Park, Jeong-Woong;Choi, Jae-Young;Hong, Seul A;Kim, Nam Young;Do, Kyoung-Tag;Song, Ki-Duk;Cho, Byung-Wook
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제30권5호
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pp.728-735
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2017
Objective: This study was performed to reveal the molecular structure and expression patterns of horse glutamate-cysteine ligase catalytic subunit (GCLC) and glutamate-cysteine ligase modifier subunit (GCLM) genes whose products form glutamate cysteine ligase, which were identified as differentially expressed genes in the previous study. Methods: We performed bioinformatics analyses, and gene expression assay with quantitative polymerase chain reaction (qPCR) for horse GCLC and GCLM genes in muscle and blood leukocytes of Thoroughbred horses Results: Expression of GCLC showed the same pattern in both blood and muscle tissues after exercise. Expression of GCLC increased in the muscle and blood of Thoroughbreds, suggesting a tissue-specific regulatory mechanism for the expression of GCLC. In addition, expression of the GCLM gene increased after exercise in both the blood and muscle of Thoroughbreds. Conclusion: We established the expression patterns of GCLC and GCLM in the skeletal muscle and blood of Thoroughbred horses in response to exercise. Further study is now warranted to uncover the functional importance of these genes in exercise and recovery in racehorses.
Expansins are cell wall proteins that mediate cell wall loosening and promote specific tissue and organ morphogenesis in plants and in some microorganisms. Unlike plant expansins, the biological functions of fungal expansin-like proteins have rarely been discussed. In the present study, an expansin-like protein-encoding fvexpl1 gene, was identified from Flammulina velutipes by using local BLAST. It consisted of five exons with a total length of 822 bp. The deduced protein FVEXPL1 contained 274 amino acids with a predicted molecular mass and isoelectric point of 28,589 Da and pH 4.93, respectively. The first 19 amino acids from the N terminal are the signal peptide. Phylogenetic analysis and multiple protein alignment indicated FVEXPL1 was an expansin-like protein. The expression level of fvexpl1 gene in the stipe was significantly higher than that in the mycelia, primordia, and cap. However, the expression level of fvexpl1 gene was significantly higher in the fast elongation region of the stipe as compared with the slow elongation region. Expression analysis indicated that fvexpl1 gene might have an auxiliary role in the stipe morphogenesis of F. velutipes.
Hwang, Jae Sam;Yun, Eun Young;Goo, Tae Won;Kim, Iksoo;Choi, Kwang Ho;Seong, Su Il;Kim, Keun Young;Lee, Sang Mong;Kang, Seok Woo
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제9권2호
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pp.167-171
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2004
We constructed an oligo-d(T) primed directional cDNA library from the Bombyx mandarina whole larvae. In an effort to isolate genes expressed in the B. mandarina, 227 expressed sequence tags (ESTs) were generated by single-pass sequencing from the cDNA library. Sequence analysis showed that 107 clones (47.1%) were classified into known genes and 120 clones (52.9%) were novel transcripts, which are unknown for their function. Of the 107 known genes, the most abundant gene was found to be actin and followed by serine protease in the expression profile. Among these clones, a serine protease homolog (BmSP) which is a class of proteolytic enzymes isolated. Full-length sequence of the BmSP cDNA clone was 922 bp in length and has an open reading frame of 276 amino acids. The conserved histidine, aspatic acid and serine residues forming the catalytic center as well as cysteine residues contributing to three disulphide bonds also were found in Bmsp gene. mRNA expression analysis revealed a high and specific expression of the gene only in midgut tissue, suggesting that BmSP gene is closely associated with the expression of digestive enzyme.
Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic autoimmune disorder that is characterized by inflammation of the synovial tissue and deterioration of the joint and bone. A recent study reported a potential gene-environment interaction between HLA-DR and smoking. The present study investigated whether a specific gene was related to the association between smoking and the severity of RA (rheumatoid factor levels > 20 IU/ml). We used the resources of the NARAC family collection of GAW 15 databases, and 1139 subjects with RF>20 IU/ml were included in the current analysis. The linkage panel contained 5858 SNP markers, and 5744 SNPs passed quality control criteria. Linear regression analyses, using PLINK software and generalized estimating equation regression models, were used to test for associations between the SNPs and the severity of RA according to smoking groups. Two major findings were established. First, the severity of RA in smokers was associated with rs703618 (p=$6{\times}10^{-5}$), which lies in the intronic region of the stabilin 2 (STAB2) gene on chromosome 12. Second, there were significant differences in the levels of RF between 'ever smokers' and 'never smokers' according to the rs703618 genotype (G/G, A/G, A/A). We investigated whether a specific gene acts as a mediator between smoking and the severity of RA and found that the STAB2 gene could affect this relationship. Our finding indicates that smoking may mediate RA severity by affecting the expression level of a specific gene.
The shortage of human organs for transplantation has induced the research on the possibility of using animal as porcine. However, pig to human transplantation as known as xeno-transplantation has major problem as immunorejection. Recently, the solutions of pig to human xenotransplantation are commonly mentioned as having a genetically modification which include alpha 1, 3 galatosyl transferase knockout (GTKO) and immune-suppressing gene transgenic model. Unfortunately, the expression level of transgenic gene is very low activity. Therefore, development of gene overexpression system is the most urgent issue. Also, the tissue specific overexpression system is very important. Because most blood vessels are endothelial cells, establishment of the endothelial-specific promoter is attractive candidates for the introduction of suppressing immunorejection. In this study, we focus the ICAM2 promoter which has endothelial-specific regulatory region. To detect the regulatory region of ICAM2 promoter, we cloned 3.7 kb size mini-pig ICAM2 promoter. We conduct serial deletion of 5' flanking region of mini-pig ICAM2 promoter then selected promoter size as 1 kb, 1.5 kb, 2 kb, 2.5 kb, and 3 kb. To analyze promoter activity, luciferase assay system was conducted among these vectors and compare endothelial activity with epithelial cells. The reporter gene assay revealed that ICAM2 promoter has critical activity in endothelial cells (CPAE) and 1 kb size of ICAM2 promoter activity was significantly increased. Taken together, our studies suggest that mini-pig ICMA2 promoter is endothelial cell specific overexpression promoter and among above all size of promoters, 1 kb size promoter is optimal candidate to overcome the vascular immunorejection in pig to human xenotransplantation.
Seo, Hee-Jung;Lee, Seong-Kyu;Baik, Haing-Woon;Cheon, Yong-Pil;Chun, Tae-Hoon;Choi, In-Ho;Lee, Ki-Ho
Journal of Animal Science and Technology
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제53권3호
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pp.195-202
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2011
Maintenance of adequate telomere length in developing cells is the most important concern to preserve the integrity of the genome. The length of telomere is strictly regulated by numerous telomere-binding proteins and/or interacting factors. Even though the expression of telomerase in the male reproductive tract has been characterized, developmental expressional profiling of telomerase and other telomere-associated proteins has not been determined in detail. The present study was attempted to examine expression patterns of catalytic subunit (Tert) and RNA component (Terc) of telomerase and two telomerase associated factors, telomerase associated protein 1 (Tep1) and TERF1 (TRF1) interacting nuclear factor 2 (Tinf2) in the testis and seminal vesicle of male rat during postnatal development. The real-time PCR analysis was utilized to quantify mRNA expression of molecules. The abundance of Tep1 mRNA in the testis and seminal vesicle was the highest at 5 months of age. Expressional fluctuation of Tinf2 during postnatal development was found in the testis, while expression of Tinf2 in the seminal vesicle was gradually increased until 5 months of age and then significantly decreased later. mRNA level of Tert gene in the testis was significantly increased at the adult and the elder, while the highest expression of Tert gene in the seminal vesicle was found at 5 months of age. Expression of Terc transcript in the testis and seminal vesicle was the highest at 5 months of age, followed by significant reduction at 1 and 2 years of ages. Such differential gene expression of telomere-associated factors and telomerase components in different male reproductive tissues during postnatal development indicates that maintenance of telomere length would be regulated in tissue- and/or age-specific manners.
Background: Cancer diagnostic biomarkers have a wide range of applications that include early detection of oral precancerous lesions and oral squamous cell carcinomas, and assessing the metastatic status of lesions. The interferon stimulated ISG15 gene encodes an ubiquitin-like protein, which conjugates to stabilize activation status of associated proteins. Hence a deregulated expression of ISG15 may promote carcinogenesis. Indeed overexpression of ISG15 has been observed in several cancers and hence it has been proposed as a strong candidate cancer diagnostic biomarker. Given the emerging relationship between malignant transformation and ISG15, we sought to examine the expression pattern of this gene in tumor biopsies of oral squamous cell carcinoma (OSCC) tissues collected from Indian patients. Materials and Methods: Total RNA isolated from thirty oral squamous cell carcinoma tissue biopsy samples were subjected to semi-quantitative RT-PCR with ISG15 specific primers to elucidate the expression level. Results: Of the thirty oral squamous cell carcinomas that were analyzed, ISG15 expression was found in twenty four samples (80%). Twelve samples expressed low level of ISG15, six of them expressed moderately, while the rest of them expressed very high level of ISG15. Conclusions: To the best of our knowledge, the results show for the first time an overexpression of ISG15 in up to 80% of oral squamous cell carcinoma tissues collected from Indian patients. Hence ISG15 may be explored for the possibility of use as a high confidence diagnostic biomarker in oral cancers.
To date, there have been no reports on the cloning and characterization of a gene encoding SQS from Amaranthus, although there have been some reports on methods of extracting and purifying squalene from Amaranthus seeds. In this study, we monitored the expression pattern of the amaranth SQS gene in seeds at different developmental stages and in different tissues. The transcript expression pattern of the SQS gene was investigated using total RNA isolated from seeds at different stages of development. There were low levels of SQS transcripts at the early stage of seed development, and the levels remained low until the middle developmental stage. The expression of SQS increased rapidly to reach a peak at the mid-late developmental stage, and then declined dramatically. This pattern of expression was consistent with the results of RT-PCR analyses. All RNA samples generated a fragment of the expected size (183-bp). The amaranth SQS was expressed at low levels during the initial to middle stages of seed development, and its expression level increased at the mid-late development stage. Also The tissue-specific expression of amaranth SQS was determined by quantifying its mRNA in total RNA isolated from the leaves, petioles, stems, and roots of seedlings at the four- and six-leaf stages. Using qRT-PCR and RT-PCR analysis, we detected amaranth SQS transcripts in some of the tissues at the six-leaf stage, but in none of the tissues from plants at the four-leaf stage. SQS transcripts accumulated in almost equal amounts in stems and roots, while a lower level accumulated in leaves and petioles during seedling development at the four- to six-leaf stages. This study provides useful information about the molecular characterization of the SQS clone isolated from grain amaranth. A basic understanding of these characteristics will contribute to further studies on the amaranth SQS.
Kim, Seung-Han;Lee, Dong-Gun;Yoo, Jin-Hong;Park, Su-Mi;Park, Jung-Hyun;Shin, Wan-Shik;Lee, Kyungwon;Dongeun Yong;Lee, Wee-Gyo
Journal of Microbiology
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제42권2호
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pp.143-146
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2004
Vancomycin-resistant Enterococcus faecium (VREFM) is becoming a threatening pathogen. We identified a gene called DD1.5K by differential display-PCR, which was preferentially expressed in the bloodstream isolates of VREFM. Due to its amino acid similarity to transfer complex protein, trsE, and tissue-specific expression, this gene may be involved in virulence of VREFM.
배추는 배추속 식물의 A genome을 대표하는 모델로서 다양한 배추과 작물의 유전학 및 유전체학과 육종연구의 기반이 되는 중요한 작물이다. 최근 들어 배추 유전체 해독이 완료됨에 따라 유전체의 기능 연구가 보다 활발히 진행될 것으로 기대된다. 유전체 정보로부터 유전자의 구조를 예측하고, 기능을 분석하여 프로모터를 포함한 유용 유전자를 개발하기 위한 필수 재료로 이용되는 것이 다양한 조직 또는 실험 처리로부터 생성된 발현 유전자 데이터이다. 2011년 7월 현재 공공 데이터베이스에는 39개의 cDNA library로부터 분석된 147,217개의 배추 발현유전자가 보고되어 있다. 그러나 이들 발현 유전자들은 체계적으로 분석되거나 데이터베이스 형태로 정리되어 있지 않기 때문에 연구자들이 유전자 서열로부터 유용한 정보를 추출하여 사용하기 어려운 문제점이 있다. 따라서 해독 완료된 배추 유전체와 함께 발현 유전자 정보를 보다 잘 활용하기 위하여 배추의 조직 특이적 발현유전자 데이터베이스인 BrTED를 개발하였다. 데이터베이스는 EST 서열 처리-정보 검색 단위와 조직특이성 발현 특성 분석 단위로 이루어져 있으며, 각 정보들은 상호 연결되어 유기적인 검색 환경을 제공하게 하였다. BrTED는 23,962개의 단일 조합 유전자서열을 포함하고 있으며, 각 서열들의 유전자 주석과 암호화하고 있는 단백질의 기능을 동시에 제공한다. 또한 각 단일 조합 유전자서열들의 조직별 발현 특이성을 통계 분석을 통해 조사하여 연구자의 검색 기준에 따라 제공한다. BrTED의 실효성을 검증하기 위하여 데이터베이스를 통해 조직 특이적 발현 유전자 29개를 선발하고, 이들의 발현 특성을 RT-PCR로 확인한 결과, 선발한 유전자 모두 목표한 조직에서 특이적이거나 강한 발현을 보였다. BrTED는 조직 특이적 발현유전자를 신속하게 선발할 수 있는 공공 데이터베이스로서 배추의 기능 유전체 연구뿐만 아니라 근연 배추속 작물의 유전학과 유전체학 연구에 유용한 공공 연구 자원으로 이용될 수 있을 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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