Kim, Se-Eun;Kim, Sun-Yeou;Park, Mi-Jung;Song, Jin-Ho;Lee, Eun-Bang;Lee, Heun-Pa;Kim, Young-Choong
YAKHAK HOEJI
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v.33
no.5
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pp.300-307
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1989
Expression of transferrin gene in various organs of rat was studied using rat transferrin cDNA. The hybridization method of $[^{35}S]-labeled$ transferrin cDNA with transferrin mRNA in cytoplasmic preparations was used to measure the level of transferrin mRNA. The rat from 15-day old fetus to 21-day old postnatal were employed as an animal model. In the liver, the level of transferrin mRNA increased with increasing age. However, the level of transferrin mRNA in brain was significantly lower than that in liver and the level did not increase with age.
A complete mRNA sequence of transferrin from the wax moth, Galleria mellonella, was obtained, and compared with those of other species. We previously reported that the sequence was most similar to those of Manduca sexta and Bombyx mori. As in other moths, G. mellonella transferrin had only one iron-binding site at its N-terminal region. Semi-qRT PCR was conducted to investigate tissue-specific distribution and transcriptional regulation of the wax moth transferrin mRNA. Larval muscle and fat body contained larger quantity of mRNA than other tested tissues. In this study, it was observed that iron and cadmium regulated transferrin transcription, and this regulation pattern was tissue specific. Iron up-regulated transferrin mRNA level in fat body, while suppressed it in the Malpighian tubules and silk glands. Cadmium decreased the mRNA level in fat body, muscle, and Malpighian tubules, but significantly increased the mRNA level in silk glands. In addition, the mRNA expression was induced by all tested pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) including LPS, lipoteichoic acid (LTA), glucan, and even chitin.
The interrelationship between the differentiation and expression of mRNA for transferrin in the HL-60 leukemia cell line was studied. Transferrin mRNA was expressed in HL-60 leukemia cells and the amount was 50% of that in the positive control cell line, HepG-2 cells. The expression of $T_f$ mRNA in HL-60 cells was not regulated by IL-1, IL-6 and $TNF-{\alpha}$, respectively. The expression of $T_f$ mRNA in the differentiated cells into a granulocyte lineage by DMSO, or all-trans RA, was up-regulated (160-170% of control cells); whereas, the expression was not regulated in the differentiated cells into a macrophage lineage by PMA. These results suggest that the differentiation to a granulocyte lineage of HL-60 leukemia cells appear to be related with the upregulation of transferrin mRNA expression.
To investigate the effects of korean ginseng on the expression of transferrin receptor (TfR) in the liver cell membrane, we had carried out the experiments of $[^{3}H]thymidine$ uptake, $^{125}I-transferrin$ binding, and TfR mRNA expression in the liver after partial hepatectomy of normal and 3'-methyl-4-dimethylaminoa-zobenzene (3'-Me-DAB) treated rat with or without treatment of korean gingseng. $[^3H]thymidine$ uptake was not changed in the liver of 3'-Me-DAB or ginseng treated rat compared to that of control rat, but increased in that of partial hepatectomy of normal or 3'-Me-DAB treated rat. And this increased $[^{3}H]thymidine$ uptake was lowered slightly by the treatment of ginseng. Transferrin binding sites in the liver plasma membrane of ginseng treated rat with or without partial hepatectomy were similar, but increased in that of 3'-Me-DAB treated rat with or without partial hepatectomy compared to those of each control rat and these increased binding sites were reduced by ginseng treatment. Transferrin binding affinity (l/kd) was not changed by ginseng treatment, but tended to decrease in the liver of 3'-Me-DAB treated rat or in those after partial hepatectomy of all groups and reverse by ginseng treatment in 3'-Me-DAB treated rat. The expression of TfR mRNA was increased in the liver of 3'-Me-DAB treated rat with partial hepatectomy (peak at 24 hours), but lowered by ginseng treatment in this rat. From these results, it is suggested that korean ginseng has no effect on the increased expression of TfR with decreased affinity in the cell membrane of regenerated liver after partial hepatectomy of rat, but could inhibt that of 3'-Me-DAB treated rat through the regulation of DNA synthesis or TfR mRNA in partial.
Serotransferrin cDNA from the Siberian sturgeon Acipenser baerii was isolated and its expression patterns during early life intervals were characterized. It contained an ORF encoding a 708-aa-long polypeptide, including a 19-aa signal peptide. Bioinfomatic analysis and 3D modeling indicated a typical bi-lobal structure with conserved iron-coordinating residues. During embryonic development, the potential transition of maternally provisioned transcripts to zygotically de novo transcribed ones occurred around blastula stage. The transferrin mRNA levels peaked at stages responsible for pronephros, heart and erythropoietic component differentiation. After hatching, the transferrin mRNA expression gradually increased at early ontogenic phases (0 to 3 DPH) corresponding to the periods in which prolarvae exhibited increased blood circulation and liver differentiation. The expression decreased at subsequent stages in which prolarvae exhibited benthic movement. The tissue distribution assay indicated liver-predominant expression at fingerling stage. From the microinjection-based challenge with Aeromonas hydrophila at day-0 and day-7, the transcriptional response was modulated toward upregulation, in which the amounts induced at 6, 12 and 24 HPI were greater in prolarvae injected at day-7 than at day-0. Therefore, transferrin plays important roles in both early development and host protective responses to pathogens in the Siberian sturgeon.
Lee Sang Mi;Kim Jin-Seok;Oh Yu-Kyoung;Lee Yong-Bok;Sah Hongkee
Macromolecular Research
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v.13
no.3
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pp.218-222
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2005
Transferrin-conjugated liposomes ($T_f$-liposomes) were made and formulated with pCMVluc DNA to form a lipoplex. Among the various formulations studied, the $T_f$-liposome: pCMVluc DNA complex at a ratio of 5: 1 (wt/wt) showed the highest transfection efficiency, which was twice that of $Lipofectin^{TM}$ on HeLa cells. The maxi-mum tolerated dose (MTD) of this lipoplex formulation from a single intravenous injection was over 10 mg/kg in healthy ICR mice. The RT-PCR results showed that the highest level of luciferase mRNA was detected in the lungs, followed by the liver, spleen, heart and kidneys, after an intravenous injection into mice. Two weeks after the injection, the levels of luciferase mRNA decreased gradually in the liver, spleen, heart, and kidney, but not in the lungs. The micro-array study showed that the cancer-related genes, including the bcl 6 gene, were highly up-regulated by the treatment with $T_f$-liposome/ pCMVluc DNA complex on HeLa cells, indicating that there were possible interactions between the host chromosomal DNA and the $T_f$-liposome within the cells. The results obtained from this study are expected to be useful for designing a safe and efficient gene delivery system using transferrin-conjugated liposomes.
To investigate the genes which is related to immune reaction of Bombyx mori, differential screening was carried out using naive and induced B. mori mRNA probe. To begin with, we constructed the cDNA library with mRNA isolated from fifth instar larvae injected with E. coli(4 X 106 cells/larva) using Uni ZAP XR vector kit. Thirty-two inducible cDNAs showing higher intensity on the induced mRNA probing membranes were selected. Partial nucleotide sequences of 29 clones were determined and their expessed sequence tags (ESTs) were produced. Nineteen ESTs in 29 ESTs were matched in GenBank database and the rest of them were found to be unknown. These unmatched ESTs were presumed to be novel genes. The nineteen ESTs contained variable genes related to biological process in Bombyx mori and four classes immune genes. Four clones, BmInc 6, 8, 18 and 27 were similar to two antibacterial peptide genes, hemolin gene and transferrin gene, respectively.
In vitro development of bovine embryos is affected by many factors such as energy substrates, amino acids, and some growth factors. It has been reported that mRNA of insulin, PDGF and their receptors are detected in cow embryos, and that some chelating agents such as EDTA and transferrin have beneficial role on mouse and bovine embryos. The author hypothesized that insulin, transferrin arid PDGF added to a culture medium increase in vitro development of bovine embryos by chelating toxic substance(s) or increasing cell growth and metabolism. Immature oocytes from slaughtered ovaries of Holstein cows and heifers were matured for 24 hours in a TCM199 containing 10% fetal calf serum, FSH, LH and estradiol with granulosa cells in vitro. Matured oocytes were coincubated with sperm for 30 hours in a modified Tyrode's medium (IVF). Embryos cleaved to 2- to 4-cell at 30 hours after IVF were selected and cultured in a 30-$\mu$l drop of a synthetic oviduct fluid medium (SOFM) containing 0.8% BSA, Minimum Essential Medium essential and non-essential amino acids, and insulin, transferrin or PDGF for 9 days. Supplementation of a SOFM with insulin, and /or transferrin did not increase develop-mental rate to expanding and hatching blastocyst of 2- to 4-cell bovine embryos compared with control. The highest developmental rate to hatching blastocyst was shown when PDGF was added at the concentration of 10 ng /ml among the supplementing doses tested in the present study (p<0.05). Addition of PDGF without insulin to a SOFM could not increase embrye development, but combined addition of PDGF with insulin significantly increased (p<0.05) embryo development to hatching blastocyst (50%) compared with control (38%). In conclusion, insulin and PDGF supplemented to a SOFM may act synergistically and have beneficial effect on in vitro development of 2- to 4-cell bovine embryos matured and fertilized in vitro.
Choe, Yunjeong;Yoo, Ah Young;Kim, Sam Woong;Hwang, Jihwan;Kang, Ho Young
Journal of Life Science
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v.27
no.1
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pp.72-77
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2017
Inorganic iron is essential for various metabolic processes, including RNA synthesis, electron transport, and oxygen detoxification in microorganisms. Many bacterial pathogens compete for iron acquisition in diverse environmental condition such as host. Salmonella Typhimurium SL1344 also requires inorganic iron as a cofactor for growth. When a M9 minimal liquid medium was supplemented with ethylenediamine di-o-hydroxyphenylactic acid (EDDA) which acts as an iron-chelating agent, growth of Salmonella Typhimurium SL1344 in the supplemented medium was completely arrested by deficient of useful iron under iron-depleted condition. However, a number of siderophores, which are small, high-affinity iron chelating compounds secreted by microorganisms such as bacteria and fungi, were produced for utilization of restricted iron under iron-depleted condition. A M9 minimal liquid medium complemented with human transferrin (hTf)-iron complex turned completely off production of siderophores, but growth of Salmonella Typhimurium SL1344 maintained level similar to compare one complemented with iron (III) chloride (FeCl3). This means that human transferrin (hTf)-bound iron can utilize via directly interaction with Salmonella Typhimurium SL1344 without productions of siderophores. Through construction and analysis of negative mutant for utilization of human transferrin (hTf)-bound iron, we confirm that the bacterium can directly use human transferrin (hTf)-bound iron without extracellularly intermediated carriers such as siderophores.
Many secreted proteins have disulfide bonds that are important for their structure and function. Protein disulfide isomerase (PDI, EC 5.3.1.4.), an enzyme that catalyzes the formation and rearrangement of thiol/disulfide exchange reactions, is a resident of the endoplasmic reticulum (ER). The subcellular localization and its function as catalyst of disulfide bond formation in the biosynthesis of secretory and cell membrane proteins suggest that PDI plays a key role in the secretory pathway. We have isolated a cDNA encoding protein disulfide isomerase from Bombyx mori(bPDI). It has been characterized under ER stress conditions (dominantly induced by calcium ionophore A23187, tunicamycin and DTT), which is known to cause an accumulation of unfolded proteins in the ER. Furthermore, It has also been examined for tissue distribution(pronounced at the fat body), hormonal regulation (juvenile hormone, insulin and juvenile +transferrin; however, it is not effected by transferrin alone), and the effect of exogenous bacteria (peak at 16 h after infection) on the bPDI mRNA expression. The results suggest that bPDI is a member of the ER stress protein group, and it may play an important role in exogenous bacterial infection in fat body, and that homones regulate its expression.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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