생체 내에서 $O_2$를 특이적으로 제거시켜 줌으로써 의학적 응용가치가 매우 높은 것으로 알려진 superoxide dismutase(SOD)에 대하여 연구하였다. 먼저 이 효소의 활성을 여러 속의 세균을 대상으로 검토해된 결과 비교적 높은 활성을 나타낸 Bacillus circulans를 본 실험의 공시균주로 선택한 다음 SOD의 최적 생산 조건을 설정하였다. SOD의 생산은 각 세균에 따라서 양적인 차이는 있으나 종 및 속에 관계없이 다양하게 존재하는 것으로 나타났다. 효소의 생산 조건은 탄소원으로서 1% glucose, 질소원으로서 2% polypeptone, 무기염으로서 0.1% NaCl을 첨가하였을 때 가장 양호하였고 최적 pH는 6.0이었다. 이상의 조성을 가진 배지를 500$m\ell$용 진탕 플라스크에 100$m\ell$을 넣어 3$0^{\circ}C$ 에서 20시간 호기적 배양을 하였을 때 효소 생산 및 균체량이 최대에 도달하였다. 조효소액은 극히 불안정하여 안정제의 검토가 불가피하였다. 안정제로서는 최종농도가 5% 되도록 ethyl alcohol을 첨가한 경우가 효과적이었으며 pH 안정성은 pH5.0인 acetate buffer에서 가장 안정하였다. 이상의 조건 하에서 조효소액은 20일 이상 동안 약 80%의 잔존활성을 가지고 비교적 안정한 상태로 유지되었다.
A four-week feeding trial was conducted to investigate the effects of dietary soybean meal (SBM) and powdered Cheongkukjang (CKJ) on non-specific immune responses of parrotfish Oplegnathus fasciatus. Three isonitrogenous (42% crude protein) and isocaloric (17.1 MJ/kg) diets were formulated to replace fish meal by 0, 25% SBM or 25% CKJ (designated as FM, 25SBM and 25CKJ, respectively). Ninety fish (initial body weight 122 g) were randomly allotted into nine 150 L tanks. One of the three experimental diets was fed to triplicate groups of fish for 4 weeks. After the feeding trial, no differences were observed in growth performances and feed utilization among fish groups. Liver superoxide dismutase activity of the fish fed CKJ containing diet was significantly higher than that of the control groups. DPPH radical scavenging and $Fe^{2+}-chelating$ activities of the experimental diets containing SBM or powdered CKJ were significantly higher than that of the control diet. The results of the present study suggest that dietary inclusion of powdered 25CKJ significantly increased liver superoxide dismutase activity and did not affect the growth performances, feed utilization, morphological parameters, as well as hematological values of parrotfish.
본 연구는 Streptomyces subrutilus P5의 천연 Fe superoxide dismutase (FeSOD)와 유전자 재조합 기술로 생산된 6xHis-태그가 결합된 Fe superoxide dismutase (6xHis- FeSOD)의 활성을 비교하여 6xHis-태그의 효소에 대한 영향을 알아보기 위하여 수행되었다. 두 효소 모두 최적 pH는 7로 동일하였으나 6xHis-태그에 의해서 pH 범위는 축소되었다. 천연 효소는 pH 4-9의 범위에서 안정성을 보인 반면 6xHis-FeSOD는 pH 9에서 안정성이 상실되었다. 두 효소의 최적 온도는 차이가 없으나 열 안정성에 있어서는 천연 효소는 $40^{\circ}C$ 이하에서 720분까지 안정성을 유지하였으나 6xHis-FeSOD는 $20^{\circ}C$에서도 360분 이내에 활성을 잃는 것으로 나타났다. $H_2O_2$의 6xHis-FeSOD에 대한 저해는 0.5 mM에서 나타났다. 따라서 6xHis-FeSOD는 효소활성은 유지되더라도 열 안정성이 크게 감소되는 결과를 얻었다. 이것은 6xHis-태그가 활성부위 보다는 단백질 전체 구조에 더 많은 영향을 미친 결과라고 생각되었다.
녹차카테킨(GTC)의 항산화 작용을 알아보고자 in vitro와 in vivo에서 지질과산화와 superoxide dismutase(SOD), catalase 활성에 미치는 영향에 대한 실험을 행하였다. In vitro 시험계에서의 항산화활성 실험결과, GTC는 peroxide value와 과산화지질 생성을 유의성 있게 억제시켰고, SOD 활성이 매우 높았다. 또한 GTC를 rat에 경구투여 한 후 항산화활성실험 결과, GTC는 $CCl_4$로 유도된 rat의 간 microsome의 지질과산화를 유의성 있게 억제시켰으며, SOD와 catalase 활성을 유의성 있게 증가시켰다. 따라서 GTC는 암과 노화의 예방과 관련이 되는 항산화 활성이 있는 것을 알 수 있었다.
대두 발효 식품의 항산화 활서을 알아보기 위하여 in vitro와 in vivo에서 과산화 지질의 생성 억제와 항산화 관련 효소인 superoxide dismutae(SOD), catalase및 glu-tathion perosidase 활성을 증강시키는 실험을 실시하였다. In vitro 실험에서 항산화 활성을 실험한 결과 대두 발효식품은 POV와 관산화 지질의 생성을 유의성있게 억제시켰으며, quercetin과 catechin와 비교와 결과 SOD 활성은 상당히 높았다. 그리고 대두 발효 식품은 SD계 수컷 쥐에 2주간 사료에 첨가하여 먹인 후 항산화 활성을 측정한결과, 대두 발효식품을 쥐에 투여하여 사염화 탄소($CCl_4$)로 손상을 유도시킨 뒤 쥐의 간 microsome의 지질 과산화를 유의성 있게 억제 시켰다. 항산화 관련 효소인 SOD, catalase 및 glu-tathion perosidase 활성은 유의성 있게 증가하였고, 지질 과산화도 억제시켰다. 따라서 대두 발효 식품은 산화 스트레스로 생성되는 활성 산소의 소거에 효과적임을 알 수 있다.
In an attempt to dofine the early biochemical determinants that participate in the pathogenesis of glycerol-induced nephrotoxicity, especially focusing on oxygen free radicals and $N-acetyl-{\beta}-D-glucosaminidase$ (NAG) activity, we studied 24-hours urine outflow, 24-hours urinary protein excretion and urinary NAG activity after the injection of glycerol and also we studied malondialdehyde(MDA) level and superoxide dismutase(SOD) activity in the kidney of rats at 24hr after the injection of glycerol. Sprague-Dawley albino rats weighing 240 to 260 gm were injected intramuscularly with a 50% solution of glycerol(2ml/kg, 4ml/kg and 8ml/kg). The group treated with glycerol showed significantly lower urine outflow level and urinary protein excretion level and higher urinary NAG activity after the injection as compared to those of control group. Also the group treated with glycerol showed significantly higher MDA level and lower SOD activity at 24hr after the injection as compared to those of control group. These results suggest that the excessive oxygen free radicals resulting from the depression of SOD activity is an important determinant in the pathogenesis of glycerol-induced nephrotoxicity and higher urinary NAG activity is an index of renal tubular cell damage in the glycerol-induced nephrotoxicity.
UV-B와 도열병병원균 접종들의 환경 스트레스에 의한 벼의 POD, SOD및 Diterpene cyclase등의 활성 변화를 조사하여 해 본 결과, 일품벼에서 POD 와 SOD활성이 가장 놓았고, 도열병진전에 따른 PDO활성은 감수성 품종인 일품과 화성은 증가하였으나 저항성 품종인 다산은 감소하였다. 키토산 처리에의한 SOD의 활성 변화는 처리 농도가 높을수록 증가하였다. 키토산 처리후 14일에서의 감수성품종인 화성의 SOD활성은 무처리 식물체에 비하여 높았다. UV-B조사 시간이 길수록 감수성품종인 일폼의 POD활성은 감소하였고, 저항성 품종인 다산은 증가하였다. 특히UV-B의 조사시간에 따른 다산의 POD활성은 차가 없었으나, 화성의 활성은 40분 조사처리시 2배 놓았다 UV-B처리에 비해 p.oryzae를 접종시는 diterpene cyclase의 활성이 놓아졌으며, 병원균 접종후 5일까지 효소활성이 검진적으로 증가하였다.
The virulence of superoxide dismutase (SOD) mutants of Vibrio vulnificus, as tested by intraperitoneal injection into mice, decreases in the order of sodC mutant, sodA mutant, and sodB mutant lacking CuZnSOD, MnSOD, and FeSOD, respectively. The survival of SOD mutants under superoxide stress also decreases in the same order. The virulence of soxR mutant, which is unable to induce MnSOD in response to superoxide, is similar to that of the sodA mutant, as the survival of the soxR mutant under superoxide stress is similar to that of the sodA mutant. Consistently, the lowered survival of the soxR mutant is complemented not only with soxR but also with sodA. Thus, the virulence of V. vulnificus is significantly affected by the cellular level of SOD activity, and an increase in SOD level through MnSOD induction by SoxR under superoxide stress is essential for virulence.
N-nitrosoethylurea(NEU)에 의한 지질 과산화물의 함량 변화와 알데히드 대사효소 및 항산화효소의 활성변화를 쥐 간세포에서 측정하였다. 알데히드 대사효소로는 alcohol dehydrogenase와 aldehyde dehydrogenase가 사용되었고 항산화효소로는 glutathione transferase, superoxide dismutase, glutathione reductase와 catalase가 사용되었다. 쥐 간세포에 다양한 농도의 NEU를 처리한 후 지질 과산화물의 함량변화를 측정하였다. 그 결과 6.25mM NEU에 의하여 지질 과산화물의 함량이 최대 2.5배 증가하였다. Alcohol dehydrogenase의 활성은 NEU처리에 의하여 대조군보다 최대 2.3배 증가하였고 aldehyde dehydrogenase의 활성은 약 2배 증가하였다. 전암성 병변의 지표로 이용되는 glutathione transferase와 catalase의 경우 NEU처리에 의한 활성증가가 미미하였다. 그러나 superoxide dismutase의 활성은 최대 1.5배 증가하였고, glutathione reductase의 활성은 약 3배 증가하였다. 그러므로 superoxide dismutase와 g1utathione reductase의 활성증가가 NEU의 독성에 대한 세포내 항산화 방어과정에서 중요한 역할을 할 것으로 추측된다
The superoxide dismutase (SOD) activity of seven Bifidobacterium spp. strains was examined by an indirect SOD assay method. Some Bifidobacterium spp. showed significant levels of SOD activity. However, we could not observe any significant differences between anaerobic and aerobic cultures. Furthermore, although several Bifidobacterium spp. exhibited some degree of tolerance to paraquat which produces superoxide radicals, the apparent SOD activity of these strains was not correlated with their resistance to paraquat. In addition, when we added increasing amounts of manganese or iron to MRS medium which had been prepared without either of the metal ions, the apparent SOD activity of cell free extracts (CFEs) was increased with increasing concentration of both metal ions. To our surprise, the heat-denatured CFEs also showed nearly identical correlative patterns. Based on these results, the apparent SOD activity was likely due to a nonenzymatic dismutation. These results strongly suggest that high concentration of divalent metal ions ($Mn^{2+}$, $Fe^{2+}$) in MRS medium result in nonenzymatic dismutation which can lead to false positive SOD activities in Bifidobacerium spp.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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