아보기 위하여 Vibrio vulnificus로 부터 세포벽 lipopolysaccharide를 추출한 후 지방산 조성을 분석하고 limulus gelation activity와 lethal toxicity를 측정하였다. 이 결과들을 비감염성 Escherichia coli LPS와 감염성 Salmonella typhimurium LPS의 것들과 비교하였다. V. vulnificus LPS의 주 지방산은 myristic acid 이었고 E. coli LPS는 lauric acid, S. typhimurium LPS는 capric acid 이었다. 세가지 LPS의 Limulus gelation activity는 같았으며(0.1ng/ml), V. vulnificus LPS의 lethal toxicity는 E. coli LPS와 S. typhimurium LPS의 것과 비슷하였다. LPS 이외에도 exotoxin과 같은 인자들도 V. vulnificus에 의한 세포 독성의 원인으로 고려해야 할 것이다
본 연구는 생명을 위협하는 Vibrio vulnificus의 생존에 온도, 염분 pH 및 자외선과 같은 환경적 요인이 어떠한 영향을 미치는 가를 알아보기 위하여 수행하였다. 6일 동안 15에서 ${25\circ}C$의 온도범위에서 V.vulnificus의 수는 증가하였지만 이 범위외에서 V.vulnifivus의 생존수는 감소하였다. 1에서 ${10\circ}C$사이에서의 실험 결과, V.vulnificus 가 $10{\circ}C$이하에서는 생존수가 적었다. 한편 6일 동안 5에서 25ppt정도의 염분조건에서는 V.vulnificus수는 감소하였다. 최적의 pH 영역은 6.5에서 8.0이었고 이 영역밖에서는 V.vulnificus의 생존율은 낮았다. 15와 $25{\circ}C$에서 자외선은 V.vulificus에 대해 살균효과를 나타내어서 2시간 동안 자외선 처리후 V.vulnificus수가 약 10,00배 감소되었다. 이상과 같은 결과들은 환경적 요인이 V.vulnificus의 생존에 미치는 영향이 크다는 것을 보여주었다.
Vibrio vulnificus cytolysin caused platelet cytolysis and increased intracellular calcium concentration $([Ca^{2+}]_i)$ of rat platelets in a concentration-dependent manner. In the presence of V. vulnificus cytolysin (3 HU/ml), lactate dehydrogenase (LDH) activity was increased from $1.3{\pm}0.4%$ of control to $64.3{\pm}3.4%$ in platelet suspension buffer. In $Ca^{2+}-free$ platelet suspension buffer, however, V. vulnificus cytolysin did not induce $[Ca^{2+}]_i$ increase and LDH release. Addition of EGTA (2 mM) to suspension buffer after the initial $Ca^{2+}$ influx reversed $[Ca^{2+}]_i$ to the control level. However, a $Ca^{2+}$ channel blocker verapamil $(20\;{\mu}M)$ or mefenamic acid $(20\;{\mu}M)$ did not inhibit V. vulnificus cytolysin-induced $[Ca^{2+}]_i$ increase and LDH release. Divalent cations such as $Co^{2+},\;Cd^{2+}\;or\;Mn^{2+}$ (2 mM each) also did not alter V. vulnificus cytolysin-induced $[Ca^{2+}]_i$ increase and LDH release. V. vulnificus cytolysin (3 HU/ml)-induced calcium influx was completely blocked by lanthanum (2 mM). Lanthanum (2 mM) also completely blocked V. vulnificus cytolysin (3 HU/ml)-induced LDH release. Osmotic protectants such as, raffinose, sucrose or PEG600 (50 mM each) did not inhibit the lytic activity of V. vulnificus cytolysin. In conclusion, lanthanum sensitive $Ca^{2+}$ influx plays a significant role in Vibrio vulnificus cytolysin-induced platelet cytolysis and thrombocytopenia in V. vulnificus infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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