Choi, Jong Seob;Piao, Yunxian;Kim, Kyung Hoon;Seo, Tae Seok
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2013.08a
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pp.274.2-274.2
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2013
We described a simple and efficient fabrication method for generating microfluidic channels with a circular-cross sectional geometry by exploiting the reflow phenomenon of a thick positive photoresist. Initial rectangular shaped positive photoresist micropatterns on a silicon wafer, which were fabricated by a conventional photolithography process, were converted into a half-circular shape by tuning the temperature to around $105^{\circ}C$. Through optimization of the reflow conditions, we could obtain a perfect circular micropattern of the positive photoresist, and control the diameter in a range from 100 to 400 ${\mu}m$. The resultant convex half-circular photoresist was used as a template for fabricating a concave polydimethylsiloxane (PDMS) through a replica molding process, and a circular PDMS microchannel was produced by bonding two half-circular PDMS layers. A variety of channel dimensions and patterns can be easily prepared, including straight, S-curve, X-, Y-, and T-shapes to mimic an in vivo vascular network. To inform an endothelial cell layer, we cultured primary human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) inside circular PDMS microchannels, and demonstrated successful cell adhesion, proliferation, and alignment along the channel.
Here, we investigated the role of zerumbone, a natural cyclic sesquiterpene of Zingiber zerumbet Smith, on angiogenesis using human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Zerumbone inhibited HUVECs proliferation, migration and tubule formation, as well as angiogenic activity by rat aorta explants. In particular, zerumbone inhibited phosphorylation of vascular endothelial growth factor receptor-2 and fibroblast growth factor receptor-1, which are key regulators of endothelial cell function and angiogenesis. In vivo matrigel plug assay in mice demonstrated significant decrease in vascularization and hemoglobin content in the plugs from zerumbone-treated mice, compared with control mice. Overall, these results suggest that zerumbone inhibits various attributes of angiogenesis, which might contribute to its reported antitumor effects.
Kim, Chung Kwon;Hwang, Ji-Yoon;Hong, Tae Hee;Lee, Du Man;Lee, Kyunghoon;Nam, Hyun;Joo, Kyeung Min
BMB Reports
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v.55
no.7
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pp.336-341
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2022
Narrowing of arteries supplying blood to the limbs provokes critical hindlimb ischemia (CLI). Although CLI results in irreversible sequelae, such as amputation, few therapeutic options induce the formation of new functional blood vessels. Based on the proangiogenic potentials of stem cells, in this study, it was examined whether a combination of dental pulp stem cells (DPSCs) and human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) could result in enhanced therapeutic effects of stem cells for CLI compared with those of DPSCs or HUVECs alone. The DPSCs+ HUVECs combination therapy resulted in significantly higher blood flow and lower ischemia damage than DPSCs or HUVECs alone. The improved therapeutic effects in the DPSCs+ HUVECs group were accompanied by a significantly higher number of microvessels in the ischemic tissue than in the other groups. In vitro proliferation and tube formation assay showed that VEGF in the conditioned media of DPSCs induced proliferation and vessel-like tube formation of HUVECs. Altogether, our results demonstrated that the combination of DPSCs and HUVECs had significantly better therapeutic effects on CLI via VEGF-mediated crosstalk. This combinational strategy could be used to develop novel clinical protocols for CLI proangiogenic regenerative treatments.
Fibroblast growth factor-2 (FGF-2) is known to modulate numerous cellular functions in various cell types, including cell proliferation, differentiation, survival, adhesion, migration, and motility, and also in processes such as wound healing, angiogenesis, and vasculogenesis. FGF-2 regulates the expression of several molecules thought to mediate critical steps during angiogenesis. This study examines the mechanisms underlying FGF-2-induced cell migration, using human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). FGF-2 induced the nondirectional and directional migration of endothelial cells, which are inhibited by MMPs and plasmin inhibitors, and induced the secretion of matrix metalloproteinase-3 (MMP3) and MMP-9, but not MMP-l and MMP-2. FGF-2 also induced the secretion of the tissue inhibitor of metalloproteinase-l (TIMP-I), but not of TIMP- 2. Also, the pan-PKC inhibitor inhibited FGF-2-induced MMP-9 secretion. It is, therefore, suggested that FGF-2 induces the migration of cultured endothelial cells by means of increased MMPs and plasmin secretion. Furthermore, FGF-2 may increase MMP-9 secretion by activating the PKC pathway.
To improve antithrombogenicity of polymer that used in vascular graft and artificial organs, seeding of human endothelial cells on the polyurethane was studied. Human endothelial cells were ismlated from human umbilical veins, using type I collagenase, and identified with goat anti vWF antibodies. Human endothilial cell seeding was tried upon the polyurethane which has good mechanical property and resists stresses. The hydrophobic polyurethane surface was changed hydrophilic by corona discharf:e treatment. Surface hydrophilicity was measured with Wilhemly plate method and the goniometer. To evaluate matrix protein adsorption, fibronectin adsorption test was done. To eveluate cell adhesion, human endothelial cell attachment forces were measured rising a perfusion chamber of , ism diamter. Less cells were detached from the hydrophilically treated polyurethane. This showed that corona discharge on the polyurethane could improve matrix adsorption and endothelial cell attachment.
Endothelial cells are a vital constituent of most mammalian organs and are required to maintain the integrity of these tissues. These cells also play a major role in angiogenesis, inflammatory reactions, and in the regulation of thrombosis. Angiogenesis facilitates pulp formation and produces the vessels which are essential for the maintenance of tooth homeostasis. These vessels can also be used in bone and tissue regeneration, and in surgical procedures to place implants or to remove cancerous tissue. Furthermore, endothelial cell regeneration is the most critical component of the tooth generation process. The aim of the present study was to stimulate endothelial regeneration at a site of acute cyclophosphamide (CP)-induced endothelial injury by treatment with human umbilical cord-derived endothelial/mesenchymal stem cells (hEPCs). We randomly assigned 16 to 20-week-old female NOD/SCID mice into three separate groups, a hEPC ($1{\times}10^5$ cells) transplanted, 300mg/kg CP treated and saline (control) group. The mice were sacrificed on days 5 and 10 and blood was collected via the abdominal aorta for analysis. The alanine transaminase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), serum alkaline phosphatase (s-ALP), and albumin (ALB) levels were then evaluated. Tissue sections from the livers and kidneys were stained with hematoxylin and eosin (HE) for microscopic analysis and were subjected to immunohistochemistry to evaluate any changes in the endothelial layer. CP treatment caused a weight reduction after one day. The kidney/body weight ratio increased in the hEPC treated animals compared with the CP only group at 10 days. Moreover, hEPC treatment resulted in reduced s-ALP, AST, ALT levels compared with the CP only group at 10 days. The CP only animals further showed endothelial injuries at five days which were recovered by hEPC treatment at 10 days. The number of CD31-positive cells was increased by hEPC treatment at both 5 and 10 days. In conclusion, the CP-induced disruption of endothelial cells is recovered by hEPC treatment, indicating that hEPC transplantation has potential benefits in the treatment of endothelial damage.
Vascular endothelial cells (EGs) are usually difficult to culture to culture in a large scale because of their complicated requirements for cell growth. As the vascular endothelial growth factor (VEGF) is a key growth factor in the EC culture, we transfected human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) using a plasmid containing VEGF gene and let them grow in a culture medium eliminated an important supplement, endothelail cell growth supplement(ECGS). The expression of VEGF by HUVEC tansfected with Vegf GENE was not enough to stimulate the growth of HUVEC, only 40% of maximum cell density obtainable in the presence of ECGS. However, when the culture medium was supplied with 2.5 ng/ml of basic fibroblast growth factor (bFGF), a synergistic effect effect of VEGE and bFGF was observed. In this case, the final cell density was recovered was recovered up to about 78% of maxium value.
Kwon Oh Eok;Lee Hyun Sun;Lee Seung Woong;Chung Mi Yeon;Bae Ki Hwan;Rho Mun-Chual;Kim Young-kook
Archives of Pharmacal Research
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v.28
no.1
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pp.55-60
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2005
Leukocyte adhesion to the vascular endothelium is a critical initiating step in inflammation and atherosclerosis. We have herein studied the effect of manassantin A (1) and S (2), dineolignans, on interaction of THP-1 monocytic cells and human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) and expression of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1), and E-selectin in HUVEC. When HUVEC were pretreated with 1 and 2 followed by stimulation with $TNF-{\alpha}$, adhesion of THP-1 cells to HUVEC decreased in dose-dependent manner with $IC_{50}$ values of 5 ng/mL and 7 ng/mL, respectively, without cytotoxicity. Also, 1 and 2 inhibited $TNF-{\alpha}-induceda$ up-regulation of ICAM-1, VCAM-1 and E-selectin. The present findings suggest that 1 and 2 prevent monocyte adhesion to HUVEC through the inhibition of ICAM-1, VCAM-1 and E-selectin expression stimulated by $TNF-\alpha$, and may imply their usefulness for the prevention of atherosclerosis relevant to endothelial activation.
Objectives : Catalpa ovata G. Don (Bignoniaceae) has been shown to possess a variety of pharmacological activities. However, the effect of Catalpa ovata G. Don on endothelial adhesion molecule expression has not been reported. Methods : To examine the effect of Catalpa ovata G. Don on the expression of adhesion molecules in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) stimulated with tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), we used various methods such as Western blot analysis, reverse tranascription-polymerase chain reaction (RT-PCR), and luciferase activity assay. Results : 1. The extract of Catalpa ovata G. Don inhibited the expression of intracellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) in HUVECs stimulated with TNF-${\alpha}$. 2. The extract of Catalpa ovata G. Don reduced TNF-${\alpha}$-induced adhesion of leukocytes to HUVECs. 3. In addition, The extract of Catalpa ovata G. Don inhibited the promoter activities of ICAM-1 and VCAM-1. Conclusions : These results that Catalpa ovata G. Don may be beneficial in the treatment of inflammatory such as atherosclerosis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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