생체는 산소를 소비하는 대사 과정 중에 초산화물(superoxide, $O_{2}$), 과산화수소($H_2O_2$), 수산 라디칼(OH)과 같은 다양한 활성산소(reactive oxygen)들을 생성하게 되며, 그 중에서도 hydrogen peroxide ($H_2O_2$)는 biological membrane을 자유롭게 통과하며, 세포내에서 hydroxyl radical 등의 반응성이 큰 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)을 발생시키는 작용을 하는 강력한 산화제이다. 세포를 계대 배양 (5, 15, 25, 35 passage)하여 $H_2O_2$를 농도별(100 ${\mu}M$, 500 ${\mu}M$, 1 mM, 5 mM)로 처리하고, 또한 $H_2O_2$의 처리 시간(30 분, 1 시간)을 변화시킴으로써, Hepatoma 세포주에서 $H_2O_2$ 처리에 의한 Cu/Zn SOD의 발현을 Northern blot을 통하여 다음과 같이 분석하였다. 1)Hepatoma 세포주에서 시간별, 농도별로 산화제를 처리 했을 때 각각의 경우에서 발현양의 차이는 적었지만, 오랜 시간동안 고농도의 산화제에 노출시켰을 때 항산화 능력이 증가한다는 것을 확인할 수 있었다. 2)계대배양을 증가시키는 것은 노화가 진행된다는 것을 의미하므로, 산화제를 처리했을 때 25 passage에서 35 passage 단계에서 항산화 효소의 발현 정도가 급격히 감소되는 것으로 미루어 보아 이 단계에서 노화가 진행되었음을 추측할 수 있었다. 3)동일한 시간과 농도로 처리했을 때 각각의 passage의 발현 level에서 보이는 양상과는 다르게 35 passage에서는 500${\mu}M$이상의 농도를 1 시간동안 노출시켰을 경우에 Cu/Zn SOD가 거의 발현되지 않았으며, 30 분 동안 노출시켰을 때에는 500 ${\mu}M$의 농도까지 방어할 수 있는 능력을 가진 것으로 보인다.
본 연구는 한방 약용자원으로 사용되고 있는 대추의 효능과 생리활성에 대한 연구의 일환으로 대추 열매의 열수 및 에탄올 추출물의 폴리페놀 화합물과 각 추출물의 항산화활성을 측정하였다. 대추 추출물의 수율은 미숙 대추가 가장 낮은 11% 내외의 수율을 보였으며, 완숙 대추가 미숙 대추보다 2배 이상 높은 수율을 보였고, 건조 대추의 열수 및 에탄올 추출물은 각각 55.67, 65.95%이었다. 대추 추출물의 폴리페놀 함량은 열수와 에탄올 추출물 모두 미숙 대추에서 가장 높았다. 전자공여능은 추출물의 농도가 증가함에 따라 높았고, 10.0 mg/mL의 농도에서는 천연 항산화제인 ascorbic acid와 같이 90% 이상의 전자공여능을 보였다. SOD 유사활성능은 농도가 높아질수록 증가 하였으나, 미숙 대추의 열수 추출물에서 다른 추출물에 비해 높은 SOD 유사활성능을 나타내었다. 에탄올 추출물의 SOD 유사활성능은 미숙 대추 추출물의 10 mg/mL의 농도에서는 39.92%의 SOD 유사활성능을 확인되었다. 대추 추출물의 아질산염 소거능은 pH 1.2와 추출물의 1.0 mg/mL의 농도에서 50% 이상의 소거능을 보였으며, 미숙 대추 추출물에서 가장 높았다. Xanthine oxidase 저해 활성은 미숙 대추의 추출물에서 높았으며, 추출물의 농도가 증가할수록 증가하였다. 이상의 결과에서 실험에 사용한 시료인 미숙 대추, 완숙대추, 건조 대추에는 항산화 물질의 대표적인 폴리페놀 물질도 다량 함유하고 있을 뿐만 아니라 대추의 열수 및 에탄올 추출물로서 항산화성도 우수한 것으로 보여 천연항산화제나 기능성 식품 및 다양한 식품개발에 응용될 수 있을 것으로 생각된다.
Objectives : The present study purposed to compare the antioxidant effect, anti inflammatory effect and cancer cell multiplication inhibition effect of Fructificatio Inonoti Obliqui aqueous extract according to extraction temperature. Methods : We medicated animal models, which had experimental oxidation, with Fructificatio Inonoti Obliqui total extract and $50^{\circ}C$ low temperature leachate, and performed hematological analysis and blood chemical analysis with measuring SOD, GSH, catalase, NO and MDA content in the liver. In addition, we made comparative observation of anti inflammatory effect and anti-cancer effect. Results : Compared to the control group, both the group medicated with Fructificatio Inonoti Obliqui total extract and with $50^{\circ}C$ low-temperature leachate were found to decrease the number of thrombocytes in blood plasma and NO content while to increase SOD activity and catalase activity significantly. Both groups also showed anti-inflammatory effect against THP-1 cells and a multiplication inhibition effect against liver cancer cells and stomach cancer cells significantly. Conclusions : Both Fructificatio Inonoti Obliqui total extract and Fructificatio Inonoti Obliqui $50^{\circ}C$ low-temperature leachate have significant antioxidant effect, anti inflammatory effect and anti cancer effect.
In the present work we investigated the effect of regular physical exercise on the activities of erythrocyte antioxidant enzyme, plasma total radical-trapping antioxidant potential(TRAP) and plasma level of lipid peroxidation(malondialdehyde, MDA) in 64 healthy male, aged 34-67 years. The study population were divided in two groups: small amount of exerciser(exercise time less than 10min/d) and moderate amount of exerciser(exercise time more than 20min/d) according to their physical exercise habits measured by a questionnaire. Erythrocyte superoxide dismutase(SOD), glutathione peroxidase(GSH-Px) and catalase(CAT), plasma TRAP, as well as plasma MDA were determined. Erythrocyte GSH-Px and plasma TRAP were higher in moderate amount of exercisers than those in small amount of exercisers by 17% and 26%, respectively. No significant differences were observed in erythrocyte SOD, CAT and plasma MDA between the two groups. Mean exercise time was positively correlated with the erythrocyte GSH-Px activity and plasma TRAP significantly. The results would sugest that regular moderate exercise enhances antioxidant defences against reactive oxygen species and may increase the likelihood of a healthier life span.
Oxidant/antioxidant balance has been suggested as an important factor for initiation and progression of cancer. The objective of this study was to determine changes in the levels of malondialdehyde (MDA), nitric oxide (NO), total cholesterol, triglycerides, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol, total antioxidant capacity (TAC), glutathione peroxidase (GSH-Px), and superoxide dismutase (SOD) activities in serum samples of breast cancer patients (n=30) and healthy subjects (n=100). MDA and NO levels were found to be increased in breast cancer patients compared to the healthy subject group (p<0.05). Total cholesterol and triglycerides were elevated; and HDL-cholesterol level was found to be decreased in the cancer patients as compared to the healthy subjects (p<0.05). Compared to the healthy group, both serum TAC levels (p<0.001) and activity of SOD and GSH-Px (p=0.05) were found to be decreased in the breast cancer patients as compared to the healthy controls. Considering the data presented in this study, we suggest that free radicals induce lipid eroxidation and peroxidation of unsaturated fatty acid with decreased activity of enzymatic antioxidants in breast cancer.
This study was designed to investigate the hyperlipidemia-healing effect of liquid extract from Mageum-tang(麻芩湯), it was performed on the hyperlipidemia of rats induced by high cholesterol diet and Triton WR-1339. We prepared two types of hyperlipidemia model in rats induced by high cholesterol diet and Triton WR-1339. The amount of total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL -cholesterol, triglyceride, phospholipid, free fatty acid, the activity of superoxide dismutase(SOD), and glutathione were measured. The liquid extract from Mageum-tang showed significant decreasing effects on total cholesterol, LDL- cholesterol, triglyceride, phospholipid, free fatty acid in the both model. And it showed significant increasing effects on HDL-cholesterol, the activity of SOD in both model and amount of glutathione in Triton WR-1339 model. These results suggest that liquid extract from Mageum-tang has healing efficacy on hyperlipidemia induced by high cholesterol diet and Triton WR-1339.
The effects of total dietary restriction(100% restriction of energy intake) on thiobarbituric acid reactive substance(TBARS) contents and intracellular antioxidant enzymes activities in the liver and kidney of young male Sprague Dawley rats were studied. The TBARS contents were reduced in both liver and kidney, up to 77% and 79% of the control rats, fed ad libitum, respectively at 7 days after dietary restriction . Superoxide dismutase(SOD) activities in the liver and kidney of rats were increased significantly by total dietary restriction. However, the activity of catalase in kidney was decreased 27% at 6 days after dietary restriction, but this enzyme activity did not change in liver. The changes of glutathione peroxidae(GSHPx) and catalase activities in the liver and kidney of rats with dietary restriction were not significant. These result suggested that dietary restriction reduce the free radical induced by tissue damage, as determined by TBARS content, in both the liver and kidney but the changes of activities of antioxidant enzymes may not be a contributory factor in reducing oxidative damage to tissue.
To obtain the information on antioxidant activity by harvesting parts and time in Cudrania tricuspidata Bureau, total phenolic contents, flavonoid contents, superoxide dismutase (SOD) like activity and 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH) radical scavenging activity of methanol extracts from Cudrania tricuspidata were investigated. Total phenolic contents was the highest in leaf [$30.2{\sim}38.8\;mg/g$ dry weight (DW)] and followed by root bark, stem bark, fruit, root except bark and stem except bark. Among harvesting time, total phenolic contents of leaf was the highest as $38.1{\sim}38.8\;mg/g$ DW in May and June, and then decreased to October. Root bark harvested in April and May contained $26.6{\sim}27.8\;mg/g$ DW total phenolic compounds and total phenolic content fell to a very low values at 1.8 mg/g DW in February. Flavonoid contents was very high in leaf and root bark. Especially, root bark harvested in April had the highest of flavonoid contents as 23.2 mg/g DW. As a result of simple linear regression analysis of total phenolic contents on flavonoid contents according to harvesting parts, it showed a high correlation (p < 0.001) with $0.57{\sim}0.97\;R^2$ (coefficient of determination). As $RC_{50}$ value, that was, the concentration of sample required for 50% reduction of DPPH absorbance, was $13.7{\sim}20.5\;{\mu}g/mL$ in leaf so DPPH radical scavenging activity was very high. But SOD like activity of $1,000\;{\mu}g$ extract/mL MeOH was a low value of $0.3{\sim}9.2%$ in all samples.
Objectives : In order to examine the antioxidant activities of Kyungohkgo(瓊玉膏), the study was done through measurement of parameters such as Thiobarbituric acid reactive substance(TBARS), Superoxide dismutase(SOD), Catalase(CAT), Glutathione peroxidase(GSH-px), Plasma total lipid, Plasma total triglyceride, Plasma total cholesterol, HDL-cholesterol concentrations in rat erythrocytes and plasma. Methods : Sprague-Dawley rats divided into 3 groups, Normal group(l2 weeks old), pathologically induced group(injected D-galatose 50mg/kg, 1time/day for 6 weeks, CONTROL) and Kyungohkgo(瓊玉膏) administered group(D-galactose 50mg/kg and Kyungohkgo extracts 1125.0mg/kg 1time/day for 6 weeks, KOG). Rats were sacrificed and TBARS, SOD, CAT, Plasma total lipid, Plasma triglyceride, Plasma total cholesterol, Plasma HDL-cholesterol concentrations and GSH-px were measured in rat erythrocytes and plasma. Results : Plasma TBARS concentrations of KOG group were significantly lower than those of control. Red blood cell(RBC) SOD activities of KOG group was increased(F=3.619, p=0.052, ANOVA test), and RBC catalase activities of all experimental group were not significantly different. RBC GSH-px activities of KOG group was increased(F=6.844, p=0.008, ANOVA test). The changes of Plasma triglyceride was not significantly different. Plasma total lipid of KOG group showed significant decrease compared to the control group(F=19.337, p=0.0001, ANOVA test). Plasma total cholesterol and HDL-cholesterol concentrations of all experimental groups were not significantly different. Conclusions : According to the above results, it is considered that Kyungohkgo(瓊玉膏) is effective in inhibiting lipid peroxidation and increasing antioxidative enzyme activities in D-galactose induced aging rat.
난소를 절제한 female rat에 Vit C. Vit E, Vit C와 Vit E를 복합적으로 투여했을 때 rat의 간 조직 의 손상 정도 및 항산화 효소 활성을 관찰하기 위해 체중 150$\pm$10g이 되는 female rat에 100mg/kg 함 량의 각 실험 물질들을 이틀에 한 번 두달 간 복강내로 투여한 뒤 간 조직 중 과산화지질량 및 항상화 효소인 SOD, catalase, 총 glutathion 량 및 Glutathion peroxidase의 활성도를 측정함으로써 항산화계의 변화 및 생리 활성 변화를 살펴 보았다. 1. 간, 신장 조직 중의 과산화지질 함량은 노화군(Ovx)이 정상 군(Sham)에 비해 각각 1.78배, 1.61배 증가하였다. 그리고 각 비타민 투여군은 난소를 절제한 군에 비해 과산화질함량이 현저히 감소하였다. 2. 혈청 중 총 cholesterol 량은 노화군(Ovx)이 정상군(Sham)에 비 해 2.57배 높게 나타났다. 각 비타민 투여군은 노화군에 비해 수치가 현저히 감소하였는데, Ovx+Vit C 군의 경우는 94%정도의 억제율을 보였다. HDL-cholesterol은 노화군(Ovx)이 정상군(Sham)에 비해 36.7% 감소하였다. 각 비타민 투여로 HDL-cholesterol 함량이 좋은 수준으로 증가되었고, Ovx+Vit Erns은 노화군보다 2.52배 높게 나타났다. 동맥경화지수도 Ovx+Vit E 군이 아주 낮게 나타났다. 3. 간 조직 중 SOD 활성도는 노화군(Ovx)이 정상군(Sham)보다 5.3배 높게 나타났고, 각 비타민 투여로 free radical 생성이 억제되어 항산화효소인 SOD 활성도를 감소시켰다. 간 조직 중 catalase 활성도는 노화군 (Ovx)이 정상군(Sham)보다 1.58배 정도 높게 나타났는데, 각 비타민 투여로 catalase 활성도가 낮아졌 고, Ovx+Vit E 군은 탁월한 감소 효과를 보였다. 4. 간 조직 중 총 glutathion의 활성도는 정상군 (Sham)이 노화군(Ovx)에 비해 1.22배 정도 높게 나타났고, 각 비타민 투여군 중 Ovx+Vit Erns의 경우 간 조직 중 총 glutathionfid이 가장 높게 나타났다. 간조직 중 reduced-glutathion (GSH)함량과 총 glutathion 량에 대한 oxidized-glutathion (GSSG)의 비율, 또한 Ovx+Vit E 군의 수치가 가장 높게 나 타났다. Vit E가 항산화에 좋은 효과가 있음을 알 수 있었다. 그러나, GPx의 활성 수치는 그 다지 유의 한 변화를 나타내지는 않았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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