• Archives of Pharmacal Research
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• 제9권1호
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• pp.45-47
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• 1986

Phenylglycine was obtained as the sole metabolite when .alpha.-aminophenylacetonitrile was ted to the culture broth of Aspergillus furmigatus furmigatus. The isolated phenylglycine showed L-configuration with 80% optical purity. Examination of the hydrolysis of the substrate to phenylglycine with cell free extracts, and the supernatant fraction and the particulate fraction both of which were obtained after ultracentrifugation of the cell free extract at 100,000g, indicated that the nitrile group hydrolyzing enzymes, nitrilase existed not only in cytoplasm, but in microsome fractions.

• 한국식품조리과학회지
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• 제18권1호
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• pp.94-100
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• 2002

The dietary carbohydrates are mainly digested and adsorbed at small intestine. We developed a new food additive as an egg yolk antibody(1gY) against maltase, sucrase and sodium dependent g1ucose cotransporter(SGLT) for the regulation of blood glucose level and weight control. The maltase, sucrase and SGLT were purified from porcine small intestine which is very similar to that of human in physiological characteristics. The purification step contained an ultracentrifugation, ion exchange chromatography and hydrophobic chromatography. The hens were immunized by purified protein and the IgY activities against immunized antigens were determined. This antibody obtained from the immunized hen's egg yolks directly inhibited the activities of maltase and sucrase in vitro. And the IgY delayed and decreased the increment of blood g1ucose level after administration of maltose, sucrose and glucose in rat about 30 to 60%. The results of this study suggest that the IgY inhibiting the carbohydrate digestion could be used as functional food materials for weight control and regulation of blood glucose level in diabetes.

• 한국동물학회지
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• 제34권1호
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• pp.1-7
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• 1991

Lipophorin of Lymuntrn'adispor L. has been purified by KBr density gradient ultracentrifugation. The properties and synthetic site of lipophorin and quantitative change of lipophorin during development have been determined using electrophoresis and immunological analysis. Lipophorin is composed of ho subunits. apo-Lpl (230.000), ago-Lpll (49,000). ann contains carbohydrates and lipids. Anti-lipophorin showed positive reactions with fat body extract and ovary extract but not with gut extract. The concentration of lipophorin in hemolymph showed gradual decrease during larval and pupal stages. Also. fat body released lipophorin into medium. Immunological test showed some partial identity between lipophorin of Lymantpia dispar and hemolymph proteins (probably lipophorin) of Hyphontria cuneo and Galleria metlonefla.

• 한국동물학회지
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• 제35권4호
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• pp.466-473
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• 1992

Storage protein-1 (SP-1) of Gallerio mellonella was identified in hemolvmph and fat body by electrophoresis. SP-1 was purified from hemolvmph by KBr density gradient ultracentrifugation , DEAE-cellulose (DE52) ion-exchange chromatography, and gel permeation chromatography (Sephadex G-200). Purity of SP-1 was confirmed by Non-SDS PAGE and electron microscope. SP-1 is 9.4 nm in diameter and regular octahedron in shape. SP-1 has isoelectric point of 5.7 and native molecular weight of 365 K dalton and is composed of one type of subunit with molecular weight of 82 K dalton. Ttiacylslvcerol and phospholipid were found to be maior lipid components in SP-1.

• Journal of Photoscience
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• 제2권1호
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• pp.1-5
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• 1995

The activity of phospholipase A$_2$ (PLA$_2$) was identified and characterized from cytosolic and membrane fractions of oat cells, respectively. PLA$_2$ activity was determined fluorometrically in the presence of serum albumin using phospholipids labeled at sn-2-acyl position with 10-pyrenyldecanoic acid. When the cell-free extracts of oat tissues were fractionated by ultracentrifugation at 100,000 x g and the PLA$_2$ activity was assayed, we found that most of the PLA$_2$ activity was revealed from the cytoplasmic fraction rather than from the membrane fraction. The activity of cytosolic PLA$_2$ was dependent on Ca$^{2+}$ concentration and the optimum concentration of Ca$^{2+}$ was found to be 100 $\mu$M. It was also found that PLA$_2$ could be translocated toward the membrane site from the cytosol upon increasing Ca$^{2+}$ concentration. These results might suggest that an increased [Ca$^{2+}$]$_i$ by phytochrome action could promote the translocation of the cytosolic PLA$_2$ toward the membrane site.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제4권1호
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• pp.45-51
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• 1997

In our studies on the role of $\beta$-galactosidase in fruit softening, significant difficulty, was encountered in our attempts to extract RNA from persimmon(Diospyros kaki L. cv. Fuyu) fruit due to astringency and tannin content. Initial, unsuccessful RNA extractions involved methods using guanidinium isothiocyanate/CsCl with and without polyvinylpyrrolidone(PVP), phenol/sodium lauryl sulfate(SDS), guanidinium hydrochloride, as well as polysomal RNA purification method that used 0.2 M Tris-HCI (pH 9.0) containing KCI, Mg-acetate, EDTA, $\beta$-mercaptoethanol, and sucrose. A method was devised which employed treatment of fruit with CO2 gas to diminish astringency prior to RNA extraction, followed by extraction of tissue powders with Proteinase K extraction buffer containing PVP and ascorbate at an alkaline pH. This procedure resulted in the removal of tannins and other polyphenolics and extraction of relatively large amount of high-quality RNA suitable for cDNA library construction and polymerase chain reaction(PCR). Futhermore, the procedure does not use the toxic and corrosive chemical guanidinium isothiocyanate or require ultracentrifugation.

• 한국식품영양과학회지
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• 제33권8호
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• pp.1359-1366
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• 2004

초고온-살균 우유를 이용하여 탈지유와 콜로이드성 인산칼슘이 제거된 우유에 TGase를 첨가하여 반응시킨 다음 초고속 원심분리를 실시하고 침전된 카제인 입자들을 동결건조하여 조직의 성상에 대해 주사 전자 현미경을 이용해 관찰, 비교하였다 탈지유는 카제인 입자들이 원심분리 초기(5,000${\times}$g)에는 규칙적으로 회합하였으며 원심분리 속도가 증가하면서 홈을 형성하였고(10,000∼20,000${\times}$g), 40,000${\times}$g에서 다시 회합하였다. 그리고, 100,000${\times}$g에서는 카제인 입자 수의 증가와 함께 규칙적인 회합층을 이루었다. 탈지유에 TGase를 처리하고 1시간 반응시킨 경우에 카제인 입자들의 성상은 입자들끼리 엉켜져서 회합을 하였으며 초고속 원심 분리 속도 증가에 따라 규칙적으로 혹은 불규칙적으로 변형되면서 입자들이 넓어지다가 다시 규칙적으로 카제인 입자들이 회합층을 이루었다. 탈지유에 TGase를 처리하고 8시간 반응시킨 경우 카제인 입자들의 성상은 1시간 반응시킨 경우보다 카제인 입자들이 미세해지면서 규칙적인 층을 형성하였으며, 초고속 원심분리 속도가 증가함에 따라 카제인입자들의 조직이 홈을 형성하면서 불규칙적으로 회합하여 분산된 형태를 나타내다가 다시 비교적 규칙적으로 회합하였다. 콜로이드성 인산칼슘이 유리된 우유에서는 카제인 입자들이 침전되지 않았다. TGase가 첨가되어 1시간 반응시킨 후 콜로이드성 인산칼슘이 유리된 우유에서는 20,000${\times}$g 속도에서부터 카제인 입자들이 침전하였고 그 양상은 작은 낙엽처럼 미세하게 회합층을 형성하였으며, 속도 증가에 따라 카제인 입자들의 조직은 개방되었다. TGase가 첨가된 후 8시간 반응시킨 다음 콜로이드성 인산칼슘이 유리된 시료의 경우 카제인 입자들은 대부분 넓게 회합층을 이루고 불규칙적이었으며 원심분리 속도 증가에 따라서도 큰 변화가 없었다. TGase가 첨가된후 1시간 혹은 8시간 반응시킨 다음 콜로이드성 인산칼슘을 제거하고 원심분리한 현탁액(유청 단백질)을 pH 4.6으로 조정 후 2단계 원심 분리한 침전물의 경우 카제인 입자들은 1시간 반응시킨 시료에서는 대부분의 카제인 입자들끼리 엉켜져 불규칙적인 회합층을 이루고 있는 반면에 8시간 반응시킨 시료에서는 입자들이 미세한 형태로 분산되어 규칙적인 층을 형성하였다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제24권4호
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• pp.314-325
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• 1991

식이지방의 수준에 따라 n6 와 n3 불포화지방산이 혈장 지질조성에 미치는 영향과 또 그 기전이 다른지를 연구하고자 Sprague Dawley 종 수컷쥐에게 저지방(LF, 10% Cal)식이와 고지방식이(HF, 40% Cal)를 각각 6주동안 투여하였으며, 사용된 기름은 포화지방산 급원으로는 쇠기름, n6 linoleic acid(LA) 급원으로 corn oil, n3 ${\alpha}-linolenic$ acid(LL) 급원으로 perilla oil, n3 eicosapentaenoic acid(EPA)와 docosahexaenoic acid(DHA) 급원으로 fish oil이었다. Ultracentrifugation 방법으로 VLDL fraction을 분리하여 thin layer chromatography에 의해서 화학적조성을 구하였다. Plasma cholestere 수준은 LF 와 HF 모두 n6 LA에 의해서는 오히려 증가되었고 n3 LL과 n3 EPA에 의해서는 감소되었으며, HF 에서 n3 EPA가 가장 cholesterol 저하효과가 있었다. HDL-Chol 농도는 n6 LA에 의해서 증가되었으나, HF 경우 n3 EPA에 의해서 유의성있게 감소되었다. Plasma TG 농도는 n3 EPA에 의해서 가장 감소되었고 간의 lipogenic enzyme 활성을 억제하였으며 VLDL fraction의 TG상대적양(%)이 유의성 있게 낮아졌다. 이때 LF 군에서는VLDL fraction의 apo-B의 상대적양(%)이 감소되지 않았으나 HF군에서 n3 EPA에 의해서 유의성 있게 낮았다. 그러므로 n3 EPA의 hvpotriglyceridemic effect는 간에서 lipogenesis를 억제하여 plasma VLDL로 TG 분비가 억제되었을 것이며, HF일 경우는 간에서 apo-B 생성도 억제되었다. 관상동맥성심장질환의 예방적 차원에서 평상시에도 쇠기름과 corn oil 보다는 n3 PUFA가 풍부한 들기름이나 생선을 더욱 이용하는 것이 바람직하다.

• 한국축산식품학회지
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• 제23권4호
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• pp.350-355
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• 2003

원유를 이용하여 탈지유와 콜로이드성 인산칼슘이 제거된 우유에 TGase를 첨가하여 반응시킨 다음 초고속 원심분리를 실시하여 침전된 카제인 입자들을 동결건조하여 조직의 성상을 주사 전자 현미경을 이용해 관찰, 비교하였다. 탈지유와 탈지유에 TGase를 처리하고 1시간 반응시킨 경우에서 카제인 입자들의 성상은 초고속 원심분리 속도 증가에 따라 불규칙적으로 혹은 규칙적으로 변형되면서 입자들이 넓어지다가 다시 규칙적으로 카제인 입자들이 회합층을 이루었다. 탈지유에 TGase를 처리하고 8시간 반응시킨 경우 카제인 입자들의 성상은 불규칙적으로 모여서 덩어리 형태를 나타내다가 다시 규칙적으로 회합하였으며, 원심분리 속도의(20,000∼40,000 ${\times}$g)증가에 따라 조직이 넓어지면서 층을 이루다가 다시 불규칙으로 회합하여 분산되는 현상이 관찰되었다. 콜로이드성 인산칼슘이 제거된 우유와 콜로이드성 인산칼슘이 제거된 우유에 TGase를 첨가하여 1시간 반응시킨 경우에서는 카제인 입자들이 거의 침전하지 않았다. 반면에 8시간 반응시킨 경우에서는 카제인 입자들이 초고속 원심분리 속도 증가에 따라 모여서 회합층을 이루다가 점차적으로 조직이 넓어지는 현상을 관찰할 수 있었다. 결론적으로 주사 전자 현미경에 의한 카제인 입자들의 조직 성상은 TGase를 처리하고 반응시간과 초고속 원심분리 속도를 증가했을때 입자들이 모여 불규칙하게 분산되거나 혹은 넓게 회합층을 형성하였다. 이러한 현상은 TGase가 우유 단백질에 작용하여 교차결합을 촉매함으로써 단백질의 분자구조가 변형되어 카제인 입자들의 조직이 다양하게 나타난 것으로 생각된다.

• 생명과학회지
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• 제12권1호
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• pp.49-54
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• 2002

굴 소비자의 보호를 위해서는 매우 민감하고 특이적으로 바이러스를 모니터링할 수 있는 신속진단법의 개발이 필수적이다. 굴 조직은 흔히 비교적 소량의 바이러스와 검출단계를 방해할 수 있는 다른 물질들을 함께 함유한다. 따라서 굴으로부터 바이러스의 검출에서 가장 중요한 과정은 시료의 가공단계이다. 본 연구에 의하면 한번의 sucrose 구배 초원심분리에 의하여 10%와 50% 사이에서 소량의 바이러스를 분리할 수 있음을 제시하였다. 우리는 두 종류의 primer 세트를 이용하여 HAV와 poliovirus를 동시에 굴 조직으로부터 검출할 수 있었다. 또한, 이 방법은 높은(>95%) 바이러스 회수율을 나타내었다. 이 방법은 24시간이내에 5 g의 굴조직으로부터 2 pfu의 HAV를 검출할 수 있을 정도로 신속하고 민감한 검사법이다.