To verified the target genes of miR-34c, bioinformatics software was used to predict the targets of miR-34c. Three possible target genes of miR-34c related to spermatogenesis and male reproductive development: zinc finger protein 148 (ZNF148), kruppel-like factor 4 (KLF4), and platelet-derived growth factor receptor alpha (PDGFRA) were predicted. Then, the expression of miR-34c and its target genes were detected in swine testicular tissue at different developmental stages by quantitative polymerase chain reaction. The results suggested that the expression of PDGFRA has the highest negative correlation with miR-34c. Then immunohistochemical staining was done to observe the morphology of swine testicular tissue at 2-days and 3, 4, 5-months of age, which indicated that PDGFRA was mainly expressed in the support cells near the basement membrane during the early development stages of testicular tissue, but that the expression of PDGFRA was gradually reduced in later stages. Therefore, western blot analyzed that the highest expression of PDGFRA was generated in 2-days old testicular tissues and the expression levels reduced at 3 and 4-months old, which correlated with the results of immunohistochemical staining. In conclusion, PDGFRA is a target gene of miR-34c.
Objective: The aim of this study was to investigate the morphological aspects of testicular tissue before and after freezing-thawing by light and transmission electron microscopy. Methods: Tissue biopsies were carried out on mouse testis for freezing. Samples in medium containing 20% glycerol were frozen by computer-controlled freezing program. The effect of freezing-thawing on the structural change of testicular tissues were examined by light and electron microscopy. Results: The freezing-thawing procedure had no significant effect on tubular diameter. However, it caused folding of the lamina propria, and notable damage to Sertoli cells, spermatogonia and spermatocytes. The cells were detached, desquamated from the basal lamina and had increased vacuolization. Round spermatids, elongated spermatids and spermatozoa were less affected, and most of them maintained their normal structure. Conclusions: The structure of spermatogonia, spermatocyte and basal compartments in seminiferous epithelium was significantly altered by freezing-thawing procedure of mouse testicular tissues. Thus, we need to develop a more reliable method for the cryopreservation of testicular tissues.
Assi, Tarek;Nasr, Fadi;El Rassy, Elie;Ibrahim, Toni;Jabbour, Hicham;Chahine, Georges
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.17
no.4
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pp.1899-1902
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2016
Background: Despite the fact that testicular cancer is a major health issue with its increasing incidence, very few studies have described its characteristics in the Middle East, particularly in Lebanon. Materials and Methods: We report in this paper a retrospective pilot study of the characteristics of testicular cancer in Lebanon. The demographic, epidemiologic and survival characteristics of 178 patients diagnosed between 1990 and 2015 at an oncology clinic affiliated to Hotel Dieu de France Hospital were analyzed. Results: The mean age at diagnosis was $32{\pm}10years$. The most prevalent testicular tumor was the germ cell type (GCT) (95.2%) of which non-seminomatous tumors (NST) were the commonest (64.7%). Most of our patients were diagnosed at an early stage. Lymph node spread affected most commonly the retroperitoneal region and distant visceral metastases occurred in 14.6%. All patients underwent orchiectomy with 67% receiving adjuvant treatment, mainly chemotherapy. After a median follow up of 2,248 days (75.9 months) 16 patients were reported dead. Two, five and ten-year overall survival rates were 96%, 94% and 89% respectively. The median overall survival rate was not reached. Conclusions: Despite being part of the developing world, demographic, epidemiologic and survival analyses of testicular cancer reported in our study are in line with those reported from developed countries and would allow us to extrapolate management plans from these populations.
Objectives : This study aimed to investigate the effects of Shingi-whan(SG) on the male reproductive and sexual function, so we measured the spermatogenesis and the testicular toxicity in mice and the vasorelaxation in isolated rabbit corpus cavernosum smooth muscle. Methods : To evaluate effect on the spermatogenesis in mice, we prepared two groups, control group and SG group that was orally administered SG(1,000mg/kg) for 20 days, and compared. To analyze testicular toxicity in mice, we also prepared two groups, doxo group that was injected with doxorubicin (3mg/kg) on three times and doxo + SG group that was injected with doxorubicin and SG for 20 days, and compared. To investigate sexual function of SG in mice, we prepared three groups, normal group and aging elicited group consisting of 18-month-old mice, SG treated aging group that was orally administered SG for 60 days, and compared using histochemical staining on mice corpus cavernous tissues. In order to define the relaxation effects of SG, rabbit corpus cavernous tissues were prepared in $2{\times}2{\times}6mm$ sized strip. Then the dose-dependent relaxation responses of SG at 0.01-3.0 mg/ml in contracted strips induced by phenylephrine were measured. Results : The sperm density in dutus epididymis and the diameter of seminiferous tubules of SG group was significantly increased when compared to control group. The testicular weight and the diameter and height of epithelial layer of seminiferous tubules of doxo + SG group was significantly increased when compared to doxo group. The cavernous strips were significantly relaxed by SG extract In SG treated aging group, ratio of smooth muscles to collagen fibers and red blood cell count in venous sinus was increased as compared to aging elicited group. Conclusions : Our findings have shown that SG extract have effect on spermatogenesis and mitigating effect on doxo-induced testicular toxicity. Further, it also have the vasorelaxant effect on rabbit corpus cavernosum.
Park, Kwang-Hyun;Mok, Ji-Ye;Kim, Sung-Zoo;Kang, Hyung-Sub;Shim, Jae-Suk;Jang, Seon-Il
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.25
no.3
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pp.482-488
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2011
Cadmium (Cd) is well known as a spermatotoxic and gonadotoxic heavy metal ion. This study was performed to assess the possible protective effect of Enerbalance on Cd-induced spermiotoxicity and testicular damage. The control group received isotonic saline; Cd group received Cd (2 mg/kg BW per day) orally; extract-treated groups were orally administrated with Enerbalance (50 mg and 100 mg/kg BW per day) and Cd for 10 days. Morphological changes of testicular tissue, sperm characteristics, oxidative/antioxidative parameters from testis, and serum sexual hormone level were determined. Enerbalance was significantely increased sperm amount in cauda epididymis without changes of ratio of epididymis/body weight and testis/body weight. Cd caused a marked decrease in epididymal sperm concentration and chemotactic sperm motility, testicular superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), Enerbalance was significantly ameliorated loss of epididymal sperm concentration, sperm chemotactic motility, antioxidative parameters, and male hormone whereas decreased abnormal architecture by testis damage. Enerbalance was successfully attenuated these adverse effects of Cd and offers a dose-dependent protection. Our study demonstrated that Enerbalance could proffer a measure of protection against Cd-induced testicular damage and spermiotoxicity by possibly reducing oxidative stress and increasing the antioxidant defense mechanism in mice.
Previously we have reported that administration of Korean red ginseng water extract (KRG-WE) plays both preventive and therapeutic roles in testicular toxicity of guinea pigs exposed to 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD). Further study was carried out to verify the beneficial role of Korean red ginseng in TCDD-induced testicular toxicity with different animal species by different route of administration. Korean red ginseng crude saponin (KRG-CS) was prepared by Diaion HP-20 adsorption chromatography. One hundred twenty rats (Sprauge Dawley, 200${\pm}$10 g) were divided into 6 groups. The normal control group (NC) received vehicle (i.p.) and saline (p.o.). Predetermined dosage of TCDD (40 $\mu\textrm{g}$/kg b.w., i.p.) was administered to single TCDD-treated (TT) and test (CS) groups. KRG-CS was admin-istered (p.o.) at daily doses of 5 (CS5), 10 (CS10),20 (CS2O) and/or 40 mg/kg b.w. (CS40) for 5 weeks, starting 1 week before the TCDD-exposure. Body weight gain, organ weights, and sperm quality were investigated. Decrease in body weight gain induced by TCDD was greatly attenuated by KRG-CS in a dose-dependent manner. Testicular weight, sperm head counts and ratio of sperm with progressive movement in TT group decreased significantly but those parameters were improved by the treatment of KRG-CS in a dose-dependent manner. This result led us to conclude that crude saponin might be the active ingredient of Korean red ginseng that attenuates the testicular toxicity induced by TCDD.
Objective: The purpose of this study was to evaluate outcome of intracytoplasmic sperm injection (ICSI) using epididymal and testicular sperm in patients with azoospermia. Methods: From March, 1993 to May, 1999, a retrospective clinical analysis was done of a total of 140 cycles in 112 patients who underwent ICSI. Subjects were divided into three groups: ejaculated-ICSI group included 42 cycles in 34 patients with ejaculated sperm who underwent ICSI due to severe oligospermia and past history of failed or poor fertilization in the previous in vitro fertilization and embryo tranfer (IVF-ET) cycles, microsurgical epididymal sperm aspiration and intracytoplasmic sperm injection (MESA-ICSI) group included 50 cycles in 42 patients with congenital absence of the vas deferens (CAVD) or unreconstructable obstructive azoospermia and testicular sperm extraction and intracytoplasmic sperm injection (TESE-ICSI) group included 48 cycles in 36 patients with no spermatozoa which can be retrieved from epididymis or non-obstructive azoospermia. Results: Normal two-pronuclear fertilization rates were similar in three groups: 64.4% for ejaculated-ICSI group, 59.4% for MESA-ICSI group and 60.4% for TESE-ICSI group. The pregnancy rates were 26.2%, 26.0% and 25.0% respectively. There were no significant differences in the fertilization, cleavage, and clinical pregnancy rates among ICSI cycles using ejaculated, epididymal and testicular sperm. Conclusion: Epididymal and testicular sperm obtained in azoospermic patients can fertilize oocyte successfully and may lead to be similar fertilization rates and clinical pregnancy rates to ejaculated sperm.
A clinical investigation was undertaken on primary male infertility patients of recent 5 years. The results obtained were as follow: 1. Suspective etiologic factors were: 1) testicular failure, 36.1 %; 2) varicocele, 18.7%; 3) endocrine abnormality, 13.5%; 4) obstruction, 13.5%; 5) idiopathic, 10.9%; 6) cryptorchidism, 2.6%; 7) necrospermia, 0.9%. 2. On semen analyses, azoospermia was found in 55.8%, single abnormal parameter in 21.5 %, and multiple/all abnormal parameter in 22.7% of the 163 cases. 3. For the evaluation of the sensitivity and specificity of noninvasive variables in predict in obstruction as the cause of azoospermia in patient who had undergone testicular biopsy, the testicular size and serum follicle-stimulating hormone(FSH) level revealed 100% of sensitivity. 4. Among the 43 patients with a testicular biopsy confirmed diagnosis there was a significant difference in testicular size, ejaculate volume(p<0.0001) and serum FSH(p<0.0001) between patients with testicular failure and those with ductal obstruction. 5. Of 93 treated patients with primary male infertility, 42 were managed by medical treatment including endocrine treament, retrograde ejaculation treatment, infection treatment and observation; 29 were managed by surgical treatment including varicocelectomy, vasovasostomy, vasoepididymostomy and TUR of ejaculatory duct; 20 were managed by sperm preparation treatment including artificial insemination(AI), electroejaculation plus AI and vibration ejaculation plus AI ; 2 were managed by microscopic epididymal sperm aspiration plus IVF, repectively. 6. 42 patients who could be followed-up, 21 patients(50%) impregnated their wives.
Lee, Bom Yi;Lee, Shin Young;Lee, Yeon Woo;Kim, Shin Young;Kim, Jin Woo;Ryu, Hyun Mee;Lee, Joong Shik;Park, So Yeon;Seo, Ju Tae
Journal of Genetic Medicine
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v.13
no.2
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pp.78-88
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2016
Purpose: To identify the clinical characteristics of SRY-negative male patients and genes related to male sex reversal, we performed a retrospective study using cases of 46,XX testicular disorders of sex development with a review of the literature. Materials and Methods:SRY-negative cases of 46,XX testicular disorders of sex development referred for cytogenetic analysis from 1983 to 2013 were examined using clinical findings, seminal analyses, basal hormone profiles, conventional cytogenetic analysis and polymerase chain reaction. Results: Chromosome analysis of cultured peripheral blood cells of 8,386 individuals found 19 cases (0.23%) with 46,XX testicular disorders of sex development. The SRY gene was confirmed to be absent in three of these 19 cases (15.8%). Conclusion: We report three rare cases of SRY-negative 46,XX testicular disorders of sex development. Genes on autosomes and the X chromosome that may have a role in sex determination were deduced through a literature review. These genes, through differences in gene dosage variation, may have a role in sex reversal in the absence of SRY.
The survival rate and motility recovered after cryopreservation of testicular spermatozoa in testicular sperm extraction (TESE)-ICSI program is low. The purpose of this study was to assess the availability and efficiency of mouse empty zona pellucida in cryopreserving human TESE spermatozoa. Mouse empty zonae pellucidae were obtained by extraction of cytoplasm with or without cytochalasin B treatment. Motile sperm from proven-fertile donor and two azoospermic patients after TESE were individually inserted into empty zona pellucida and cryopreserved. Two to five days after cyropreservation, the frozen sperm were thawed and the rates of recovery and motility were observed. The ooplasmic extraction rates of control (N=80) and cytochalasin B treated oocytes (N=80) were 94.0% and 96.2%, respectively (p>0.05). The post-thaw recovery rates of spermatozoa and rates of motility recovery of ejaculate (N=70) and testicular (N=70) sperm were 97.1%, 97.1% and 95.7%, 94.3%, respectively (p>0.05). The results of this study showed that the mouse zone pellucida is useful for cryostorage of single testicular spermatozoa.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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