Tributylin(TBT)과 Triphenyltin(TPT) 같은 유기주석화합물은 선박, 어망, 어구등 방오도료의 소재로 사용되어 왔으나 최근 해양생물에게 미치는 독성 때문에 세계 각 국에서도 그 사용을 금지하고 있다. 우리 나라의 경우, 한국 해양연구소가 내분비 교란물질(환경호르몬)의 농도를 조사한 결과 다른 지역에 비해 내만 지역에서의 오염도가 다소 높다고 보고되어 있다. 내만지역의 경우는 파도가 약하여 양식장이 많으므로 양식어류가 TBT와 같은 유기주석 화합물에 노출될 가능성은 매우 높다. (중략)
유기주석화합물인 tributyltin chloride (TBTC), tributyltin oxide (TBTO)와 triphenyltin chloride (TPTC)를 넙치 간장으로 만든 미크로좀에 in vitro적으로 노출시켜서 이들 화합물의 대사에 관여하는 mixed function oxidase (MFO) 중 cytochrome P450 (CYP) 농도와 7-ethoxyresorufin deethylase (EROD) 활성의 변화를 조사하였으며, 또한 in vivo 실험에서는 TPTC를 넙치에게 복강주사(7.5 mg $kg^{-1}$ BW)하여 간장의 MFO (CYP농도, NADPH cytochrome c 환원효소 활성, NADH chtochrome b5 환원 효소 활성, EROD 활성) 반응을 경시적으로 조사하였다. 그 결과, in vitro에서는 TBTC, TBTO 및 TPTC가 모두 CYP 농도와 EROD 활성을 저해하였으며, 저해력은 TPTC가 가장 컸고 이어서 TBTO, TBTC의 순이었다. 유기주석화합물의 노출농도와 노출시간과 비례하면서 저해정도가 커졌으며, 특히 EROD활성의 저해는 노출농도에 크게 의존적이었다. 그리고 in vivo실험에서도 유기주석 화합물은 CYP농도, NADPH cytochrome c 환원효소 활성, NADH cytochrome b5 환원효소 활성, EROD 활성을 억제하였다. EROD 활성은 오염물질에 의한 반응이 민감하고 재현성도 있어 바람직한 측정지표로 이용될 수가 있을 것이다.
Juvenile Paralichthys olivaceus (mean length $17.3{\pm}2.2cm$, mean weight $46.5{\pm}6.3g$) were exposed for 10 days to tributyltin (TBT) at various concentrations (0, 1, 2, 4 and $8{\mu}g/L$). Hematological parameters, such as red blood cell (RBC) count, hematocrit (Ht), and hemoglobin (Hb) concentration, were considerably decreased by high TBT concentrations. In plasma constituents, inorganic components such calcium and magnesium were also significantly altered. Plasma calcium was notably decreased, whereas plasma magnesium was increased. The enzyme components, glutamic oxalate transaminase (GOT) and glutamic pyruvate transaminase (GPT), were significantly decreased by TBT exposure. The present findings suggest that TBT exposure can cause significant alterations in hematological parameters and plasma constituents of flatfish Paralichthys olivaceus.
Butyltins (BTs) were measured in 2 species of shellfish and 16 species of fish collected along the Korean coast. Tributyltin (TBT) was detected in the mussels and oysters of sentinel organisms (20 to 940 ng Sn/g dry wt), indicating widespread contamination of TBT in the Korean coast. The elevated concentrations of TBT in the shellfish found in the sites near harbors or shipyards suggested that antifouling paints are probable major sources of butyltins in these areas. The TBT compound was detected in 12 out of 16 fish samples. The concentrations of TBT in fish muscles wee between 7 and 151 ng Sn/g dry wt, while the level in whole body of anchovy was very high (793 ng Sn/g dry wt). Exposure doses to Korean people via consumption of these marine products wee evaluated. The results suggested that the environmental levels of TBT were below the level of concern.
수리조선소에서 발생하는 TBT 함유 선박세척폐수의 용매추출 처리기술을 개발하기 위한 기초연구로서 인공 선박세척폐수를 이용하여 선박용 및 자동차용 디젤, 벙커 B유, 신너, 톨루엔, 에테르 등의 여러 가지 용매들의 TBT 추출효율을 비교하였으며, 추출효율에 대한 추출용매의 양 및 교반시간, 강도, pH 등의 추출조건의 영향을 평가하였다. 선박용 경유는 신나, 병커B 등에 비해 상대적으로 우수한 TBT 추출효율을 보였으며, 적정 추출용매 주입량은 폐수 IL 당 용매 10mL로 평가되었다 TBT 추출을 위한 교반강도가 50rpm에서 250rpm으로 증가함에 따라 잔류 TBT 농도는 약 120ppb에서 2.8ppb로 크게 감소하였다 잔류 TBT는 추출 1시간이후 크게 감소하였으며, 5시간 이후부터는 다시 증가하였다. 추출효율에 대한 Ph의 영향은 크지 않았으나, pH 6∼7의 약산성영역에서 양호한 추출효율을 보였다.
본 실험은 TBT에 노출된 돌돔의 성장 및 혈액학적 변동을 검토하기 위하여 실시하였다. 돌돔은 TBT 0, 1, 2, 4, $8{\mu}g/L$ 농도에서 4주간 노출하였다. 돌돔의 성장은 $8{\mu}g/L$ TBT 농도에서 유의한 감소를 나타냈다. RBC count, hematocrit 값, hemoglobin 농도, 혈청 glucose 농도는 $8{\mu}g/L$ TBT 농도에서 유의한 감소를 나타낸 반면, 총 단백질 농도는 유의한 증가를 나타냈다. 또한 GOT 및 GPT 활성은 $8{\mu}g/L$ TBT 농도에서 유의한 증가를 나타냈다. 따라서 해역에 TBT 농도 $8{\mu}g/L$ 이상의 존재할 경우에는 돌돔의 성장 및 혈액학적 변동이 예상된다.
Uptake kinetics of Cd and Zn by leaves and rhizome of the seagrass Zostera marina were examined in controlled laboratory radiotracer experiments. Subsequently, acute toxicity of Cd, Cu and TBT on photosynthetic quantum yield (ΔF/Fm’ of Z. marina were determined, and the differential sensitivities of rapid light curve (RLC) to those harmful substances were also compared. All measurements on photosynthetic activity were determined by chlorophyll a fluorescence method using pulse amplitude modulation (PAM). Metal uptake by Z. marina was saturated with increasing exposure time in leaves and rhizomes. Uptake of Zn by Z. marina was faster than that of Cd. Metal uptake rates in Z. marina decreased with the increase of dissolved metal concentrations and also with the increase of biomass. The adverse effect of TBT on effective quantum yield was stronger than other pollutants. Average acute toxicity on the RLC of the seagrass exposed to TBT and two heavy metals (Cd and Cu) was going to decrease as follows: TBT > Cd > Cu. Our preliminary results in this study suggested that Z. marina potentially can be used as a biomonitor of harmful substances contamination in coastal waters.
The comet assay, also called single-cell electrophoresis (SCGE) assay, is a potential sensitive monitoring tool for DNA damage in cells. The primary objective of this study was to use comet assay to ascertain if the blood cells of flounder (Pleuronichthys olivaceus) and muscle cells of clam (Saxidomus purpurata) are suitable for genotoxicity screening. This was achieved by initially exposing blood and muscle cells under in vitro conditions to the reference genotoxin hydrogen peroxide ($H_2O_2$); strong correlation between $H_2O_2$ concentration and comet values were found. Subsequently, the identification of DNA damage in isolated cells from flounder and clam was performed under in vivo exposure to benzo(a)pyrene (BaP) and tributyltin (TBT). Flounder and clam were exposed to different concentrations (1, 10, 50, 100 ${\mu}g/L$) of BaP or TBT for 4 days. Regardless of treated chemicals, blood cells of flounder were more prone to DNA breakage compared to muscle cells of clam. In conclusion, in vivo genotoxicity of BaP and TBT can be biomonitored using the comet assay. This study suggests that flounder and clam do show potential as mediums for monitoring genotoxic damage by comet assay.
본 연구는 환경 호르몬으로. 분류된 67종 중의 하나인, 선저 도료나 어망, 어구 및 방오페인트 재료로 사용되어지고 유기주석화합물(tributyltin)을 사용하여 설치류의 웅성생식세포에서 세포자연사를 일으키는 작용기작을 조사하였다 먼저 흰쥐의 레이딕 세포주인 R2C에 유기주석화합물을 농도별(1∼500 nM)로 처리한 후 DNA fragment현상을 전기영동법을 통하여 조사하였다. 그 결과 유기주석화합물을 처리한 군들에서 대조군에 비하여 세포자연사현상이 농도 의존적으로 증가하였다. 유기주석화합물이 세포 내 칼슘이온(Ca$^2$$^{+}$)및 유해 산소종(reactive oxygen species)에 미치는 영향을 조사해본 결과 유기주석화합물 처리시 세포 내 칼슘이온 및 유해 산소종이 시간에 의존적으로 크게 증가하였다. 또한 칼슘 킬레이터인 BAPTA를 전 처리한 경우 유기주석화합물에 의해 유도된 칼슘이온 및 유해 산소종이 대조군에 비해 유의성 있게 감소하였다. 이러한 세포자연사 과정이 미토콘드리아의 cytochromec방출에 의한 과정인지를 화인하기 위해 세포질 내 cytochrome c양을 western blot법을 사용하여 확인해 본 결과 유기주석화합물처리 시간 및 농도에 따라 증가하며, 이 또한 BAPTA를 전처리 한 경우 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다. 또한 유기주석화합물이 세포자연사 유발 시 caspase-3 효소 활성과의 관계를 확인하기 위해 ELISA법을 사용하여 확인해 본 결과 유기주석화합물 처리 농도에 의존적으로 증가하였으며, caspase-3효소 억제자로 잘 알려진 Z-DEVD FMK을 전 처리한 경우 유기주석화합물을 처리한 군에 비해 세포자연사율이 크게 감소하였다. 이러한 결과들을 종합해 볼 때 유기주석화합물은 세포 내 칼슘이온의 증가를 일으키고, 그로 인하여 세포질 내 유해산소종 및 cytochrome c의 양이 증가함으로써 세포자연사 다음 단계인 caspase효소 활성의 증가를 통하여 흰쥐의 레이딕 세포주인 R2C의 세포자연사를 일으킬 것이라 추론할 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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