어병 세균으로부터 분리된 R-plasmid의 특성과 그 DNA 구조는 Aeromonas hydrophila, A. salmonicida, Edwardsiella tarda, Enterococcus seriolicida, Pasteurella piscicida, Vibrio onguillarum등 세균의 종류에 따라 다르다. 그러나 A. hydrophila와 E. tarda로부터 그리고 A. hydrophila와 A. salmonicida로부터 분리된 몇몇 R-plasmid는 같은 내성형을 가지면서 유사한 DNA 구조를 보였다, V. anguillarum에서 분리된 R-plasmid는 1977년 이전, 1980년과 1983년 사이 그리고 1989년과 1991년 사이에 분리된 것이 그 DNA 구조에 차이를 보여 각각 그룹 1, 2, 3으로 구분되어졌다. P. piscicida의 경우에는 연도와 지역에 관계없이 동일한 DNA 구조를 갖는 R-plasmid가 분리되었다. Macrolide계 항생제(MLs), lincomycin(LM), tetracycline(TC) 그리고 MLs, LIM, chloramphenicol(CP) 내성을 나타내는 R-plasmid를 갖는 E. seriolicida가 각 지역의 Yellowtail 어장에 분포되어 있었다. P. piscicida의 R-plasmid에는 type I의 chloramphenicol acetyltransferase(CAT)에 의하여 CP 내성을 나타내는 유전자(cat)가, 그리고 E. tarda, A. salmonicida와 1980년 이후에 분리된 V. anguillarum의 R-plasmid에는 CAT type II에 해당하는 car 유전자가 분포되어 있었다. TC 내성 유전자(tet)의 경우에는 1977년 이전과 1980년 이후에 분리된 V. anguillarum으로부터 class B, G의 tet 유전자가 확인되었으나, E. tarda, P. piscicida, A. hydrophila 그리고 1989년 이후에 분리된 V. anguillarum등 어병세균의 R-plasmid에는 class D의 tet 유전자가 널리 분포하고 있는 것으로 나타났다.
모유에 존재하는 유지방구의 막을 구성하는 주된 당단백질인 하나인 lactadherin(과거에는 BA46로 일컬어짐)은 rotavirus에 의한 감염증상을 예방하는 것으로 보고되고 있다. 본 연구에서는 retrovirus vector system을 이용하여 Chinese Hamster Ovary (CHO) 세포에 tetracycline에 의해 발현이 제어되는 promoter 하의 lactadherin 유전자를 전이 시킨 후 lactadherin이 tetracycline에 의해 발현이 유도되는지의 여부를 실험하였다. 먼저 기초 실험으로 대장균의 LacZ 유전자를 이용하여 tetracycline에 의한 유도 여부를 시험하였다. RevTet-On과 RevTRE-LacZ retrovirus를 동시감염시킨 NIH3T3는 doxycycline (tetracycline 유도체)에 의해 투여량에 비례하여 반응정도가 증가하는 양상을 나타내었으며 최대의 반응은 doxycycline 농도가 1 $\mu\textrm{g}$/ml 이상에서부터 관찰되었다. 이 예비실험의 결과를 바탕으로 RevTet-On과 RevTRE-Ltd retrovirus vectyor를 이용하여 사람의 lactadherin 유전자의 유도적 발현을 검정하였는데 CHO 세포에서 lactadherin 유전자의 유도적 발현을 RT-PCR 기법을 이용하여 확인하였다. 표적세포 내에서 외부에서 도입된 유전자가 지속적으로 발현될 경우 심각한 생리적 부작용을 야기시킨다는 사실을 감안할 때 본 실험의 결과는 유전자 치료와 형질전환동물의 생산에 크게 도움이 될 것으로 예상된다.
In total, 131 Escherichia coli isolates from surface seawater of the Gomso Bay, of Korea, were analyzed for their susceptibility to 22 different antimicrobials and for genes associated with antimicrobial resistance and virulence. According to the disk diffusion susceptibility test, the resistance to tetracycline was most prevalent (33.6%), followed by that to ampicillin (22.1%), ticarcillin (22.1%), and trimethoprim (16.8%). More than 46.6% of the isolates were resistant to at least one antimicrobial, and 22.9% were resistant to three or more classes of antimicrobials; these were consequently defined as multidrug resistant. We further found that 29 ampicillin-resistant isolates possessed genes encoding TEM-type (93.1%) and SHV-type (6.9%) ${\beta}$-lactamases. Among the 44 tetracycline-resistant isolates, tetA and tetC were found in 35 (79.5%) and 19 (43.2%), respectively, whereas tetB was detected in only three isolates (6.8%). With regard to virulence genes, merely 0.8% (n = 1) and 2.3% (n = 3) of the isolates were positive for the enteroaggregative E. coli-associated plasmid (pCVD432) gene and the enteropathogenic E. coli-specific attaching and effacing (eae) gene, respectively. Overall, these results not only provide novel insight into the necessity for seawater sanitation in Gomso Bay, but they help reduce the risk of contamination of antimicrobial-resistant bacteria.
Actinobacillus (A.) pleuropneumoniae is the causative agent of pleuropneumonia which is one of the most important respiratory diseases in pigs worldwide. A total of 32 A. pleuropneumoniae isolates from diseased pigs during 2008 to 2010 were serotyped by polymerase chain reaction method. The susceptibility of the isolates to 13 antimicrobial agents were determined by disk diffusion test. In all the 32 isolates examined in this study, serotype 5 (16 isolates: 50%), 1 (7 isolates: 21.9%), 2 (5 isolates: 15.6%) and 12 (1 isolate: 3.1%) were found. Of all tested antimicrobial agents, resistance to oxytetracycline was found in 96.9% of isolates, followed by resistance to amikacin (81.2%), neomycin (68.7%), kanamycin (53.1%), penicillin (50.0%), gentamicin (43.7%), florfenicol (25.0%), ampicillin (18.7%), colistin (9.4%), trimethoprim/sulfamethoxazole, ceftiofur (8.3%), amoxicillin/clavulanic acid (3.1%) and enrofloxacin (0%). Oxytetracycline or florfenicol-resistant isolates were examined for the presence of resistance gene. Among the 31 oxytetracycline-resistant isolates, tetB, tetH and tetO genes were detected in 22 (71%), 8 (26%) and 1 (3%) isolates, respectively. The floR genes were detected in 8 (100%) of the 8 florfenicol-resistant A. pleuropneumoniae isolates.
At the present study, it was aimed to detect virulence genes and antimicrobial resistance genes among 102 strains of 12 Salmonella serotypes isolated from pigs and cattle. In polymerase chain reaction (PCR), invA was detected from all strains of Salmonella spp., spvC was detected from Salmonella enterica serotype Enteritidis (S. Enteritidis) (100%), S. Bradenburg (75%), and S. Typhimurium (20.4%). Drug resistance related genes of 12 types were detected from all strains. TEM ($bla_{TEM}$) gene was detected from 51 (92.7%) of 55 $\beta$-lactams (54 ampicillin or 1 amoxicillin) resistance strains. 55 (100%) of 55 chloramphenicol resistance strains, 3 (100%) of 3 gentamicin resistance strains and 5 (100%) of 5 kanamycin resistance strains did contain cml, aadB, and aphA1-Iab, respectively. strB (89.9%), strA (88.4%), aadA2 (84.1%) and aadA1 (72.5%) were detected from 69 streptomycin resistance strains. sulII and dhfrXII were detected from 49 (100%) of 49 sulfamethoxazole/trimethoprim resistance strains, but sulI was not detected. tetA (97.9%) and tetB (21.6%) were detected from 97 tetracycline resistance strains. int gene was detected from 58 (56.9%) of 102 strains. 54 S. Typhimurium of 102 Salmonella spp. were attempted to detect drug resistance genes. TEM was detected from 44 (95.7%) of 46 $\beta$-lactams (45 ampicillin or 1 amoxicillin) resistance strains. cmlA was detected from 51 (100%) of 51 chloramphenicol resistance strains. aadA2 (100%), strA (100%), strB (100%), and aadA1 (79.6%) were detected from 54 streptomycin resistance strains. sulII (100%) and dhfrXII (100%) were detected from 49 sulfamethoxazole/trimethoprim resistance strains. tetA was detected from 54 (100%) of 54 tetracycline resistance strains. int gene was detected from 54 (100%) of 54 strains. The major drug resistance pattern and resistance gene profile were ampicillin, chloramphenicol, streptomycin, sulfamethoxazole/trimethoprim and tetracycline (ACSSuT) and TEM, cmlA, aadA1, aadA2, strA, strB, sulII, dhfrXII, tetA and int, respectively.
BIn the present study, Enterococcus isolates originating from livestock were studied for the phenotypic and genotypic assessment of tetracycline resistance. A total of 74 isolates encompassing the species Enterococcus faecalis (n=12) and E. faecium (n=62) displayed phenotypic resistance to tetracycline. Tetracycline resistance gene [tet (M), 1,886bp] were sequenced by dye terminator cycle sequencing method and compared with tet (M) sequences available from the GenBank database. Sequencing analysis of PCR amplicons showed high homology to the reference strains ranging 97.2~100%. The tet (M) genes were divided into three major subgroups according to phylogenetic analysis. The genetic information obtained from this study could be useful for the molecular study of enterococci.
This study was carried out to investigate the antimicrobial resistance pattern and distribution of resistance gene in 44 Enterobacteriaceae and 21 Pseudomonas (P) aeruginosa isolated from hospitalized dogs and cats in animal hospital from 2010 to 2011 in Daegu. Among Enterobacteriaceae, Escherichia (E) coli was highly resistant to ampicillin (56.7%), followed by tetracycline (53.3%), cephalothin, streptomycine, sulfamethoxazole/trimethoprim, gentamicin and norfloxacin (40.0~43.3%). The remaining isolates of Enterobacteriaceae had high resistance to ampicillin (64.3%) and streptomycin (42.9%). Whereas, P. aeruginosa was low resistant to all antimicrobials tested (less than 15%). int I 1 gene was detected in 20 (57.1%) of 35 antimicrobial resistant Enterobacteriaceae and 2 (9.5%) of 21 P. aeruginosa., but int I 2 gene was not detected in all isolates. The eight resistance genes were found either alone or combination with other gene (s): $bla_{TEM}$, aadA, strA-strB, clmA, tetA, tetB, sul I and sul II. About 78% of integron-positive isolates were resistance to more than four antimicrobial agents. The findings suggest that class I integrons are widely distributed in E. coli among Enterobacteriaceae from dogs and cats and multi-drug resistance related to the presence of class I integrons. The prudent use of antimicrobials and continuous monitoring for companion animals are required.
This study was carried out to investigate the antimicrobial resistance profiles and resistance genes in 62 Escherichia coli isolated from dogs and cats hospitalized at animal hospitals in Daegu. E. coli isolates showed high resistance to nalidixic acid (46.8%) and ampicillin (45.2%). Resistance to the other antimicrobial agents was less than 30%, and no resistant isolates were detected for imipenem and amikacin. Of the 28 ampicillin-resistant isolates, TEM and CTX-M genes were detected in 16 (57.1%) and 11 (39.3%), respectively. The aadA gene was found in 4 (26.7%) of 15 gentamicin-resistant isolates, and strA-strB gene was found in 10 (66.7%) isolates. The sul I and sul II genes were detected in 11 (61.1%) and 14 (77.8%) of 18 trimethoprim/sulfamethoxazole-resistant isolates, and tetB gene in 9 (81.8%) of 11 minocycline-resistant isolates, and cmlA gene in 2 (22.2%) of 8 chloramphenicol-resistant isolates. The qnrB and qnrS genes were found in 3 (10.3%) and 1 (3.4%) of 28 nalidixic acid-resistant isolates, respectively. Whereas, none of the SHV, CMY-2, tetA, dfr Ia and dfr VII, and qnrA genes were found. Our results show a wide variety of resistance genes in E. coli isolates from dogs and cats. This study also represents the first report of qnrB and qnrS gene producing E. coli isolates from dogs in republic of Korea.
Avermectin and its analogs are major commercial antiparasitic agents in the fields of animal health, agriculture, and human infections. Previously, comparative transcriptome analysis between the low-producer S. avermitilis ATCC31267 and the high-producer S. avermitilis ATCC31780 using a S. avermitilis whole genome chip revealed that 50 genes were overexpressed at least two-fold higher in S. avermitilis ATCC31780. To verify the biological significance of some of the transcriptomics-guided targets, five putative regulatory genes were individually cloned under the strong-and-constitutive promoter of the Streptomyces expression vector pSE34, followed by the transformation into the low-producer S. avermitilis ATCC31267. Among the putative genes tested, three regulatory genes including SAV213, SAV3818, and SAV4023 exhibited stimulatory effects on avermectin production in S. avermitilis ATCC31267. Moreover, overexpression of SAV3818 also stimulated actinorhodin production in both S. coelicolor M145 and S. lividans TK21, implying that the SAV3818, a putative TetR-family transcriptional regulator, could be a global upregulator acting in antibiotic production in Streptomyces species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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