Functional protein of MB78 bacteriophage having apparent molecular weight of 22 kDa is expressed from 1.7 kb HindIII G fragment. The nucleotide sequence of this fragment showed two open reading frames of 222 and 196 codons in tail-to-tail orientation separated by a 62-nucleotide intercistronic region. The ORF of 22 kDa protein is present in opposite orientation, i.e. in the complementary strand, preceded by a strong ribosomal binding site and a promoter sequence. Another ORF started from the beginning of the fragment whose promoter region and translational start site lies in the 0.45 kb HincII U fragment which is located next to the HindIII G fragment, that has the sequence for DNA bending. 3' end of the fragment has high sequence homology to the EaA and EaI proteins of bacteriophage P22, a close relative of MB78 phage.
The RK-temperate phage which infected with Bacillus cereus was isolated and the characters were investigated. The induction of RK-temperate phage from host bacterium attained by ultraviolet light irradiation (15W, 30cm, 30-120sec) and mitomycin C treatment (0.2-2 ug/ml). The host range of RK-temperate phage was not revealed with lysogenic and related strains of B. cereus. But B. cereus(PS) 352 which obtained by N-nitrosoguanidine treatment (1,000{$\mu}g/ml)$ to phage infected with host bacteria was sensitive bacteria of RK-temperate phage. RK-temperate phage was stabilized at the condition of nutrient broth (pH 7-8), Tris-buffer (pH 7-8) and ammonium buffer (pH 8-9) and Sorensen's phosphate buffer (pH 6-7), but unstabilized at other salt solutions and pH range. Also, thermostability was to $45^{\circ}C$ but unstabilized at above $50^{\circ}C$. At RK-temperate phage, the measurment values of head, neck, mid tail and end tail were 59nm, $9{\times}16nm,\;10{\times}189nm,\;and\;10{\times}14nm$ respectively. The morphology of head was regular polyhedron, and the end tail was coneate form. On the one hand, the number of capsid protein layer of tail were consist of 4, 35, and 1 at neck, mid tail, and end tail, respectively. RK-temperate phage was identified with DNA phage and G+C contents were 38.63. The latent time of RK-temperate phage was 30 minutes and the burst size was 70-80. And the host bacteria was lysed in case of multi-infection, above moi 1.
Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2006.11a
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pp.84-85
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2006
This study was carried out to ascertain phylogenetic status of long-tail chicken which found recently in Korea and was presumed to be a kind of Korean Natives. 10 loci microsatellites were analysed for 449 birds of 11 groups and 2 region of mitochondrial DNA were sequenced for 135 birds of the same groups, that consist of 3 introduced breeds and 8 Korean Natives including 3 long-tail chicken. In mean numbers of alleles per locus(MNA) for microsatellites, long-tail chicken were smaller (2.60${\sim}$3.20) than the others, but in heterozygosities, were higher(0.4087${\sim}$0.5375) than others that were the same level of MNA. And in the neighbor joining bootstrap tree drawing by Nei's standard distance, they made a cluster with some Korean Native groups. All of the nucleotide sequences of mitochondrial cytochrome b gene and D-loop were classified into 23 haplotypes. In long-tail chicken, the haplotypes were 3 kinds, and were different among the groups (LTA, LTB and LTD). Resultly, it was supposed that 3 groups of the long-tail chicken be all a kind of Korean Natives.
The RK-temperate phage which infected with Bacillus cereus was isolated and the characters were investigated. The induction of RK-temperate phage from host bacterium attained by ultraviolet light irradiation (15W, 30cm, 30-120sec) and mitomycin C treatment (0.2-2 ug/ml). The host range of RK-temperate phage was not revealed with lysogenic and related strains of B. cereus. But B. cereus(PS) 352 which obtained by N-nitrosoguanidine treatment(1,000.$\mu$g/ml) to phage infected with host bacteria was sensitive bacteria of RK-temperate phage. RK-temperate phage was stabilized at the condition of nutrient broth (pH 7-8), Tris-buffer (pH 7-8) and ammonium buffer (pH 8-9) and Sorensen's phosphate buffer (pH 6-7), but unstabilized at other salt solutions and pH range. Also, thermostability was to 45.deg.C but unstabilized at above 50.deg.C. At RK-temperate phage, the measurment values of head, neck, mid tail and end tail were 59nm, 9*16nm, 10*189nm, and 10*14nm respectively. The morphology of head was regular polyhedron, and the end tail was coneate form. On the one hand, the number of capsid protein layer of tail were consist of 4, 35, and 1 at neck, mid tail, and end tail, respectively. RK-temperate phage was identified with DNA phage and G+C contents were 38.63. The latent time of RK-temperate phage was 30 minutes and the burst size was 70-80. And the host bacteria was lysed in case of multi-infection, above moi 1.
During the screening of material which has the antimicrobial activity against aminoglycoside-resistant bacteria, A new material ${\varepsilon}-(L-{\beta}-lysine)$ polypeptide from a culture medium of Streptomyces sp.(DWGS2) was isolated, and the structure and the physicochemical properties of the new material were elucidated. The new material was separated by column chromatography of the culture medium using Dowex $1{\times}2$, Silica gel, and Sephadex LH20 etc. The structure and molecular weight were determined with the data of NMR, MALDI mass, and ESI mass experiments. And the monomer obtained by hydrolysis of the new material with 6N-HCI was identified as a $L-{\beta}-lysine(T_2)$, which is a tail of bleomycin. As tail-region analogy, $T_2({\beta}-lysine$ derivatives from streptomyces) interactions with a self-complementary oligonucleotides, $d(CGCTTCGAAGCG)_2$, was investigated by NMR.
To understand the molecular structure and pathogenesis mechanism of Korean garlic viruses, we have isolated cDNA clones for garlic viruses. The partial nucleotide sequences of 24 cDNA clones were determined and those of five clones containing poly(A) tail were compared with sequences of other plant viruses. One of these clones, V9, has a primary structure similar to the carlavirus group, suggesting that the clone V9 derived from a part of garlic latent virus (GLV). Northern blot analysis with the clone V9 as a probe demonstrated that GLV genome is 8.5 knt long and has a poly(A) tail. The clone V9 encodes coat protein (CP) of 33 kDa and nucleic acid binding protein of 10 kDa in different reading frame. The hexanucleotide motif, 5'-ACCUAA, which is conserved in the 3' noncoding region arid was proposed to be a cis-acting element involved in the production of negative strand genomic RNA was noticed. Complementary sequence to the hexanucleotide motif, 5'-TTAGGT, is also found in the positive strand of V9 RNA. The putative CP gene was cloned into the pRSET-A expression vector and expressed in E. coli BL21. The expressed recombinant V9CP protein was purified by $Ni^{2+}$ NTA affinity chromatography. The anti-V9CP antibody recognizes 34 kDa polypeptide which could be CP of GLV in infected garlic leaf extract. Immunoblot and Northern blot analysis of various cultivars shows wide occurrence of GLV in Korean garlic plants.
Reactive oxygen species can be generated in the skin by hair dyeing. The aim of this study was to find out the effects of the oxidative-type hair dye application in young women on the antioxidant systems. We investigated the lipid peroxide levels, glutathione (GSH) levels, and the antioxidant enzyme activities including superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSHPx) in plasma and erythrocytes and catalase (CAT) in erythrocytes, and DNA damages in lymphocytes. Also, plasma concentrations of antioxidant vitamins, vitamin A and E, were measured and the correlations between various antioxidant parameters and oxidative damages were evaluated The antioxidant enzyme activities in plasma (GSHPx) and in erythrocytes (SOD and CAT) were decreased significantly after hair dyeing. 1be lipid peroxide and GSH levels were not affected in both plasma and erythrocytes. No significant difference was found in the concentrations of both vitamin A and E between before and after hair dyeing. However, DNA damages expressed as the tail extent moment (TEM) and tail length (TL) were significantly (p<0.001) increased. The plasma vitamin E concentration was correlated with DNA damages (TEM: r=-0.590, p<0.01 and TL: r=-0.533. p<0.01) and RBC SOD activity (r=0.570, p<0.05). In turn, RBC SOD activity was significantly correlated with both plasma MDA levels (r=-0.412, p<0.05) and DNA damages (TM: r=-0.546, p<0.01, TL: r=-0.493, p<0.01). Our results demonstrated that the exposure to hair dyeing produced lymphocyte DNA damage and modification of the antioxidant enzyme activities. Also, there were very strong associations between plasma vitamin E concentration, RBC SOD activity and DNA damage induced by hair dyeing. It suggests that the antioxidant status of a subject is likely to be related to the extent of the harmful effects caused by hair dyeing.
Ornithine decarboxylase is the first and rate limiting enzyme in the biosynthesis of polyamines in mammalian cells. During cell growth the enzyme is regulated by rapid changes in the level of its mRNA and protein. To explore the molecular basis of these changes, ODC-specific complementary DNA (cDNA) clones were isolated from a bovine cDNA library. This region of the cDNA contained a portion of the open reading frame, a 3'noncoding region, and a poly-A tail of 456, 348, and 14 nucleotides, respectively. A comparison of the deduced sequence of the carboxyl terminal 151 amino acids of ODC with amino acid sequences in the same region of the enzyme from human, mouse, rat, and hamster showed greater than 88% identity in these proteins. The highly conserved nature of the amino acid sequences may be related to the important role of ODC in cell growth and differentiation.
Single cell gel electrophoresis assay was carried out to evaluate DNA damage in T-and B-lymphocytes from rats exposed to benzene and the correlation between DNA damage and the level of t,t-muconic acids, which are urinary benzene metabolites, was investigated. In control rats, the mean values of Olive tail moments in T-and B-lymphocytes were 1.507$\pm$0.187 and 1.579$\pm$0.206 respectively. DNA damages of T-lymphocytes in rats exposed for 4 weeks showed the highest Olive tail moments at each benzene concentration examined (2.72-4.351). However this DNA damage was decreased after 6 weeks of exposure (1.74-2.09). DNA damages of B-lymphocytes did not show such differences with exposure time or benzene concentration (1.49-2.07) except at 200 ppm at 4 weeks. T-lymphocytes show significantly more damages than B-lymphocyte upon acute exposure to benzene.
Amplification of brook trout growth hormone cDNA using polymerase chain reactiono (PCR) produced a nucleotide of 1,120 bp which contained the 5'non-coding region (13bp), an open reading frame (ORF) coding a growth hormone polypeptide consisting of 210 amino acids (630 bp), and a 3'non-coding region (477 bp). In open reading frame s signal peptide of 22 amino acid and 2 potential disulfide bond sites deduced by 4 cysteine residues were obser-bed. Brook trout growth hormone has 97.1%, 94.8%, 94.3%, 91.9%, 66.2%, 63.5%, 62.9%, 62.3%, 53.8% and 48.1% amino acid identity with that of Atlantic salmon, chum salmon, rainbow trout, coho salmon, tuna, tilapia, yellow tail, carp, flounder and eel, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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