• 한국임상수의학회지
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• 제16권2호
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• pp.281-288
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• 1999

Helicobacter species have been identified in or isolated from domestic carnivores, but their prevalence in different population of animals and their clinical significance are still unknown. This study was peformed to evaluate the prevalence of Helicobacter in clinically healthy dogs by urease test, culture, morphological examination and polymerase chain reaction (PCR) technique. Tissue samples from 70 dogs in Kangwon and Kyunggi areas from August 1998 to April, 1999, were examined. The detection rates of Helicobacter by urease activity of tissue-samples were 84.6%, 61.3% and 4.8 % in the fundus, the antrum and the duodenum, respectively. One strain of Helicobacter was isolated from the duodenum. It was identified as H canis by biochemical and morphorogical examination. The detection rates of Helicobacter by histological examination were 92.3%, 79.0% and 4.8% in the fundus, antrum and the duodenum, respectively. Helicobacter organisms were colonized more in the gastric pits than in the surface of epithelium, the gastric gland or the parietal cell. Although most of dogs were colonized with Helicobacter in tissue, gross lesions and specific histopathological lesions caused by Helicobacter in these tissues were not observed. The detection rate of Helicobacter by PCR was 78.6%. The histological examination was more sensitive than urease test, culture or PCR technique for the detection of Helicobacter.

• Applied Biological Chemistry
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• 제46권2호
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• pp.74-78
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• 2003

Urease 활성이 중금속 이온에 의하여 저해되는 현상을 알아보기 위하여 발색시약을 사용하는 광학적인 방법으로 효소반응에 의한 암모니아 발생량을 측정하였다. 암모니아 농도에 따른 cuvette assay 시의 흡광도 중가는 암모니아 농도 3.0 mg/l 까지 직선성을 보였으며 이 때의 상관계수는 0.998(r)이었다. 중금속 이온에 의한 urease의 저해활성을 알아보기 위하여 기질에 단일 중금속 이온의 농도별 용액을 가하여 흡광도를 측정한 결과 효소의 저해도는 Hg(II)>Pb(II)>Cu(II)>Cd(II)>Zn(II) 이온의 순으로 나타났다. 한 가지의 중금속 이온 농도를 고정하고 다른 중금속 이온을 각기 다른 농도로 가하면서 urease활성을 측정하였을 때 효소의 저해도는 대체로 개별 중금속 이온에 의한 저해의 총합으로 나타났다. 상기의 결과는 본 연구의 방법이 Hg(II) 이온에 대한 선택적 검출법으로서 뿐만 아니라 여러 형태의 시료 중에 존재가능한 중금속 이온들을 정성적으로 판별하는 방법으로 활용될 수 있음을 보여주었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제21권3호
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• pp.288-292
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• 1993

An agar medium(HY) was developed to detect the urease-producing lactic acid bacteria. HY medium was prepared with the addition of tryptone, glucose and tween 80 to the supernatant of autoclaved skim milk and yeast extract mixture. There was no difference in eumeration of lactic acid bacteria between the HY and commercial media, such as M17, MRS and BCP agar. The urease activity of Streptococcus salivarius subsp. thermophilus was detected on the HY agar medium contained urea by the color change of bromocresol purple as the pH indicator, but not on the commerical agar media. Furthermore, it was succeeded to screen the urease activity of bacteria in skim milk used as a raw material in dairy product manufacture. Therefore, HY medium was proved to be suitable for the screening of urease-producing lactic acid bacteria.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제32권12호
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• pp.4377-4381
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• 2011

In this study, real-time and label-free methods for monitoring the enzymatic reaction of urease, which releases ammonia through the hydrolysis of urea in an aqueous solution, were developed using a liquid crystal (LC)-based pH sensor. Nematic liquid crystal 4-cyano-4'-pentylbiphenyl (5CB), doped with 4'-pentyl-biphenyl-4-carboxylic acid (PBA), exhibited a shift in optical appearance from bright to dark when it was in contact with ammonia generated from the enzymatic reaction between urease and urea. This optical change was attributed to the anchoring transitions of LCs caused by hydrophobic interactions between the tails of deprotonted PBA ($PBA^-$) molecules and the LCs at the aqueous/LC interface. This novel technique holds great promise for the sensitive detection of urease along with its substrates and inhibitors.

• 한국임상수의학회지
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• 제18권4호
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• pp.329-333
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• 2001

새로 개발되거나 혹은 기존의 어떤 진단검사를 다양한 임상상황에 적용하기 위해서는 먼저 이들 검사법의 진단적 정확도를 추정하는 연구가 반드시 선행되어야 한다. 진단의 정확도에 대한 추정치를 모른다면 검사결과를 해석하는 것이 불가능하기 때문이다. 특히 동일한 개체에서 감염부위별로 3개 이상의 시료를 얻어 진단검사를 적용하는 경우 각 시료의 검사결과는 독립적인 측정시료가 아니라 개체내에서 연관성이 매우 높은 종속적인 시료에 해당 한다. 즉 동일한 개체에서 얻은 시료일수록 검사결과에서 유사한 반응을 보이며 이 경우 분석의 단위는 각각의 개체가 아니라 검사부위가 되는데 이는 의학연구에서 매우 흔하다. 본 연구에서는 Helicobacter 균에 의한 감염을 검출하기 위하여 동일한 개로부터 위의 해부학적 구조상 pyloric antrum, body 및 cardia의 생검시료에 대하여 urease 검사와 PCR 검사를 적용하여 각 검사의 진단적 정확도를 추정하였다. urease 검사의 민감도와 특이도는 0.74 (95% 신뢰구간: 0.64-0.84)와 0.87 (95% 신뢰구간: 0.67-1.00)이었으며 PCR 검사의 민감도와 특이도는 0.95 (95% 신뢰구간: 0.89-1.00)와 0.90 (95% 신뢰구간: 0.70-1.00)로 두 검사의 특이도는 높은 것으로 나타났다. 그러나 PCR 검사에 비하여 urease 검사의 경우 가음성 (false negative)의 가능성이 높기 때문에 진단결과에 대한 신중한 해석이 요구된다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2000년도 추계학술발표대회 및 bio-venture fair
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• pp.264-265
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• 2000

Helicobacter pylori(H. pylori) is the causative agent of chronic gastritis and the single most important factor in peptic ulcer disease, however, the pathogenetic mechanisms underlying H, pylori infection are not well understood. Futhermore, there is a strong association between H. pylori infection and gastric cancer. Various diagnostic methods for detecting H. pylori infection are available. These can be divided into invasive methods, requiring endoscopy, and non-invasive tests, mainly 13C-urea breath tests and serologic detection of antibodies. Rapid urease test is the most recommendable endoscopic test for the diagnosis of H. pylori infection, presently. CLO test kit is the represent of rapid urease test kits. The principles of CLO test kit is that hydrolysis of urea by urease Is detected by a dye indicators showing a color change. Our device is used same principle but we improved the reaction time is more faster and positive color change is more distinctive from the color of the negative specimen. So, this kit is more reliable because it response faster and accuracy.

• 한국임상수의학회지
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• 제20권1호
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• pp.7-11
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• 2003

감염된 환축을 찾는 진단과정에 완벽하지 못한 진단검사를 사용하는 경우 진단검사 결과는 흔히 왜곡되어 나타난다. 본 연구에서 저자는 Helicobacter pylori 감염을 진단하는데 사용되는 urease 검사, PCR 검사 및 조직학적인 검사법을 단독으로 사용하는 경우와 병행하여 사용하는 상황으로 구분하여 각각 진단적 특성을 평가하였다. 비선형 회귀모형 분석결과 민감도, 특이도, 양성우도비 및 음성우도비는 urease 검사법의 경우 99.9%, 99.9%, 99.9%, 99.6%, PCR 검사의 경우 88.6%, 99.9%, 99.9%, 70.5%, 조직검사법의 경우 78.3%, 97%, 78.3%, 97%fh 나타났다. 예측도는 유병율의 변화에 따라 다양한 값을 보였으며 Helicobacter pylori 감염의 유병율이 35% 이상일 때 조직 검사상 양성결과는 90% 이상의 일치도를 보였고, 유병율이 25% 미만일 때 조직 검사상 음성결과는 90% 이상의 일치도를 보였다. 본 연구결과 임상에서 감염된 개체를 스크리닝하는 목적으로 세가지 진단검사를 병행하는 것은 실질적인 이익이 없으며 단독검사로서 urease 검사와 PCR 검사가 가장 적합한 것으로 나타났다.

• 대한화학회지
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• 제36권3호
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• pp.393-404
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• 1992

새로운 효소반응기를 쓰는 요소 정량용 연속${\cdot}$자동화 장치의 감응성질을 조사하였다. 효소반응기는 지지체인 nylon-6입자(42∼48 mesh)를 teflon관(안지름 2mm, 길이 20cm)에 충전시키고, 이 지지체의 표면에 공유결합제인 glutaraldehyde로 urease를 고정화시켜서 제작하였다. 연속${\cdot}$자동화장치는 효소반응기, 기체투석기 및 지시전극인 관형 PVC-nonactin막 암모늄 이온 선택성 전극을 차례로 연결하여 만들었다. 이 장치를 써서 요소를 정량할 때 감응특성은 다음과 같다. 곧 직선감응 농도범위는 $5.5{\times}10^{-6}$~$2.4{\times}10^{-3}M$, 감응기울기는 57.8 mV/decade, 검출한계는 $1.5{\times}10^{-6}M$, 효소반응기의 전환백분율은 80.8%이었다. 효소반응기의 최적 완충용액은 0.01M Tris-HCl 완충용액(pH 7.0∼7.8)과 0.01M 인산염 완충용액(pH 6.9∼7.5)이었고, 수명은 150일 정도였다. 또한 다른 생리활성물질의 방해는 없었다.

• 대한수의학회지
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• 제40권4호
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• pp.747-753
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• 2000

Helicobacter species have commonly been isolated from the gastric mucosa of humans and animals, however have not been known its association with clinical signs. This study was aimed to detect and identify Helicobacter species in the canine stomach by urease test and polymerase chain reaction(PCR). A total of 87 dogs in Kangwon and Kyunggi areas from August, 1998 to June, 1999 were examined. The detection rate of Helicobacter species by urease test for fundal biopsy samples was 83.9%, and positive rate was increased as incubation time was increased. Helicobacter species was detected in the seventy seven dogs(88.5%) of total 87 dogs by PCR. The fifty five strains of the 77 strains of Helicobacter species were identified as H heilmannii and the three strains were identified as H felis by PCR, but the nineteen strains were not identified.

• BMB Reports
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• 제31권1호
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• pp.101-105
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• 1998

Immunoassay of botulinum toxin (BTX) B type was investigated using two typed of biosensors: light addressable potentiometric sensor (LAPS) and surface plasmon resonance (SPR) sensor. Urease-tagged and immuno-filtration capture method have been used for LAPS. Tag-free and direct binding real-time detection method have been used for SPR sensor. The detection limit of sandwich assay format with LAPS was 10 ng/ml, which was the lowest among methods tested. SPR has the advantage of being more convenient because tag-free direct binding assay can be used and reaction time was reduced, regardless of low sensitivity. This result shows that sandwich assay format with LAPS can be used as an alternative method of BTX mouse bioassay which is known as the most sensitive method for the detection of BTX.