Background: Granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) is known as a cytokine central to the hematopoiesis of blood cells and to modulate their cellular functions. Besides granulocytes and their precursors, monocytes/macrophages and endothelial cells are direct target cells of G-CSF action. G-CSF influences immune cells in an anti inflammatory way. Methods: To evaluate whether G-CSF has a potential for preventing or ameliorating diseases characterized by mucosal inflammation, we used a mouse model with trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS)-induced inflammatory colitis. To the mice model G-CSF was administrated daily by intraperitoneal injection. Macroscopic evaluation and immunohistochemical analysis of colonic tissues were performed. Results: Re combinant human G-CSF significantly inhibited LPS-induced TNF-${\alpha}$ mRNA expression in THP-1 cells. As for in vivo relevance, G-CSF dramatically reduced the weight loss of mice, colonic damage, and mucosal ulceration that characterize TNBS colitis. Moreover, G-CSF suppressed the expression of tumor necrosis factor-${\alpha}$, interleukin-$1{\beta}$, and intercellular adhesion molecule-1 in TNBS colitis. Conclusion: Current results demonstrate that G-CSF may be an effective agent for the treatment of diseases characterized by mucosal inflammation.
An osmometrical method for determination of the degree of hydrolysis (DH) of hemoglobin was comparatively examined through TNBS (trinitrobenzene) sulfonic acid) method using two experimental variables $({\alpha}\;and\;{\beta})$, which were chosen based on correlation curves between hydrolysis equivalents (h) and $leucine-NH_2$ equivalents. DH values measured through osmometry and TNBS method highly correlated with $R^2$ values of $0.974{\sim}0.991$, irrespective of the reaction pHs and types of enzyme used. $DH_{osm}/DH_{TNBS}$ was >$1.438{\sim}1.656$ depending on the hydrolysis pH $7.5{\sim}10.0)$. Correlation euqations were well fit for measuring DH of Hb hydrolysate at different pH conditions. $DH_{osm}/DH_{TNBS}$ for co-treatment system using Esperase and Flavourzyme was 1.658, in good agreement with that of 1.656 for the single enzyme (Esperase) system. Thus, the osmometrical method was suggested to be a convenient, reliable, and rapid method for determination of DH of hemoglobin hydrolysates.
Kim, Kyeong Jo;Shin, Mi-Rae;Kim, Soo Hyun;Kim, Su Ji;Lee, Ah Reum;Kwon, O Jun;Kil, Ki-Jung;Roh, Seong-Soo
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.60
no.3
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pp.227-234
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2017
Inflammatory bowel disease (IBD) is including Crohn's disease and ulcerative colitis. Sulfasalazine commonly used in IBD, possibly has various side effects after high dosage and long term intake. The present study aimed to investigate the sulfasalazine and combination with herbal medicine on 2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS)-induced in mice model. TNBS-induced mice were injected through a flexible catheter 4 cm in length 1.6 mg TNBS. Animals were divided into five groups (n=12): Normal group, TNBS control group, Sulfasalazine (30 mg/kg) group, Sulfasalazine (60 mg/kg) group, Sulfasalazine (30 mg/kg)+Cinnamomi cortex and Bupleuri radix mixture (30 mg/kg) (SCB) group. Administration groups were fed extract during 7 days. The inflammatory, and apoptotic protein levels were determined using western blotting. SCB treatment showed an outstanding effectiveness in counteracting the IBD, as assessed by reduction of body weight loss, down-regulation of pro-inflammatory proteins and cytokines, and by inhibition of proteins related to apoptosis. This is the first report that sulfasalazine and Cinnamomi cortex plus Bupleuri radix mixture improve the severity of experimental IBD through the inhibition of both inflammation and apoptosis. We confirm that the SCB treatment instead of sulfasalazine alone may be promising as an alternative therapeutic plan against IBD, without any evidence of adverse effects.
Ulcerative colitis and Crohn's disease are a set of chronic, idiopathic, immunological and relapsing inflammatory disorders of the gastrointestinal tract referred to as inflammatory bowel disorder (IBD). Although the etiological factors involved in the perpetuation of IBD remain uncertain, development of various animal models provides new insights to unveil the onset and the progression of IBD. Various chemical-induced colitis models are widely used on laboratory scale. Furthermore, these models closely mimic morphological, histopathological and symptomatical features of human IBD. Among the chemical-induced colitis models, trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS)-induced colitis, oxazolone induced-colitis and dextran sulphate sodium (DSS)-induced colitis models are most widely used. TNBS elicits Th-1 driven immune response, whereas oxazolone predominantly exhibits immune response of Th-2 phenotype. DSS-induced colitis model also induces changes in Th-1/Th-2 cytokine profile. The present review discusses the methodology and rationale of using various chemical-induced colitis models for evaluating the pathogenesis of IBD.
Hyeon-Ji Yoon;Gyu-Hyeon Park;Yu-Rim Lee;Jeong-Min Lee;Hyun-Lim Ahn;Syng-Ook Lee
Food Science and Preservation
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v.30
no.3
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pp.434-445
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2023
Hemp (Cannabis sativa L.) seeds have recently been attracting attention as a new high-value-added food material owing to their excellent nutritional properties, and research on the development of functional food materials using hemp seeds is actively progressing. This study aimed to evaluate the antioxidant properties of hemp seed protein hydrolysates. Protein hydrolysates were prepared from defatted hemp seed powder (HS) by enzymatic hydrolysis using five different proteases (alcalase, bromelain, flavourzyme, neutrase, and papain). 2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) assay and SDS-PAGE analysis revealed that HS showed a high degree of hydrolysis after treatment with each enzyme except papain. The total polyphenol content of the protein hydrolysates (<3 kDa) and the RC50 values obtained from two different antioxidant tests showed that alcalase hydrolysate (HSA) had a relatively high level of antioxidant capacity. In addition, treatment with HSA (25-100 ㎍/mL) significantly inhibited linoleic acid peroxidation. These results suggest that hemp seed protein hydrolysates are potential sources of natural antioxidants. Future studies will focus on the identification of active peptides from HSA.
In order to detect the gelation of ultrahigh temperature (UHT) treated market milks during storage at 20+1C, the free amino groups were quantified with 2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid, and the measurement of pH values and the alcohol test were monthly carried out. The average tree amino groups were $0.94{\sim}1.11{\mu}M$ at 1 month, $1.95{\sim}2.17{\mu}M\;at\;5{\sim}6$ month and $4.95{\sim}6.36{\mu}M$ at 12 month. The pH values at the same time as above were $6.72,\;6.49{\sim}6.55\;and\;6.14{\sim}6.16$, respectively. The alcohol test showed positive results at $5{\sim}6$ month, which could indicate the casein instability and beginning of gelation. These results suggest that the gelation of UHT market milks could he predicted through checking some chemical parameters weekly and be helpful for quality control.
We had previously reported that the protective effect of taurine against indomethacin-induced gastric mucosal injury was due to its antioxidant effects, which inhibited lipid peroxidation and neutrophil activation. In this study, we examined the effect of taurine on reducing the inflammatory parameters of trintrobenzene sulfonic acid (TNBS)-induced inflammatory bowel disease (IBD) in rats. In order to induce IBD, ethanolic TNBS was given to rats intracolonically. Then they received 500 mg/kg.day of taurine orally and were sacrificed one week after IBD induction. While ulceration and inflammation of distal colon with formation of granuloma in the vehicle-treated IBD rats two days after administration of TNBS were observed, treatment with taurine ameliorated colonic damage and decreased the incidence of diarrhea and adhesion. also, colon weight as an index of tissue edema, which was mardedly increased in the IBD rats, became significantly lower after administration of TNBS were observed, treatment with taurine ameliorated colonic damage and decreased the incidence of diarrhea and adhesion. Also colon weitht as an index of tissue edema, which was markedly increased in the IBD rats, became significantly lower after taruine treatment. Myeloperoxidase (MPO) activity in the vehicle-treated IBD rats was substantially increased, compared with that of normal control. the taurine-treated animals significantly reduced MPO activity (35% lower) when compared with that of the vehicle-treated animals. Taurine treatment decreased both basal and formyl-methionyl leucyl phenylalanine-stimulated reactive oxygen generation from colonic tissue in the IBD rats. These results suggest that the administration of taurine reduce the inflammatory parameters in this IBD rat model by increasing defending capacity against oxidative damage.
To develop a health-aid preparation of Dioscorea batatas (DB), lactic acid fermentation was attempted using a mixed starter comprising of Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Bifidobacterium longum. The anaerobic fermentation of a 10% DB flour suspension gave a uniform suspension of pH 3.65, containing $8{\times}10^6$ CFU/mL lactic acid bacteria. During the administration of the lactic acid fermented DB (FDB) and DB to trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS)-induced colitis mouse model, histological lesions, morphological damage, and myeloperoxidase acitivity were significantly reduced at a dosage of 200 and 400 mg/kg/day. Dose-response (200 and 400 mg/kg/day) studies revealed that FDB pre-treatment of mice significantly ameliorated the appearance of diarrhoea and the disruption of colonic architecture. In FDB-pretreated mice, there was a significant reduction in the degree of both neutrophil infiltration (measured as decrease in myeloperoxidase activity) and weight loss rates. Theses findings suggest that FDB exerts beneficial effects in experimental colitis and may be useful in the treatment of inflammatory bowel disease.
In other to establish the exact determination method of amino nitrogen (AN) in salt-fermented fish sauces, we determined the AN in fish sauces according to the measuring methods and also investigated the main factors influencing on determination method of AN. AN in salt-fermented anchovy sauce increased linearly as fermentation progressed, and was shown the highest amount measuring by the Formol method, followed by the trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) method and the Copper-salt method. AN concentration in anchovy sauces fermented for 12 months was $88.2\%$ and $77.6\%$ for the TNBS method and the Copper-salt method, respectively, on the basis of Formol method. The ratio of AN/total nitrogen (TN) in anchovy sauce fermented for 12 months was higher than that in commercial anchovy sauces. The determination of AN in anchovy sauce by the TNBS method was not affected by salt concentration, and slightly affected by heating. The effect of MSG on AN contents by Copper-salt method was shown higher than those by the Formol method and the TNBS method. The TNBS method was adaptable to measure the content of AN in fish sauce by this study.
Proceedings of the Materials Research Society of Korea Conference
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2010.05a
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pp.40.2-40.2
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2010
In this study, oxidized alginate/gelatin/biphase calcium phosphate (BCP)- based hydrogel composites were fabricated. Alginate sodium was oxidized by periodate. The oxidized product was confirmed by using $^1H$ and $^{13}C$ NMR spectra. The number average molecular weight ($M_n$), the average molecular weight ($M_w$) of the oxidized alginate were determined by Gel Permeation Chromatography (GPC). The hydrogel was formed from the oxidized alginate and gelatin solution via Schift-base reaction. The hydrogel showed a highly porosity by a Scanning Electron Microscope (SEM) and Mercury Intrusion Porosimetry (MIP). Crosslinked density of the gel matrix were assessd by trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) assay that shows a high effect on swelling ratio. Increment of the crosslinked desity resulted in enhancing compressive strength of the hydrogel composite. The cytotoxity of hydrogel was assessed with osteoblast MG-63. The hydrogel composites show a high compatibility. The obtained results showed a potential application for bone regeneration in future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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