Hamounpeima, Ismael;Hosseini, Mahmoud;Mohebbati, Reza;Shafei, Mohammad Naser
대한약침학회지
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제22권3호
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pp.160-165
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2019
Objectives: The aim of this study was to evaluate the effect of Ribes khorasanicum (R. khorasanicum); a plant growing in north Khorasan of Iran; on cardiovascular and stress oxidative in acute hypertension induced by N-nitro-l-arginine methyl ester (L-NAME), anitric oxide synthase inhibitor. Methods: Rats were divided into Control, L-NAME (10 mg/kg), Sodium Nitroprusside (SNP) (50 mg/kg) + L-NAME and three treated groups with R. khorasanicum (4, 12 and 24 mg/kg) groups + L-NAME. L-NAME and SNP were injected intravenously and extract intraperitoneal. In R. khorasanicum groups, L-NAME was injected 30 min after injection of the extract. Systolic blood pressure (SBP), mean arterial pressure (MAP) and heart rate (HR) were recorded continuously using power lab software. At the end of study oxidative stress parameters including of total thiol content (SH), malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) in heart and aorta of all groups were also measured. Results: In groups 4 and 24 mg/kg extract +L-NAME, there was a non-significant decrease in SBP and MAP compared to L-NAME group but dose 12 mg/kg significantly attenuate the effect of L-NAME(P < 0.05). In L-NAME group the heart and aorta tissues antioxidant enzymes levels decreased, while in treated rats these enzymes significantly increased. Conclusion: The extract of R. khorasanicum in dose 12 mg/kg show anti-hypertensive effect that is mediated by an effect on NO system or antioxidant parameters.
Wee, Chan Woo;Kim, Jin Ho;Kim, Hak Jae;Kang, Hyun-Cheol;Suh, Soo Youn;Shin, Beom Soo;Ma, Eunsook;Kim, Il Han
Journal of Radiation Protection and Research
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제44권1호
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pp.15-25
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2019
Background: Psammaplin A (PsA) is a radiosensitizer whereas its clinical application is hampered by poor bioavailability. This study aimed to synthesize novel radiosensitizers using PsA as the lead compound. Materials and Methods: Eight homodimeric disulfides were synthesized from corresponding acid and cystamine dihydrochloride in N-hydroxysuccinimide and dicyclohexylcarbodiimide coupling conditions. One monomeric thiol analog was obtained by reduction of homodimeric disulfide with dithiothreitol. Clonogenic assay was used to measure cell survival after irradiation and drug treatment in human lung cancer (A549) and glioblastoma (U373MG) cells. Results and Discussion: Using the PsA backbone, nine compounds were synthesized. Eight compounds showed variable cytotoxicity with 50% inhibitory concentrations ranging $16.14{\mu}M$ to $150.10{\mu}M$ (A549), and $13.25{\mu}M$ to $50.15{\mu}M$ (U373MG). Four and six compounds radiosensitized A549 and U373MG cells, respectively. Two compounds that radiosensitized both cell lines were tested for its inhibitory effects on DNMT1. One of them was shown to significantly inhibit DNMT1 activity. Conclusion: Novel compounds with radiosensitizing activity were synthesized. These compounds have a great potential to serve as a basis for the development of future radiosensitizers. Further investigation is warranted for their clinical application.
The approximate rates, stoichiometries and products of the reaction of potassium triethylborohydride $(KEt_3BH)$ with selected organic compounds containing representative functional groups under the standard condition $(0^{\circ}C,$ THF) were examined in order to explore the reducing characteristics of this reagent as a selective reducing agent. Primary alcohols, phenols and thiols evolve hydrogen rapidly whereas secondary and tertiary alcohols evolve very slowly. n-Hexylamine is inert to this reagent. Aldehydes and ketones are reduced rapidly and quantitatively to the corresponding alcohols. Reduction of noncamphor gives 3% exo- and 97% endo-norboneol. Anthraquinone is cleanly reduced to 9,10-dihydro-9,10-dihydroxyanthracene stage. Carboxylic acids liberate hydrogen rapidly and quantitatively but further reduction does not occur. Anhydrides utilize 2 equiv of hydride to give an equimolar mixture of acid and alcohol. Acid chlorides, esters and lactones are rapidly and quantitatively reduced to the corresponding alcohols. Epoxides are reduced at moderate rates with Markovnikov ring opening to give the more substituted alcohols. Primary amides liberate 1 equiv of hydrogen rapidly. Further reduction of caproamide is slow whereas benzamide is not reduced. Tertiary amides are reduced slowly. Benzonitrile utilizes 2 equiv of hydride in 3 h to go to the amine stage whereas capronitrile takes only 1 equiv. The reaction of nitro compounds undergo rapidly whereas azobenzene and azoxybenzene are reduced slowly. Cyclohexanone oxime rapidly evolves hydrogen without reduction. Phenyl isocyanate utilizes 1 equiv of hydride to proceed to formanilide stage. Pyridine N-oxide and pyridine is reduced rapidly. Disulfides are rapidly reduced to the thiol stage whereas sulfoxide, sulfonic acid are practically inert to this reagent. Sulfones and cyclohexyl tosylate are slowly reduced. Octyl bromide is reduced rapidly but octyl chloride and cyclohexyl bromide are reduced slowly.
Lipase from Candida rugosa was immobilized on $MgO{\cdot}SiO_2$ hybrid grafted with amine, thiol, cyano, phenyl, epoxy and carbonyl groups. The products were analyzed using Fourier transform infrared spectroscopy, nuclear magnetic resonance, low-temperature $N_2$ sorption and elemental analysis. Additionally, the degree of coverage of the oxide material surface with different functional groups and the number of surface functional groups were estimated. The Bradford method was used to determine the quantity of immobilized enzyme. The largest quantity of enzyme (25-28 mg/g) was immobilized on the hybrid functionalized with amine and carbonyl groups. On the basis of hydrolysis reaction of p-nitrophenyl palmitate to p-nitrophenol, it was determined how the catalytic activity of the obtained biocatalysts is affected by pH, temperature, storage time, and repeated reaction cycles. The best results for catalytic activity were obtained for the lipase immobilized on $MgO{\cdot}SiO_2$ hybrids with amine and carbonyl groups. The biocatalytic system demonstrated activity above 40% in the pH range 4-10 and in the temperature range $30-70^{\circ}C$. Lipase immobilized on the $MgO{\cdot}SiO_2$ systems with amine and epoxy groups retains, respectively, around 80% and 60% of its initial activity after 30 days of storage, and approximately 60-70% after 10 reaction cycles.
To identify the effect and mechanism of carbon monoxide (CO) on delayed rectifier K+ currents (IK) of human cardiac fibroblasts (HCFs), we used the wholecell mode patch-clamp technique. Application of CO delivered by carbon monoxidereleasing molecule-3 (CORM3) increased the amplitude of outward K+ currents, and diphenyl phosphine oxide-1 (a specific IK blocker) inhibited the currents. CORM3-induced augmentation was blocked by pretreatment with nitric oxide synthase blockers (L-NG-monomethyl arginine citrate and L-NG-nitro arginine methyl ester). Pretreatment with KT5823 (a protein kinas G blocker), 1H-[1,-2,-4] oxadiazolo-[4,-3-a] quinoxalin-1-on (ODQ, a soluble guanylate cyclase blocker), KT5720 (a protein kinase A blocker), and SQ22536 (an adenylate cyclase blocker) blocked the CORM3 stimulating effect on IK. In addition, pretreatment with SB239063 (a p38 mitogen-activated protein kinase [MAPK] blocker) and PD98059 (a p44/42 MAPK blocker) also blocked the CORM3's effect on the currents. When testing the involvement of S-nitrosylation, pretreatment of N-ethylmaleimide (a thiol-alkylating reagent) blocked CO-induced IK activation and DL-dithiothreitol (a reducing agent) reversed this effect. Pretreatment with 5,10,15,20-tetrakis(1-methylpyridinium-4-yl)-21H,23H porphyrin manganese (III) pentachloride and manganese (III) tetrakis (4-benzoic acid) porphyrin chloride (superoxide dismutase mimetics), diphenyleneiodonium chloride (an NADPH oxidase blocker), or allopurinol (a xanthine oxidase blocker) also inhibited CO-induced IK activation. These results suggest that CO enhances IK in HCFs through the nitric oxide, phosphorylation by protein kinase G, protein kinase A, and MAPK, S-nitrosylation and reduction/oxidation (redox) signaling pathways.
Seung-Hwan Hong;Kun-Ho Seo;Sung Ho Yoon;Soo-Ki Kim;Jungwhan Chon
한국축산식품학회지
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제43권1호
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pp.73-84
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2023
Campylobacteriosis is a common cause of gastrointestinal disease. In this study, we suggest a general strategy of applying gold nanoparticles (AuNPs) in colorimetric biosensors to detect Campylobacter in chicken carcass. Polymerase chain reaction (PCR) was utilized for the amplification of the target genes, and the thiolated PCR products were collected. Following the blending of colloid AuNPs with PCR products, the thiol bound to the surface of AuNPs, forming AuNP-PCR products. The PCR products had a sufficient negative charge, which enabled AuNPs to maintain a dispersed formation under electrostatic repulsion. This platform presented a color change as AuNPs aggregate. It did not need additional time and optimization of pH for PCR amplicons to adhere to the AuNPs. The specificity of AuNPs of modified primer pairs for mapA from Campylobacter jejuni and ceuE from Campylobacter coli was activated perfectly (C. jejuni, p-value: 0.0085; C. coli, p-value: 0.0239) when compared to Salmonella Enteritidis and Escherichia coli as non-Campylobacter species. Likewise, C. jejuni was successfully detected from artificially contaminated chicken carcass samples. According to the sensitivity test, at least 15 ng/μL of Campylobacter PCR products or 1×103 CFU/mL of cells in the broth was needed for the detection using the optical method.
Protease is a widely used enzyme particularly in the detergent industry. In this research, we aimed to isolate alkaline protease-producing bacteria for characterization as a laundry detergent additive. The screening of alkaline protease production was investigated on basal medium agar plus 1% skim milk at pH 11, with incubation at 30℃. The highest alkaline protease-producing bacterium was 6BS15-4 strain, identified as Bacillus gibsonii by 16S rRNA gene sequencing. While the optimum pH was 12.0, the strain was stable at pH range 7.0-12.0 when incubated at 45℃ for 60 min. The alkaline protease produced by B. gibsonii 6BS15-4 using dairy effluent was characterized. The optimum temperature was 60℃ and the enzyme was stable at 55℃ when incubated at pH 11.0 for 60 min. Metal ions K+, Mg2+, Cu2+, Na+, and Zn2+ exhibited a slightly stimulatory effect on enzyme activity. The enzyme retained over 80% of its activity in the presence of Ca2+, Ba2+, and Mn2+. Thiol reagent and ethylenediaminetetraacetic acid did not inhibit the enzyme activity, whereas phenylmethylsulfonyl fluoride significantly inhibited the protease activity. The alkaline protease from B. gibsonii 6BS15-4 demonstrated efficiency in blood stain removal and could therefore be used as a detergent additive, with potential for various other industrial applications.
Thioredoxin (TRX) protein is an antioxidant responsible for reducing other proteins by exchanging cysteine thiol-disulfide and is also known for its anti-allergic and anti-aging properties. On the other hand, epidermal growth factor (EGF) is an important material used in the cosmetics industry and an essential protein necessary for dermal wound healing facilitated by the proliferation and migration of keratinocytes. EGF also assists in the formation of granulation tissues and stimulates the motility of fibroblasts. Hence, genetically modified soybeans were developed to overexpress these industrially important proteins for mass production. A single-dose oral-toxicity-based study was conducted to evaluate the potential toxic effects of TRX and EGF proteins, as safety assessments are necessary for the commercial use of seed-specific protein-expressing transgenic soybeans. To achieve this rationale, TRX and EGF proteins were mass purified from recombinant E. coli. The single-dose oral-toxicity tests of the TRX and EGF proteins were carried out in six-week old male and female Institute of Cancer Research (ICR) mice. The initial evaluation of the single-dose TRF and EGF treatments was based on monitoring the toxicity signatures and mortality rates among the mice, and the resultant mortality rates did not show any specific clinical symptoms related to the proteins. Furthermore, no significant differences were observed in the weights between the treatment and control groups of male and female ICR mice. After 14 days of treatment, no differences were observed in the autopsy reports between the various treatment and control groups. These results suggest that the minimum lethal dose of TRX and EGF proteins is higher than the allowed 2,000 mg·kg-1 limit.
본 연구에서는 환경오염을 발생시키는 위험한 중금속 물질들인 카드뮴과 납의 검출 능력을 향상시키기 위해, 순수한 탄소나노튜브(p-CNT) 전극 및 티올화된 탄소나노튜브(t-CNT) 전극을 이용하여 카드뮴과 납 금속의 민감도를 평가하였다. 또한, 두 금속이 동시에 포함되어 있을 때의 상호작용 반응기작을 분석하였다. 이를 위해, 네모파 벗김전압전류법이 이용되었는데, 두 CNT 전극에서 모두 네모파 벗김전압전류법의 최적조건으로, 30 Hz의 주파수, -1.2 V vs. Ag/AgCl의 석출전위 및 300 s의 석출시간이 결정되었다. 민감도 측면에서 카드뮴과 납 모두 t-CNT 전극에서 p-CNT 전극보다 더 좋은 결과를 얻었다. 두 금속의 센서민감도를 각각 측정하였을 때, 카드뮴의 경우 p-CNT 및 t-CNT 전극에서 $3.1{\mu}A/{\mu}M$ 및 $4.6{\mu}A/{\mu}M$의 센서 민감도를 보였고, 납의 경우 p-CNT 및 t-CNT 전극에서 $6.5{\mu}A/{\mu}M$ 및 $9.9{\mu}A/{\mu}M$였다. p-CNT 전극에서 t-CNT 전극보다 센서민감도가 좋은 이유는, CNT에 티올기를 적용시키면서 금속이온의 반응속도가 증가되기 때문이다. 두 금속을 동시에 넣고 민감도를 측정할 경우, 전극에 관계없이 납의 센서민감도가 카드뮴의 센서 민감도보다 우수하였다. 납과 카드뮴 중 납의 센서 민감도가 우수한 이유는 납의 표준전극전위가 낮아 산화반응성이 우수하여 카드뮴보다 더 먼저 전극위에 석출되어, 벗김반응시에 표면에서 떨어져 나가기 쉽기 때문이다.
소음인(少陰人) 십이미관중탕(十二味寬中湯)과 오수유부자이중탕(吳茱萸附子理中湯)의 항산화(抗酸化) 효능(效能)을 검증(檢證)하기 위해, 약재(藥材)의 항산화력(抗酸化力)을 측정(測定)하였으며, 흰쥐에 투여(投與)하여 뇌(腦)와 간(肝) 조직(組織)의 항산화력(抗酸化力) 증강(增强) 효과(效果)를 실험(實驗)한 결과 유의성(有意性) 있는 성적(成績)을 얻었기에 보고(報告)하는 바이다. 십이미관중탕(十二味寬中湯)과 오수유부자이중탕(吳茱萸附子理中湯)의 화학적(化學的) 항산화력(抗酸化力)을 검증(檢證)한 결과(結果) 비교적 높은 항산화(抗酸化) 활성(活性)을 보여주었다. HepG2 세포주(細胞株)와 적혈구(赤血球)를 이용한 항산화력(抗酸化力) 검증(檢證)에서도 높은 활성(活性)을 보여주었으며. 특히 십이미관중탕(十二味寬中湯)은 강한 수용성 항산화력제(抗酸化劑))로 알려진 vitamin C와 유사한 결과를 보였다. 실험용(實驗用) 흰쥐에게 탕제(湯劑) 추출물(抽出物)을 4주간(週間) 투여(投與)한 뒤 체중증가량(體重增加量)과 GOT 활성(活性)을 측정(測定)한 결과 탕제(湯劑) 비투여군(非投與群)과 유의적(有意的) 차이(差異)를 보이지 않아 탕제(湯劑) 투여(投與)에 의한 독성(毒性)은 없는 것으로 사료(思料)된다. 활성산소(活性酸素) 발생제(發生劑)인 2.2'-azobis(amidinopropane) dihydrochloride (AAPH)로 산화적(酸化的) 손상(損傷)을 유발(誘發)한 실험용(實驗用) 흰쥐에서 십이미관중탕(十二味寬中湯) 투여군(投與群)은 혈장(血漿) 총항산화력(總抗酸化力), 혈장(血漿) 지질과산화(脂質過酸化)가 억제(抑制)되었으며, 혈장(血漿) thiol 그룹의 감소(減少)도 억제(抑制)되었으나. 오수유부자이중탕(吳茱萸附子理中湯) 투여군(投與群)에서는 유의적(有意的) 차이(差異)가 나타나지 않았다. 십이미관중탕(十二味寬中湯) 투여군(投與群)은 간(肝) 및 뇌조직(腦組織)에서 AAPH로 유도(誘導)된 산화적(酸化的) 손상(損傷)을 유의적(有意的)으로 억제(抑制)하였으며, 체내(體內) 중요(重要) 항산화(抗酸化) 물질(物質)인 glutathione을 보호(保護)하여 체내(體內) 항산화(抗酸化) 능력(能力)을 증진(增進)시킨 것으로 사료(思料)된다. 오수유부자이중탕(吳茱萸附子理中湯) 투여군(投與群)은 제한적(制限的)인 효과(效果)만을 보였다. 십이미관중탕(十二味寬中湯)은 항산화(抗酸化) 효과(效果)가 높은 처방(處方)으로 볼 수 있는 바 임상(臨床)에서 노화방지(老化防止)에 널리 활용(活用)될 수 있을 것으로 사료(思料)된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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