I evaluated the protective effect of N-methyl-D-aspartate (NMDA)/glycine receptor antagonist, 7-chlorokinurenic acid (CKA) on cultured mouse astrocytes damaged by ischemia-like condition (ILC). The protective effect of CKA was assessed by cell viability, lactate dehydrogenase (LDH) activity, superoxide dismutase (SOD)-like activity and lipid peroxidation. To examine the effect of CKA on the cell apoptosis, the expression and the activity of caspase 3 were assessed by Western blotting. CKA increased the cell viability decreased by ILC. CKA also decreased the LDH activity and antioxidative effects such as SOD-like activity and inhibitory activity of lipid peroxidation. In addition, CKA suppressed the expression of caspase 3 associated with apoptosis, and increased the cell viability by the decrease of caspase 3 activity as like the caspase 3 inhibitor, Av-DVED-MED. From these results, these results suggest that ILS induces cell cytotoxicity in cultured astrocytes and CKA, NMDA/glycine receptor antagonist, is effective on the prevention of the cytotoxicity due to ILS by the antioxidative effect and the inhibition of apoptosis.
These experiments were conducted to examine the effects of theophylline, pentoxifylline and heparin on frozen-thawed Hanwoo sperm for enhancing motility and viability of sperm. Frozen-thawed semen collected from one bull was treated in TALP(tyrode-albuminlactate-pyruvate) containing varous concentrations of theophylline and pentoxifylline. After incubated at 5% CO2 in air atmosphere for 6 hours, the motility of sperm after the treatments was characterized by CASA(computer aided semen analysis) system. When monitored notility(MOT) and curvilinear velocity(VCL), theophylline and pentoxifylline exerted their optimal action at the concentration of 30 mM and 3 mM, respectively. No difference of sperm motility was observed when the sperm was treated with both substances compared with a single treatment of each substance. Comparison was then made for evaluating the effect of theophylline and / or pentoxiophylline on the motility and viability of significant treatment effects of each substance, high MOT and VCL values were detected in sperm treated with theophylline. In the case of sperm viability examined by an eosin-nigrosin staining, however, a significant decrease was found after the combined treatment of theophylline+pentoxyphilline than after the treatment with heparin alone or no treatment(P<0.05). In conclusion, theophylline, pentoxiphylline or heparin can be used for enhancing the motional characteristics and viability of frozen thawed Hanwoo semen. Considering characteristics of these substances, theophyline may be useful in the artificial insemination system, which requires vigorous sperm motility. While, heparin supporting sperm viability in vitro can be effectively used for improving in vitro-fertilization system.
Glutathione and ascorbic acid have been shown to fulfill many essential functions in animal and plant growth, development, defence and protection against oxidative damage. Effects of glutathione and ascorbic acid were examined in transgenic N. tabacum cells producing hGM-CSF to determine the effects of the vitamins on growth and cell viability. In lag phase, cell viability was preserved by glutathione and ascorbic acid. Therefore, recombinant protein productivity was increased. The purpose of present study is to investigate the role of antioxidants in cold stress-induced apoptosis in plant suspension cells. Cold stress lowered cell viability and increased total genomic DNA fragmentation. Supplementing the cell cultures with glutathione and ascorbic acid inhibited cold stress-induced decrease in cell viability and increase in total genomic DNA fragmentation.
To clerify the protective effect of omega-3 of polyunsaturated fatty acid docosahexaenoic acid (DHA) on the cytotoxicity induced by organic mercury in cultured NIH3T3 fibroblasts. The measurement of cell viability on ogranic mercury wad done by XTT assay after NIH3T3 fibroblasts were cultured with various concentrations of methyl mercuric chloride (MMC). And also, the effect of DHA on the MMC-mediated cytotoxicity was examined by cell viability, and antioxidant effect of DHA was also assessed by superoxide dismutase (SOD)-like activity and the lipid peroxidation activity in cultured NIH3T3 fibroblasts. In this study, MMC decreased cell viability and $XTT_{50}$ value was determined at $50{\mu}M$ of MMC in these culture. In the effect of DHA against the cytotoxicity induced by MMC, DHA significantly increased the cell viability damaged by MMC in cultured NIH3T3 fibroblasts. And also, DHA showed the antioxidant effect by showing the increase of SOD-like activity and the decrease of lipid peroxidation activity. From these results, it is suggested that organic mercury such as MMC has highly toxic effect on cultured NIH3T3 fibroblasts, and also, omega-3 of polyunsaturated fatty acid, DHA showed the protection on MMC-induced cytotoxicity and antioxidant effect.
It is demonstrated that cadmium has cytotoxic effect on glial cells, oxygen radicals are involved in cadmium-induced cytotoxicity. However, the toxic mechanism of cadmium is left unknown so far. The purpose of this study was to examine the cytotoxicity of $CdCl_2$ on $C_6$ glioma cells. The cytotoxicy was measured by cell viability via XTT assay in $C_6$ glioma cells. Colorimetric assay such as XTT assay is regarded as a very sensitive screening method for the determination of the cell viability on a lots of chemicals. In this study, $CdCl_2$ decreased cell viability according to the dose- and time dependent manners after $C_6$ glioma cells were treated with various concentrations of $CdCl_2$ for 48 hours. $IC_{90}\;and\;IC_{50}$ values for XTT assay was determined at $5{\mu}M\;and\;55{\mu}M$ of $CdCl_2$, respectively. These results suggest that $CdCl_2$ has highly cytotoxic effect on $C_6$glioma cells by the decrease of cell viability.
Won Kyung Sook;Lee Tae Won;Eun Jae Soon;Song Jung Mo
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.17
no.3
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pp.656-661
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2003
The specific immune response of unripened fruits and ripened fruits of Rubus coreanus Miquel was examined in BALB/C mice. The 70% ethyl alcohol extracts (20 or 100 mg/kg) of unripened fruits (RCE-I) and of ripened fruits (RCE-II) were administered p.o. once a day for 7 days. RCE-I and RCE-II decreased the viability of thymocytes, but increased the viability of splenocytes. Also, RCE-I enhanced the population of helper T and cytotoxic T cells in thymocytes and RCE-II enhanced the population of helper T cells. Furthermore, RCE-I and RCE-II decreased the population of B220/sup +/ cells and Thy1/sup +/ cells and helper T cells in splenocytes. In a general way, the immunosuppressive action of RCE-I was more potent than those of RCE-II. These results suggest that RCE-I and RCE-II have a regulative action of immune response via decrease the viability of thymocytes and increase the viability of splenocytes.
Lee Joo-Hyun;Han Du-Suk;Jekal Seung-Joo;Lee Jae-Hyung;Kim Chong-Ho;Yoo Min;Park Seung-Taeck
Biomedical Science Letters
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v.11
no.3
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pp.337-341
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2005
This study was undertaken to clerify the cytotoxic effect of syringic acid by colorimetric assay on human cancer cells. For the evaluation of cytotoxicity of syringic acid, the cell viability and cell adhesion activity of syringic acid on cancer cells, human oral epithelioid carcinoma cells were determined using by colorimetric assays such as MTT (3-[4,5dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay and XTT (2,3-bis-[2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl]2H-tetrazolium-5-caboxanilide) assay, respectively after human oral epithelioid carcinoma cells were treated with syringic acid for 48 hours. In this study, the cell viability of syringic acid on human oral epithelioid carcinoma cells showed a significant decrease by MTT assay compared with control, and also, the cell adhesion activity by XTT assay was decreased significantly in these cells after cells were treated with various concentrations of syringic acid for 48 hours. $MTT_{50}\;and\;XTT_{50}\;were\;282.3\;{\mu}M\;and\;418.8{\mu}M$ syringic acid, respectively. These results suggest that syringic acid shows midcytotoxic effect on human oral epithelioid carcinoma cells by the decreasement of the cell viability and the cell adehision activity assessed by colorimetric assay in these cultures.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.19
no.4
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pp.1022-1026
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2005
To clarify the toxic effect on cultured neonatal mouse cerebral neurons damaged by ischemia, we examined the cytotoxicity induced by ischemia and the protective effect of antioxidant and AMPA/kainate receptor antagonist against ischemia-induced cytotoxicity on cultured cerebral neurons. For this study, mice were administrated with 20ug/kg cyclothiazide or 50U/kg vitamin E via intraperitoneal injection for 2 hours before ischemic induction. After cell culture for 7 days, cell viability, amount of neurofilament and protein kinase C activity were examined. Ischemia decreased significantly cell viability, amount of neurofilament and the increase of protein kinase C activity in these cultures. In the protective effect, vitamin I showed remarkably the increase of cell viability and amount of neurofilament, and the decrease of protein kinase C activity but, cyclothiazide did not showed any protective effect on ischemia-induced cytotoxicity. From these results, it is suggested that vitamin I is effective in blocking the neurotoxicity induced by ischemia, but cyclothiazide as a AMPA/kainate receptor antagonist is not.
Exo-polysaccharide isolated from the culture of Grifola frondosa was modified by sodium periodate ($NaIO_4$) and sodium chlorite ($NaClO_2$) to delete polysaccharide part and phenolic compound, respectively, and was investigated what effect has each part of exo-polysaccharide against 2,2'-azobis(2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH)-induced oxidative stress in porcine kidney epithelial cells (LLC-PK1). Oxidative stress on LLC-PK1 cell was measured by cell viability, lipid peroxidation, superoxide dismutase (SOD), and glutathione peroxidase (GSH-px) activity. Exposure of LLC-PK1 cells to 1 mM AAPH for 24 hr resulted in significant decrease in cell viability, SOD, and GSH-px action, and significant increase in lipid peroxidation. The treatment of exo-polysaccharide and $NaIO_4$ modified sample protected LLC-PK1 cells from AAPH-induced cell damage such as cell viability, lipid peroxidation, SOD, and GSH-px activity in a dose dependant manner (10, 100, and $500{\mu}g/mL$). However, the treatment of $NaClO_2$ modified sample did not affect for cell viability, lipid peroxidation, SOD, and GSH-px activity. The antioxidant activity of exo-polysaccharide was significantly decreased on AAPH-induced LLC-PK1 cell system when phenolic compound was deleted. The antioxidant activity was significantly correlated with the content of phenolic compound of exo-polysaccharide.
The effects of antimetabolite 6-AN (6-amino-nicotinamide) on viability and morphology of L6 myoblast cells have been investigated. 6-AN ($100{\mu}M$) induced a time-dependent decrease in cell viability with respect to the untreated control cells. Following 6-AN administration the viability rate started to decline sharply, reaching about 23% of the untreated control cells at 48 h. Inverted phase-contrast microscopy revealed that 6-AN caused characteristic morphological changes such as irregularly elongated and stellate shape of cells, round-shaped nucleus, cytoplasmic vacuolization, irregular cell arrangements and formation of large spaces among cell clusters. The concentrations of ATP and $NAD^{+}$ in the 6-AN treated cells were significantly lower (p < 0.01) than those of the untreated control cells. In contrast, the concentration of AMP was significantly increased by the 6-AN treatment. Activities of catalase, superoxide dismutase and glutathione peroxidase in 6-AN treated cells were significantly higher (p < 0.01) than those of the untreated control cells. The activities of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase in 6-AN treated cells were significantly lower (p < 0.01) than those of the untreated control cells. The results suggest that 6-AN caused marked reduction of cell viability and alterations of some important metabolites and enzymes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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