Salmonella enterica serovar typhi, a Gram-negative food-borne pathogen, causes typhoid fever in humans. OmpC is an outer membrane porin of S. typhi expressed throughout the infection period. OmpC is potentially an attractive antigen for multivalent vaccines and diagnostic kit designs. In this study we combined in silico, in vitro and in vivo approaches to analyze various aspects of OmpC's antigenic properties. The conserved region, in addition to secondary and tertiary structures, and linear B cell epitopes, were predicted. A number of results obtained from in silico analyses were validated by experimental studies. OmpC was amplified, cloned and then expressed, with the recombinant protein then being purified. BALB/c mice were immunized by purified denatured OmpC. The titer of antibody was raised. Results of challenges with the pathogen revealed that the immunity is non-protective. Most of the theoretical and experimental results were in consensus. Introduced linear B cell epitopes can be employed for the design of diagnostic kits based on antigen-antibody interactions.
These experiments were undertaken as a basic study to develop immunocontraceptive vaccine and to understand the role of zona pellucidae in early fertilization process by identifying the monoclonal and polyclonal antibody to porcine zona pellucidae and polyclonal antibody to mouse zona pellucidae by indirect ELISA and indirect immunofluorescence test. The results obtained in these experiments were summarized as follows : 1. The titer of the antibodies to zona was determined by indirect ELISA using solubilized porcine zona coated plates. Both monoclonal and rabbit polyclonal antibodies showed very high titers ; O.D at 1 : 12,800 dilution of antibodies was still significantly higher than that of non-immunized control serum. Rabbit anti-mouse zona pellucidae sera also reacted with porcine zona pellucidae. 2. By indirect immunofluorescence test strong fluorescences were observed on the egg treated with homologous and heterologous rabbit polyclonal antibodies and FITC lablled 2nd antibodies and found to crossreact strongly with the eggs from the pig and mouse. While weaken fluorescences were observed on the eggs treated with monoclonal antibodies.
To construct a novel vaccine candidate against bovine enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC), FanC, the major subunit of K99 fimbriae adhesion, was inserted into secretion plasmid pYA3560 containing a ${\beta}-lactamase$ secretion system. This was then transformed into ${\Delta}asd$${\Delta}crp$ Salmonella (S.) Typhimurium and designated as JOL950. Secretion of recombinant fanC fimbrial antigens was confirmed by immunoblot analysis. Groups of mice were inoculated with single or double doses of JOL950. Another group was used as a negative control. Compared to control mice, all immunized mice had significantly higher levels (p < 0.05) of serum immunoglobulin (Ig)G, and secretory IgA against FanC. The IgG2a and IgG1 titer assays revealed that immunization highly induced IgG2a compared to that of IgG1, indicating that T helper-1- related cell-mediated immune responses may be elicited by JOL950. The results show that both systemic and mucosal immunities against selected fimbrial antigens of bovine ETEC expressed by a live attenuated S. Typhimurium strain are prominently produced in mice immunized with JOL950 via an oral route.
A study was conducted to investigate the fattening performance, physico-chemical properties of breast meat, vaccine titers in cross bred meat type hybrid chicks fed organic sulfur. Total three hundred and sixty chicks of eight weeks old were replaced in individual cage from 8 to 10 weeks old. Four levels of organic sulfur (0, 1.0, 2.0, 4.0%) containing 45% sulfur were added into basal diet containing CP 19% and ME 2,950 kcal/kg. Weight gain, feed intake, fred conversion were weekly measured. The proximate composition, physico-chemical properties of breast meat, vaccine titer and sensory characteristics were examined at the end of experiment. Weight gain, feed intake and feed conversion of birds fed organic sulfur were not statistically different with control. There were no significant difference in feed intake and feed conversion. However, abdominal fat(%) of birds fed organic sulfur tended to increase compared with control. Crude fat of breast meat decreased significantly in organic sulfur treatments(P<0.05). The red color of breast meat seemed to increase but was not statistically different among the treatments. Cooking loss showed decrements significantly in organic sulfur treatments(P<0.05). Mechanical Hardness, cohesiveness and springiness were prone to be high and gumminess greatly high in breast meat of birds fed organic sulfur addition compared with control. Juiciness tended to increase and greasiness decreased(P<0.05) in organic sulfur treatments by the sensory evaluation. The overall acceptability of the breast meat was the highest at 2.0% organic sulfur added chicks(P<0.01). There were no different blood cholesterol, AST, ALT and BUN.
Kim, Doo;Ahn, So-jeo;Jeoung, Seok-young;Hwang, Jae-woong;Pak, Son-il
Journal of Veterinary Clinics
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v.21
no.2
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pp.87-92
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2004
This study was undertaken to compare the serological response of dogs to four commercially available combination vaccines and three different vaccination schedules to canine distemper virus (CDV). A total of 120 healthy puppies (20 puppies per group) at 6 weeks of age were randomly assigned to one of four vaccines [C, G, K, and V (or V3) groups] and one of vaccination schedules [V2 and V4 groups]. At six, nine, and 12 weeks of age, puppies in each group were vaccinated with one of four combination vaccines subcutaneously. And puppies in V2 and V4 groups were vaccinated with V vaccine every 2 weeks and 4 weeks, respectively. The serological responses to CDV component of the vaccines were determined by measuring SN titers. The immunogenicity of V vaccine was superior to the other vaccines and optimum vaccination schedule was 3 times vaccination with 3 weeks-interval starting vaccination at 6 weeks of age. Although puppies were vaccinated at 6 weeks of age, the geometric mean CDV titers of puppies in all groups by 9 weeks of age were under the protective level. Therefore, prophylactic measures should include isolation of young dogs from the dog population until vaccination can be expected to provide protection.
A formalized bacterin(FKC) of Edwardsiella tarda, conjugated with/without Freund's complete adjuvant(FCA), Freund's incomplete adjuvant(FIA) and potassium aluminium sulfate(PAS), was administered by intraperitoneal injection to tilapia respectively. The tilapia were reared under indoor recirculating filter system. There were agglutinin titer increment in the tilapia which were administered not only FKC bacterin but also adjuvanted vaccines. But the producing time of the highest level of antibody in the immunized tilapia was different among vaccine preparation, i. e. FKC+FCA group and PAS+FKC group are between the 2nd and the 4th week, and FKC alone group is the 2nd week. In the challenge experiment with $2.5{\times}10^7\;CFU/ml$ or $2.5{\times}10^8\;CFU/ml$ of E. tarda T1123 to the tilapia immunized with vaccines, RPS above sixty was recorded both challenge dose in the tilapia which were 3 weeks after immunization with FKC+FCA, PAS+FKC and FKC alone, and the former dose 8 weeks after immunization with FCA+FKC and PAS+FKC. There were some resistance enhancement against E. tarda in the tilapia which were injected with adjuvant alone than that of control. As the results, the FCA or PAS adjuvanted vaccine is effective to sustain the defensible period against edwardsiellosis.
Classical swine fever virus (CSFV) is the etiologic agent of classical swine fever, a highly contagious disease that causes significant economic losses to the swine industry. The lapinized C-strain, a widely used vaccine strain against CSFV, has low growth efficiency in cell culture, which limits the productivity in the vaccine industry. In this study, a recombinant virus derived from C-strain was constructed and subjected to continuous passaging in PK-15 cells with the goal of acquiring a high progeny virus yield. A cell-adapted virus variant, RecCpp80, had nearly 1,000-fold higher titer than its parent C-strain but lost the ability to induce fever in rabbits. Sequence analysis of cell-adapted RecC variants indicated that at least six nucleotide changes were fixed in RecCpp80. Further adaption of RecCpp80 variant in swine testicle cells led to a higher virus yield without additional mutations. Introduction of each of these residues into the wild-type RecC backbone showed that one mutation, M979R (T3310G), located in the C-terminal region of E2 might be closely related to the cell-adapted phenotype. Rabbit inoculation revealed that $RecCpp40_{+10}$ failed to induce fever in rabbits, whereas $RecCpp80_{+10}$ caused a fever response similar to the commercial C-strain vaccine. In conclusion, the C-strain can be adapted to cell culture by introducing specific mutations in its E2 protein. The mutations in RecCpp80 that led to the loss of fever response in rabbits require further investigation. Continuous passaging of the C-strain-based recombinant viruses in PK-15 cells could enhance its in vitro adaption. The non-synonymous mutations at 3310 and 3531 might play major roles in the enhanced capacity of general virus reproduction. Such findings may help design a modified C-strain for improved productivity of commercial vaccines at reduced production cost.
Purpose : Studies on the duration of immune response against Japanese encephalitis virus from recipients with JE vaccine (Nakayama-NIH strain) in Korea. Methods : To determinate the immune response and the duration of antibody against JE vaccine, 213 students were examined since 1994 using hemmaglutination inhibition test and plaque reduction neutralization test (PRNT). Results : 24 months after the first vaccination, haemmaglutination inhibition and neutralizing antibody maintained from the recipients 63.4% (>1:20) and 100% (>1:20), respectively. In April 1996, one dose booster to the same recipients those who were vaccinated in 1994, the GMT antibody for HI and PRNT titer were both increased from 1:11.6 to 1:13.2 and 1:275.7 to 1:348.1, respectively, after 6 months booster (after 30 months from the initial vaccination). This results showed that the antibody from the active immunity could be maintained more than 12 months after the initial vaccination. On the basis of these results, inactivated killed JE vaccine (Nakayama-NIH strain) using for preventing against JE purpose seems to produce antibody enough to protect against JE at present. Conclusions : Along with the results of this study demonstrating duration of antibody, the active immunization could be maintained as long as by initial vaccination of 2 doses, a single dose of booster vaccination made during a period of 1 month to 12 months and the successive booster vaccination by 2 or 3 year intervals. However, the immunization schedule should be concerned with both epidemiology of disease and the immune response of vaccinated individuals.
Purpose : It has been previously reported that for patients with Mycoplasma pneumoniae pneumonia was previously recognized that overt illness is unusual under the age of three and the peak incidence of illness occurs in school-aged children. However, a higher incidence of this illness in younger children has been recently noted. Thus we investigated the incidence of M. pneumoniae pneumonia. Methods : The study subjects were 414 children who were diagnosed with M. pneumoniae pneumonia from January 2004 to December 2006 at Myong Ji Hospital were enrolled. The diagnostic criteria consisted of an anti-mycoplasma antibody (AMA) titer greater than 1: 320 or a four-fold rise in the titer at follow up. Results : The age distribution was as follows: before 2 years of age: 58 patients (14%), 2-4 years of age 157 patients (37.9%) and 5-15 years of age 199 patients (48.1%). The yearly incidence for the children before 5 years of age was 52 (44%), 49 (44.6%) and 114 (61.3%), respectively. The distribution according to the antibody titer was as follows; 1: 320 in 130 patients, 1:640 in 63 patients and greater than 1:1,280 in 221 patients. The hospital stay according to the antibody titer was not significant according to either age or the AMA titers. Conclusion : M. pneumoniae pneumonia showed a peak incidence in preschool children with a higher prevalence in children under the age of three than was previously recognized. The emergence of M. pneumoniae pneumonia as a cause of community acquired pneumonia in younger children calls for an epidemiologic study to investigate the changes of the pathogens in this age group and to recommend the proper treatment.
Purpose : Salmonellosis including typhoid fever is still prevalent in Korea. Recently it has been reported that the incidence of salmonella gastroenteritis is increasing with a reduction of typhoid fever. We studied the clinical and laboratory features of salmonellosis. Methods : We evaluated the clinical records of 83 patients with salmonellosis who had been confirmed by stool culture from 1994 to 1999. Results : Annual incidence of salmonellosis showed an increasing tendency during recent 4 years. Seasonally, summer(45.8%) was the most prevalent, followed by fall(32.5%). Male to female ratio was 1.4 : 1. In age distribution, 64 cases(77.1%) were under 5 year-old, and 18 cases(21.7%) were younger than 1 year-old. Clinical features included diarrhea(96.4%), fever(91.6%), vomiting(49.4%), bloody stool(42.1%), abdominal pain(40.1%) and tenesmus(12.0%). In serogroups, there was no group A and group B, group C, group D(including 2 cases of S.typhi) and group E were in 41.0%(34 cases), 3.6%(3 csaes), 51.8%(43cases) and 3.6%(3 cases), respectively. In Widal test, 5 cases(13.5%) and 1 case(2.7%) of group B, C and E(total 37 cases) were observed the O titer above 1 : 80 and 1 : 320, respectively. However, in 36 cases of group D, 19 cases(52.7%) and 9 cases(25.0%) were above the O titer 1 : 80 and 1 : 320, respectively. Antibiotics resistant rates to ampicillin, trimethoprim/sulfamethoxazole and chloramphenicol were 23.2%, 10.1% and 51.4%, respectively. Conclusion : Salmonellosis has become a common cause of gastroenteritis in children, especially under the pre-school age. Isolation of salmonella is neccessary for accurate diagnosis of gastroenteritis and typhoid fever. A careful attention of the use of antibiotics is needed to reduce the muilti-drug resistant strains.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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