The microsporidian infection with Nosema bombycis, reconfirmed its high virulence and transovarial tranmissibility, however, the characteristic symptom of the spots like pepper grains on the diseased larval skin was no more recognized by present varieties of the silkworm. Transovarial transmission rate detected from moth was above 90% in dead eggs or dead larvae in the rearing by mulberry leaves, 80% in the newly hatched larvae starved to death. Transovarially transmitted N. bombycis was easily observed from dead eggs and larvae, and were suggested an individual inspection of a few of dead eggs for detection of the pathogenic spores. The progeny population provided indicative factors on the sampling of predictive and corrective inspection. The higher concentration of N. bombycis spores included in the hindabdormal part of infected moth, applicative on the simple method of indivisual moth inspection. For the predictive inspection of growned 5th-instar larvae, N. bombycis infection was detectable without microscopic observation by the unique symptom of turbid milky-white spots on the silk gland. Inspection of the meconia artificially discharged from silkworm moth, was also succesful of microscopic observation before crossing, without killing or homogenize the moths. The results provided a basis of rational methods for the inspection of N. bombycis infection of the silkworm.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.11
no.2
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pp.81-86
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2005
The mode of transmission, effect on fecundity, hatching and tissues specificity of a microsporidian $(Lb_{ms})$ recovered from Lamerin breed of the silkworm Bombyx mori L. was studied and compared with standard strain Nosema bombycis. Peroral inoculation of $Lb_{ms}$ or N. bombycis to zeroday of $4^{th}$ instar larvae of silkworm was the most suitable method for producing information on development of stage specific mortality, pupation and obtaining infected adults for transovarial transmission studies. It was observed that pupal mortality, the percentage of moths emerged and the percentage of moths infected were significantly high in N. bombycis infected batches as compared $(Lb_{ms})$ in all the three tested breeds of the silkworm. However no significant difference was observed in larval mortality. The fecundity and hatchability was not affected significantly in $(Lb_{ms})$ infected adults, however significant reduction in egg production, fecundity, hatchability and increased egg retention was observed in mother moths infected with N. bombycis. The $(Lb_{ms})$ is transmitted both horizontally and vertically at lower rate due to its low rate of proliferation. The trans ovarial transmission of $(Lb_{ms})$ to the $F_1$ progeny generation through eggs averaged only $61.33\pm5.10\%$ whereas N. bombycis was transmitted at $100\%$. The $(Lb_{ms})$ had low oral infectivity and low transovarial transmission in silkworm B. mori.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.2
no.2
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pp.119-122
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2001
Whether Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus (BmNPV) can be transmitted to offspring, has been a noticeable question for a long time. When fifth instar larvae of the silkworm were orally inoculated with BmNPV dot hybridization and PCR amplification analysis demonstrated that BmNPV was not detected in the eggs laid by BmNPV productively infected female moths. The results indicated that BmNPV could not be transovarially transmitted.
Through the histological and anatomical investigation of silkworm gonad, N. bombycis infection was found to begin from the peripheral region of ovarial sheath or testicular sheath, then, the pathogens spread to the inner portion. Peroral inoculation with purified spores of N. bombycis to 2nd instar larvae at dosages around 106-8/㎤ of artificial diet resulted in the extremely extended larval survival as long as 15 to 22 days of 4th instar. The growth of ovarioles was confirmed in the 10 to 14 day old larvae, oogonia developed into oocytes and nurse cell against heavy infection of the ovary. Gonads rarely obstructed oogenesis and spermatogenesis in the pupae failed in adult eclosion. Light infection of female hosts effected insignificantly on the ovarial development, however, recorded 100% transmission of the pathogens to the progeny populations. Conclusively, ovarial inflection of silkworm induce transovarial transmission begins around 2~3 day old pupae when ovarioles extruded out to hemocoel, and the infection period thought to be continued until the stage of eggs complete shell formation in the ovariole.
Present experiment designed for the review of theoretical basis for the inspection system of infected insects by Nosema bombycis. A microporidian N. bombycis, known as the high virulence, produced at the average of 7$\times$108 spores per female moth of the silkworm, Bombyx mori, enabled transovarial tranmission. Detectability of N. bombycis spores in the mass inspection was varied by dillution level, the higher limit of dillution with healthy moths was 1:140 for 100% detection, 1:160 for 99.5%, 1:200 for 99.0%. For an efficient inspection under the microscopic observation (600$\times$), the lower limit of spore concentration was determined as 1, 000, 000 spores/ml, 60-80 moths could be applicable for a maximum sample unit of a lot. Following the present inspection unit conditioned 35 to 40 moths for a lot. N. bombycis spores were easily detectable from the preparation of crude homogenate with 2% KOH, even the step of contrifuge was omitted. The results suggested a new basis of rational mass inspection system of silkworm female moths to save the facilities, labor, and time.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.31
no.2
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pp.70-74
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2015
The current market size of insect industry in Korea is estimated at 300 million dollars and more than 500 local farms are related to many insect industry. One of the strong candidates for insect industry is Korean horn beetle, Allomyrina dichotoma. Early this year, we reported a viral disease extremely fatal to A. dichotoma larvae. While we were proceeding a nationwide investigation of this disease, it was informed that similar disease symptom has been occurred occasionally during past over 10 years. The symptom can be easily confused with early stage of bacterial infection or physiological damage such as low temperature and high humidity. A peroral infection with the purified virus to healthy larvae produced a result that only 21% of larvae survived and became pupae. Although some of the survived adult beetle was deformational, many of them had no abnormal appearance and even succeeded in mating. Later, these beetles were examined if they were carrying the virus, and all except one were confirmed as live virus carrier. This implies that these beetles may fly out and spread the disease to the nature. We found the evidence for this possibility by collecting a few wild A. dichotoma larvae which were virus infected, near two local farms rearing A. dichotoma larvae. So far, transovarial transmission of this virus to the eggs, or horizontal transmission to other commercially reared insects is not known yet.
Transovarial transmission of cytoplamic polyhedrosis virus in the silkworm was studied by observing the phenomena of induction, interference and virulence enhancement in the larvae from moths inoculated with hexagonal Polyhedra of cytoplasmic polythedrosis virus. The experimental results obtained are as followings. 1. The effect of inoculation with tetragonal polyhedra of cytoplasmic polyhedrosis virus on the rate of infective induction with hexagonal polyhedron virus and with hexagonal plus tetragonal polyhedron viruses in the larvae from moths infected with hexagonal polyhedron virus was studied. Infection rate was higher by 40 to 60 percent in the larvae from infected female group than in tile larvae from noninfected female group. 2. In the studies of the effect of formalin-feeding on the induction of infection with hexagonal polyhedron virus, infection rate was higher by 40 percent in the larvae from infected female group than in the larvae from noninfected female group. However, there was no significant difference in the infection rates between the two formalin-concentration groups. 3. The effect of cold treatment on the induction of infection with hexagonal polyhedron virus was studied. Infection rate was higher by 50 percent in the larvae from infected female group than ill the larvae from noninfected female group. No difference was found in the infection rates of the two treatment groups of 12 and 48 hours. 4. The phenomena of induction and interference were studied by observing rate of infection with hexagonal polyhedron virus induced by the inoculation with tetragonal polyhedron virus. The degree of interference of primary hexagonal polyhedron virus by secondary tetragonal Ployhedron virus was increased as the dosage of secondary virus was increased. At the concentration of 1${\times}$10$\^$8/m1 of the secondary virus, the degree of interference was similar to. that of control group. On the other hand, infection with tetragonal polyhedron virus at low concentration was interfered by the primary virus. At the concentration of 1N10f/m1 of tetragonal polyhedron virus, however, the rate of infection with tetragonal polyhedron virus was increased sharply, which is still lower by 30 percent than that of control group. 5. In the studies of induction and virulence enhancement, based on the 1ate of mixed infection with hexagonal and tetragonal polyhedron viruses, the highest difference of infection rate between experimental group and control group exceeded 40 percent when the concentration of tetragonal polyhedron virus was 1${\times}$10$\^$7/m1. However, the infection rate of control group was not affected by concentrations of tetragonal polyhedron virus.
Many of studies on the transovarial transmission of occult virus and their activation due to various stresses such as cold or heat treatment, chemical feeding, and nutritional deficiency, etc., in the silkworm, Bombyx mori L. have been made, but any attempts have been not made to control virus diseases by detection of the occult virus-carried moths in the production of silkworm egg of hybrids, because of difficulty to detect occult virus in any stage. Therefore, it may be worth while to disclose whether a sublethal infection of the moths from which active virus are detectable, has the same level of induction rate as that of occult virus activation, thus to apply its results for the reduction of the occurence of virus diseases in silkworm rearing. For these purposes, the following experiment was conducted as one of preliminary steps. In this study, investigations on the generation-to-generation transmission of occult virus and a sublethal infection, and the role of chromosomal gene of the host, Jam 103 and Jam 104 in the Previous generation, and Jam 103 x Jam 103 and Jam 104 f Jam 104 in the next generation were made for the induction of virus diseases due to the transmitted virus. The frequency of cytoplasmic polyhedrosis due to the induction in the F$_1$ generation was markedly higher in the cross-batches, male$\times$female and male$\times$female in which inoculated individuals were used as fem ale parents than in the cross-batches, male$\times$female and male$\times$female in which virus has been not inoculated or inoculated only to male in the previous generation. The tendency of increasing rate was observed in any treatments; such as the inoculations of cytoplasmic polyhedrosis virus (10$\^$5/, 10$\^$6/ 10$\^$7, and 10$\^$8//ml ill different concentration of inocula) , cold-treatment (5$^{\circ}C$, 12hrs or 24hrs), and formalin-feeding treatment (2% or 3%). The shape of polyhedra (tetragonal in outline) examined in the F, larvae was identified as that of the inoculated polyhedra with partial application of immunofluorescent techniques. These results suggests that the cytoplasmic polyhedrosis virus in B. meri L. are transmitted to the next generation through the egg, apparently in the occult state. And the experimental results of various cross-batches revealed the egg cytoplasm plays an important part i the transmission of the occult virus of the cytoplasmic polyhedrosis virus,
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[게시일 2004년 10월 1일]
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