To find biologically active components of the higher fungi of Korea, the carpophores of Auricularia polytricha, a well-known edible mushroom, were extracted with 0.14 M NaCl solution. The extract was successively fractionated by adding ammonium sulfate at various concentrations, and the respective precipitates were separated by centrifugation, then dialyzed and freeze-dried. When a does of 60 mg/kg of each was injected i.p. into ICR mice, the fraction which precipitated at 20% ammonium sulfate showed the highest toxicity, killing seven out of seven mice within two days. The fraction obtained at 40% ammonium sulfate showed the second highest toxicity. The two fractions were named auritoxin I and II after the genus name. However, they Nere shown to have nearly identical composition by physicochemical and 6.8% protein. The polysaccharide moiety was found to have 12.3% $\alpha$-linkage and 87.7% $\beta$-linkage and to be a heteromannoglucan consisting of 45.1% glucose, 435 mannose and 11.0% xylose. The protein moiety contained ten amino adids. The molecular weight of the toxin was $1.5\times10^6$ dalton by Sepharose CL-4B gel filtration. The modian lethal doses of auritoxin in mice were 56.4, 157.2 and 454.6 mg/kg by i.p., s.c. and p.o.administrations, respectively. The signs of intrxication were convulsion during the first 30 minutes after the injection, coma or sleeping within an hour, termor, lacrimation, nasal bleeding congestion, and death in 24 hours. Smong the various organs, the spleen was found to be enlarged remarkably. Human platelet aggregation was inhibited by the addition of auritoxin. The activity of malic dehydrogenase in vitro was inhibited by the toxin.
A single particle analytical technique, named low-Z particle electron probe X-ray microanalysis, was applied to characterize four samples collected at an underground shopping area connected to Dongdeamun subway station, in January and May 2006. Based on the analysis of their chemical compositions of the samples, many distinctive particle types are identified and the major chemical species are observed to be soil-derived particles, iron-containing particles. sulfates. nitrates, and carbonaceous particles. which are encountered both in coarse and fine fractions. Carbonaceous particles exist in carbon-rich and organic. Soil derived particles such as aluminosilicates, AlSi/C, $CaCO_3\;and\;SiO_2$ are more frequently encountered in spring samples than winter samples. Nitrate- and sulfate-con taming particles are more frequently encountered in winter samples, and those nitrate- and sulfate-containing particles mostly exist in the chemical forms of $Ca(CO_3,\;NO_3),\;Ca(NO_3,\;SO_4),\;(Na,\;Mg)NO_3\;and\;(Mg,\;Na)(NO_3,\;SO_4)$. Fe-containing particles which came from nearby subway platform are in the range of about 10% relative abundances for all the samples. It is observed that nitrate- and sulfate-containing particles and carbonaceous particles are much more frequently encountered in indoor aerosol samples than in outdoor aerosols, implying that $NO_x,\;SO_x$, and VOCs at the underground shopping area were more partitioned into aerosol phase.
한국산 인삼 단백질의 생화학적 특성을 체계적으로 규명하기 위하여 단백질의 분별정량, SDS polyacrylamide gel 전기영동, pH에 의한 단백질의 용출성 및 아미노산 포성을 분석한 결과는 다음과 같다. 인삼 단백질의 분별정량은 albumin이 66.0%로 가장 많았으며 glutelin이 20.5%이었고 인삼 단백질의 pH에 의한 용출성은 pH3에서 최저를 나타내었으며 $pH6{\sim}8$에서 최고치를 나타내었고 염의 종류 및 그 농도별에 의한 추출성은 sodium염의 경우 차이가 없었다. 수용성 단백질의 침전도는 40%의 ammonium sulfate와 acetone에 의하여 96% 침전하였으며 SDS-poly-acrylamide gel 전기영동의 결과 11개의 band가 확인되었으며 수용성 단백질의 주 단백질의 분자량은 43,000이었다. 수용성 단백질의 아미노산조성은 18종류로써 arginine의 함량이 45.17%로 가장 많았으며 proline 및 cystine의 함량은 매우 낮았다.
Exopeptidase active fractions from the hepatopancreas of the Argentina shortfin squid Illex argentinus, were obtained with acetone (AC 30-40%), ammonium sulfate (AS 60-70% saturation), anion exchange chromatography (AE-II, 0.2 M NaCl) and gel filtration chromatography (GF-I, 30-50 kDa) fractionation methods. A bitter peptide solution that has a bitterness equivalent to that of 2% glycylphenylalanine and prepared by tryptic hydrolysis of milk casein, was treated with the exopeptidase active fractions. The GF-I fraction was the best based on aminopeptidase activity (35.3 U/mg), percentage of recovery (30.7%) and a sensory evaluation (1.7). The amount of released amino acids increased as incubation time increased, and the bitterness of the enzyme reaction mixtures decreased. Incubation with the GF-I fraction for 24 h resulted in the hydrolysis of several peptides as revealed by the reverse-phase high performance liguid chromatography profile, with three peaks (3, 5 and 6) decreasing in area (%) and three peaks (1, 2 and 4) increasing in area (%). Therefore, the GF-I fraction appeared to be ideally suited to reduce bitterness in protein hydrolysates by catalyzing the hydrolysis of bitter peptides.
김치 조직의 연화에 관여하는 효소인 polygalacturonase(PG)를 배추에서 추출하여 황산암모늄 분획, 이온교환크로마토그래피 및 FPLC를 이용하여 D-PG, C-1, C-2 PG 세 분획으로 분리 정제하여 특성을 조사하였다. 분리된 세 분획의 활성 최적 온도는 $65^{\circ}C$, 최적 pH가 5.2였으며 pH$4.5{\sim}8.0$ 범위에서 안정하였다. NaCl에 의한 영향은 0.3M NaCl에서 최대의 활성을 보였으나 0.6M 이상에서는 저해를 받았으며 $CaCl_2$의 경우 $0{\sim}0.5mM$ 농도에서는 활성이 크게 영향을 받지 않았으나 0.8mM에서는 저해를 받았다. 열불활성화 특성은 isozyme간에 큰 차이가 없었으며 1차 반응을 따랐다. 이 효소 isozyme의 z값은 $8.4{\sim}9.3^{\circ}C,\;80^{\circ}C$에세 D값은 $102{\sim}126$초였다. 이 호소의 불활성화 값을 이용하여 retort pouch 김치 살균공정에 적용하고 역가의 잔존 가능성에 대하여 고찰하였다.
폭렬종 옥수수를 가열가공 처리하여 가열 처리과정중에 일어나는 단백질 및 지질의 열안정성을 검토한 결과 옥수수 가열 가공 처리에 따른 영양학적 평가의 기초자료를 얻을 수 있었다. 폭렬종 옥수수의 중성지지질은 93.5%에서 95.5%로 가열 처리 후 당지질 및 인지질의 상대적 함량이 감소하는 반면, 중성지질은 증가하였다. 전지질과 중성지질의 구성지방산은 가열처리 후 불포화 지방산이 상당히 증가하였고, 당지질과 인지질의 구성지방산은 가열처리 후 당지질의 경우 margaric acid가, 인지질의 경우 linoleic acid의 함량이 각각 증가하였다. 가열처리후 albumin분획은 lysine이 다소 증가하고, aspartic acid, arginine등은 급격히 감소하였으며, globuline분획도 이와 비슷하였다. zein분획은 glutamic acid, proline, leucine, alanine등을 적게 함유하였으며, 가열처리에 의해 함량변화가 거의 없었다. 한편, glutelin분획은 zein분획과 비교하여 lysine, histidine등을 많이 함유하는 반면, glutamic acid는 적었고, 가열처리에 의한 변화도 거의 없었다.
Mannose 기본구조에 galactose 치환체 비율이 4:1인 화학적 구조와 평균 분자량이 1,050 kg/mol인 LBG를 황산암모늄 침전법을 사용하여 분자량 크기별로 분획하여 분획물질들 간에 서로 다른 물리화학적 성질을 확인하였다. 황산암모늄을 맑은 용액에 천천히 첨가한 후 얻어진 침전물을 원심분리에 의해 모집, 탈이온수에 대한 투석 후 동결상태에서 건조시켜서 첫 번째 분획물을 얻었고 동일한 방법으로 각 단계별 분획물을 여섯 단계 까지 얻었다(F1-F6). 수득율은 F1 7.1% 부터 F6 6.35%까지 총 65%였다. 각 분획물들의 묽은 농도범위 0.05 g/dL 이하에서 Ubbelohde viscometer로 흐르는 시간을 측정하여 상대점성도, 비점성도, 유도점성도 및 본성점성도를 구하였으며 그 값은 F1:8.44, F2:4.59, F3:9.89, F4:8.80, F5:8.30, F6:8.10 dL/g이었다. F1과 F2 분획물이 갖는 본성 점성도 값은 기대치보다 작았고 그 원인은 단백질 성분을 포함하는 것으로 판단되어 함량을 측정한 결과 전체 단백질 함량 3.45%중에 F1, F2가 2.59%를 포함하고 있음을 확인하였다. 또한 고분자 물질의 용질-용매간의 상호작용과 응집상태에 의존하는 상태를 나타내는 k' (Hugg. Coeff.)값을 측정한 결과 값의 범위는 0.463-0.781이였고 점성도 값이 클수록 k'값이 커지는 경향을 나타내었다. 분획물들의 체류용량에 대한 RI detector 크로마토그램은 4개의 분획물들의 다당류는 6.0에서 9.0 mL에서 용리되었고 염 혹은 oligomeric sugar 성분은 10에서 11 mL에서 용리되었음을 나타내었다. 중량 평균 분자량, 수 평균 분자량, 회전 반경 및 본성 점성도 값들은 $c_p=0.5mg/mL$, dn/dc = 0.145의 RI 피크면적에 기초를 둔 OmniSEC 프로그램으로 계산되었다. 본성 점성도 값은 F3: 10.15, F4: 9.99, F5: 9.35, F6: 9.31이었고 $M_w$값 범위는 617-674 kg/mol, $M_n$값 범위는 324-423%, recovery 72.44-101.61%였다. Ubbelohde viscometer와 SEC로 측정한 각 분획물들의 본성 점성도 값을 비교한 결과, 측정에 사용한 기기 원리와 계산식의 영향으로 수치에는 미소한 차이가 있었으나 분획물 순서대로 본성점성도가 감소하는 경향은 동일하여 황산암모늄 침전법에 의한 LBG 분획화가 차별화 있게 잘 이루어졌음을 확인하였다. 화학물질에 대한 안정제 및 식품첨가제로 주로 사용되고 있는 LBG 복합물질을 단순물질로 분획화하여 균일한 성분의 물리화학적 성질을 연구한 것은 안정제 및 첨가제의 효과를 높이고 사용범위가 확대될 수 있을 것으로 기대된다.
Two ferredoxin (Fd) fractions, namely, Fd-A and Fd-B were isolated from Heliobacillus mobilis cells, and purified by ammonium sulfate fractionation, DEAE, gel-permeation and Phenyl-Superose column chromatographies under anaerobic conditions. Their absorption spectra were typical of 2[4Fe-4S] cluster type Fds with peaks at about 385 and 280 nm and a shoulder at about 305 nm. Their N-terminal amino acid sequences were determined, which showed that both of them contain a [4Fe-4S] cluster binding motif. Fd-B was sensitive to oxygen, and itsA$_{385}$ value decreased by about 50% in 2 h at 4$^{\circ}C$ under aerobic conditions. In contrast, $A_{385}$ of Fd-A was essentially unchanged up to 24 h under the same conditions.
Polygalacturonase (PG) produced by Botrytis cinerea in the culture broth containing citrus pectin as a carbon source was partially purified and characterized. PG was produced on a range of carbon sources such as starch, glycerol, cellobiose, and Na+-PAG with total activities of 34.8, 32.0, 29.2, 27.8 units, respectively. The specific activity was highest with 2316.7 units on Na+-PGA. Proteins of culture filtrate were concentrated with polyethylene glycol and acetone and applied to a hydroxyapatite column. Among three active fractions collected from the column, the reaction containing the highest PG activity was resolved by a Q-sepharose column. The active fraction from the Q-sepharose column was further purified by HPLC Mono Q column. The partially purified enzyme was analyzed by 10% sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. Among a few protein bands revealed, the amount of the protein of which molecular weight estimated to be 43 kDa coincided with the PG activity. The partially purified PG had optimal temperatures between 35~55$^{\circ}C$ and pH between 4.5~5.5.
A single particle analytical technique, called low-Z electron probe X-ray microanalysis (low-Z EPMA) was applied to characterize atmospheric particles collected in Busan, Korea, over a daytime period in Dec. 2001. The ability to quantitatively analyze the low-Z elements, such as C, N, and 0, in microscopic volume enables the low-Z EPMA to specify the chemical composition of individual atmospheric particle. Various types of atmospheric particles such as organics, carbon-rich, aluminosilicates, silicon oxide, calcium carbonate, iron oxide, sodium chloride, sodium nitrate, ammonium sulfate, and titanium oxide were identified. In the sample collected in Busan, sodium nitrate particles produced as a result of the reaction between sea salt and nitrogen oxides in the atmosphere were most abundantly encountered both in the coarse and fine fractions. On the contrary, original sea salt particles were rarely observed. The fact that most of the carbonaceous particles were distributed in the fine fraction implies that their origin is anthropogenic.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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