Kim, Tae Kyun;Park, Ji Young;Bae, Jun Ho;Choi, Jae Woong;Ryu, Sung Kee;Kim, Min-Jung;Kim, Jun Bong;Sohn, Jang Won
Journal of Yeungnam Medical Science
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제31권1호
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pp.28-32
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2014
Pulmonary thromboembolism (PTE) increases the pressure of the right ventricle and leads to symptoms and signs, such as dyspnea and hypoxia. If PTE causes hemodynamic instability, thrombolytic therapy should be considered. A mechanical thrombectomy is an alternative treatment to thrombolytic therapy and should be considered when thrombolytic therapy is contraindicated. Various devices are used in mechanical maceration and catheter-directed thrombolysis, but there is no standard mechanical device for PTE as yet. We report here on 2 clinical experiences of mechanical thrombectomy using the Arrow-Trerotola percutaneous thrombolytic device to remove residual clots after systemic thrombolysis in patients with massive PTE.
Prosthetic valve thrombosis is rare but it is one of fatal complication after heart valve surgery. Improvements of the valve design and the material have decreased the frequency of thrombosis but have not eliminated completely. And some cases of prosthetic valve thrombosis during pregnancy were reported inspite of adequate anticoagulation therapy.Urgent surgical intervention is indicated for prosthetic valve thrombosis but it is associated with high operative risk, therefore medical thrombolytic therapy such as urokinase or streptokinase therapy is regarded as an alternative therapy. This is a case report of the successful thrombolytic therapy for valve thrombosis in a pregnant patient after mechanical mitral valve replacement.
Based on their respective antitumor and thrombolytic activities, the superantigen staphylococcal enterotoxin C2 (SEC2) and staphylokinase (Sak) were chosen for the construction of the novel chimeric proteins Sak-linker-SEC2 and SEC2-linker-Sak using a linker composed of nine Ala residues. Both chimeric proteins possessed nearly the same PBMC proliferation stimulating activity and antitumor activity as SEC2 and thrombolytic activity as Sak. Neither the SEC2 or Sak component of each chimeric protein affected the activity of the other component. The results presented in this study provide a possible strategy to prevent and cure tumor thrombus.
Kim, Hye Jin;Shim, Kyou Hee;Yeon, Seung Ju;Shin, Hwa Sung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권2호
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pp.275-283
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2018
Ischemic stroke can result from blockage of blood vessels, forming fibrin clots in the body and causing irreparable brain damage. Remedial thrombolytic agents or anticoagulants have been studied; however, because the FDA-approved tissue plasminogen activator has low efficacy and side effects, it is necessary to develop safer and more effective treatment candidates. This study aimed at assessing the fibrinolytic and anticoagulation features of a novel serine protease extracted and purified from Diopatra sugokai, a polychaeta that inhabits tidal flats. The purified serine protease was obtained through ammonium sulfate precipitation, affinity chromatography, and ion-exchange chromatography. Its molecular size was identified via SDS-PAGE. To characterize its enzymatic activities, the protease activity at various pH and temperatures, and in the presence of various inhibitors, was measured via azocasein assay. Its fibrinolytic activity and anticoagulant effect were assessed by fibrin zymography, fibrin plate assay, and fibrinogenolytic activity assays. The novel 38 kDa serine protease had strong indirect thrombolytic activity rather than direct activity over broad pH (4-10) and temperature ($37^{\circ}C-70^{\circ}C$) ranges. In addition, the novel serine protease exhibited anticoagulant activity by degrading the ${\alpha}$-, ${\beta}$-, and ${\gamma}$-chains of fibrinogen. In addition, it did not produce cytotoxicity in endothelial cells. Therefore, this newly isolated serine protease is worthy of further investigation as a novel alkaline serine protease for thrombolytic therapy against brain ischemia.
1. Objectives This study was performed to find the activities and characteristics of purified thrombolytic enzymes from Holotrichia extracts. 2. Methods In the first time, a coarse enzyme fluid was made by using the freedried Holotrichia extracts. After manufacturing total soluble proteins and purifing enzymes, it was evauluated the activities and characteristics of this enzyme's dissolving capability to fibrin and thrombus. This study was taken using azocasein assay, fibrin-plate method, native-PAGE and fibrin zymography. 3. Results A soluble proteins were efficiently extracted form freezedried Holotrichia extracts. And, this purified enzyme had a ten times fibrinolytic capability compare with ustulation Holotrichia sample. In native PAGE and fibrin zymography, Holotrichia extracts showed the respectable fibrinolytic activity. Also, It had higher thrombolytic activities compared with general thrombolytic enzyme 'plasmin'. In experiment of various protease inhibitors of the purified enzyme from Holotrichia extracts on the azocaseinolytic activity, the enzyme was strongly inhibited by EDTA ${\cdot}$ EGTA, and weakly by APMSF ${\cdot}$ PMSF ${\cdot}$ TPCK. 4. Conclusion Holotrichia extracts has the thrombolytic activities, and it will operate directly th fibrin-clot and thrombus.
To evaluate the thrombolytic activity of streptokinase-dextran conjugate, a rat model of arterial thrombosis was used. Briefly, the femoral artery was exposed and a filter paper saturated with 70% $FeCl_3$ solution was placed around the femoral artery in order to stop the blood flow. Six minutes after the stop of the blood flow in the femoral artery, streptokinase $(10000{\sim}30000\;units\;per\;rat)$ or streptokinase-dextran conjugate $(5000{\sim}17000\;units\;per\;rat)$ was administered by i.v. bolus injection through the femoral vein. Then the blood flow in the femoral artery was monitored using a Doppler laser flow meter. The i.v. bolus administration of streptokinase could not restore the blood flow in the femoral artery in the dose range of $10000{\sim}30000$ units per rat. The i.v. bolus administration of streptokinase-dextran conjugate could restore the blood flow in the femoral artery in the dose range of $5000{\sim}17000$ units per rat. A good correlation between the dose of streptokinase-dextran conjugate and the total thrombolytic effect was observed. In addition, the lag time between the injection of streptokinase-dextran conjugate and the restoring of the blood flow was decreased as the i.v. dose of streptokinase dextran conjugate increased. These results show the superior beneficial effect of streptokinase-dextran conjugate compared with the unconjugated streptokinase with respect to the elongation of thrombolytic activity, the administration method (single injection versus continuous infusion), and the reduced dose necessary for a equivalent thrombolytic effect.
Frias, Jorge;Toubarro, Duarte;Fraga, Alexandra;Botelho, Claudia;Teixeira, Jose;Pedrosa, Jorge;Simoes, Nelson
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제31권2호
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pp.327-337
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2021
Fibrinolytic enzymes with a direct mechanism of action and safer properties are currently requested for thrombolytic therapy. This paper reports on a new enzyme capable of degrading blood clots directly without impairing blood coagulation. This enzyme is also non-cytotoxic and constitutes an alternative to other thrombolytic enzymes known to cause undesired side effects. Twenty-four Bacillus isolates were screened for production of fibrinolytic enzymes using a fibrin agar plate. Based on produced activity, isolate S127e was selected and identified as B. subtilis using the 16S rDNA gene sequence. This strain is of biotechnological interest for producing high fibrinolytic yield and consequently has potential in the industrial field. The purified fibrinolytic enzyme has a molecular mass of 27.3 kDa, a predicted pI of 6.6, and a maximal affinity for Ala-Ala-Pro-Phe. This enzyme was almost completely inhibited by chymostatin with optimal activity at 48℃ and pH 7. Specific subtilisin features were found in the gene sequence, indicating that this enzyme belongs to the BPN group of the S8 subtilisin family and was assigned as AprE127. This subtilisin increased thromboplastin time by 3.7% (37.6 to 39 s) and prothrombin time by 3.2% (12.6 to 13 s), both within normal ranges. In a whole blood euglobulin assay, this enzyme did not impair coagulation but reduced lysis time significantly. Moreover, in an in vitro assay, AprE127 completely dissolved a thrombus of about 1 cc within 50 min and, in vivo, reduced a thrombus prompted in a rat tail by 11.4% in 24 h compared to non-treated animals.
Rahman, M. Saifur;Uddin, M. Gias;Alam, M. Badrul;Yoo, Jin Cheol
통합자연과학논문집
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제7권3호
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pp.173-182
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2014
To simplify the different biological investigation of the methanolic extract and solvent-solvent partitioning of Lablab purpures (L. purpures) bark. In-vitro anti-oxidant study was determined using total DPPH radical scavenging assay. In vitro antimicrobial study was measured by observing zone of inhibition. The cytotoxic activity was studied using brine shrimp lethality bioassay and thrombolytic activity by clot disruption method. The antioxidant potential was evaluated by 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and Folin-Ciocalteau reagents using butylated hydroxytolune (BHT) and ascorbic acid as standards. The Aqueous soluble fraction revealed the highest free radical scavenging activity ($IC_{50}=48.76{\mu}g/mL$). The antimicrobial screening of the bark of L. purpures exhibited mild to moderate activity in test microorganisms. The CSF showed the maximum relative percentage inhibition against Salmonella parathyphi (34.2%) for bacteria and C. albicans (28.8%) for fungi whereas, lowest relative percentage inhibition against Sarcina lutea (22.0%) for bacteria and Aspergillus niger (24.4%) for fungi. In the brine shrimp lethality bioassay, The $LC_{50}$ values of Carbon tetrachloride and N-Hexane soluble fraction were found $92.18{\mu}g/mL$, and $68.95{\mu}g/mL$ respectively while the $LC_{50}$ values of standard Vincristine sulphate was $1.37{\mu}g/mL$. The methanolic extract and its organic soluble fractions of Lablab purpureus at concentration 2.0 mg/mL, significantly protected the lysis of erythrocyte membrane induced by hypotonic solution and heat as compared to the standard, acetyl salicylic acid (0.10 mg/mL). The MSF and AQSF produced 61.48 % and 53.75% inhibition of hemolysis of RBC caused by hypotonic solution respectively, whereas acetyl salicylic acid (0.10 mg/mL) showed 76.42%. Ethanol extract of L. purpures and all of its different partitions exhibited moderate thrombolytic activity of 37.25%-2.40%. Very good preliminary screening and simplified experiments were able to show the different biological activity of methanolic extract and its soluble fractions of L. purpures at a time.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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