AP2/EREBP gene family consists of transcription factor genes with a conserved AP2 DNA-binding domain and is involved in various biological processes. AP2/EREBP gene families were identified through genome-wide searches in five Cucurbitaceae species including cucumber, wild cucumber, melon, watermelon, and bitter gourd, which consisted of more than 100 genes in each of the five species. The gene families were further divided into five groups including four subfamilies (ERF, DREB, AP2 and RAV) and a soloist group. Among the subfamilies, DREB subfamily which is known to be related to abiotic stress response was more analyzed and a total of 25 genes were identified as Cucurbitaceae homologues of Arabidopsis CBF/DREB1 genes which are important for abiotic stress-response and tolerance. In silico expression profiling using RNA-Seq data revealed diverse expression patterns of cucumber AP2/EREBP genes. AP2/EREBP gene families identified in this study will be valuable for understanding the stress response mechanism as well as facilitating molecular breeding in Cucurbitaceae crops.
The genetic effects of restraint stress challenge on HPA axis and the therapeutic effect of Boshimgeonbi-tang on the stress were studied with cDNA microarray analyses, RT-PCR on hypothalamus using an immobilization-stress mice as an animal model. Male CD-1 mice were restrained in a tightly fitted and ventilated vinyl holder for 2hrs once a day, and this challenge was repeated for seven· consecutive days. In the change of body weight it showed that the Boshimgeonbi-tang is effected recovery on weight loss caused by the immobilization-stress. Seven days later, total RNA was extracted from the organs of the mouse, body-labeled with $CyDye^{TM}$ fluorescence dyes and then hybridized to CDNA microarray chip. Scanning and analyzing the array slides were carried out using GenePix4000 series scanner and GenePix $Pro^{TM}$ analyzing program, respectively. The expression profiles of 109 genes out of 6000 genes on the chip were significantly modulated in hypothalamus by the immobilization stress. Energy metabolism-, lipid metabolism-, apoptosis-, stress protein, transcriptional factor, and signal transduction-related genes were transcriptionally activated whereas DNA repair-, protein biosysthesis-, and structure integrity-related genes were down-regulated in hypothalamus. The 58 genes were up-regulated by the mRNA expression folds of 1.5 to 7.9. and the 51 genes were down-regulated by 1.5 - 5.5 fold. The 11 genes among them were selected to confirm the expression profiles by RT-PCR. The mRNA expression levels of Tnfrsf1a (apoptosis), Calm2 (cell cycle), Bag3 (apoptosis), Ogg1 (DNA repair), Aatk (apoptosis), Dffa (apoptosis), Fkbp5 (protein folding) were restored to the normal one by the treatment of Boshimgeonbi-tang.
Nam, Bo-Hye;Park, Eun-Mi;Kim, Young-Ok;Kim, Dong-Gyun;Jee, Young-Ju;Lee, Sang-Jun;An, Cheul Min
한국패류학회지
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제29권3호
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pp.181-187
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2013
In order to investigate environmental stress inducible genes in abalone, we analyzed differentially expressed transcripts from a Pacific abalone, Haliotis discus hannai, after exposure to heat-, cold- or hyposalinity-shock by suppression subtractive hybridization (SSH) method. 1,074 unique sequences from SSH libraries were composed to 115 clusters and 986 singletons, the overall redundancy of the library was 16.3%. From the BLAST search, of the 1,316 ESTs, 998 ESTs (75.8%) were identified as known genes, but 318 clones (24.2%) did not match to any previously described genes. From the comparison results of ESTs pattern of three SSH cDNA libraries, the most abundant EST was different in each SSH library: small heat shock protein p26 (sHSP26) in heat-shock, trypsinogen 2 in cold-shock, and actin in hyposalinity SSH cDNA library. Based on sequence similarities, several response-to-stress genes such as heat shock proteins (HSPs) were identified commonly from the abalone SSH libraries. HSP70 gene was induced by environmental stress regardless of temperature-shock or salinity-stress, while the increase of sHSP26 mRNA expression was not detected in cold-shock but in heat-shock condition. These results suggest that the suppression subtractive hybridization method is an efficient way to isolate differentially expressed gene from the invertebrate environmental stress-response transcriptome.
Kim, Doh Hoon;Lee, Hyo Gun;Sp, Nipin;Kang, Dong Young;Jang, Kyoung-Jin;Lee, Hak Kyo;Cho, Byung-Wook;Yang, Young Mok
Animal Bioscience
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제34권1호
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pp.134-142
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2021
Objective: To understand the athletic characteristics of Thoroughbreds, high-throughput analysis has been conducted using horse muscle tissue. However, an in vitro system has been lacking for studying and validating genes from in silico data. The aim of this study is to validate genes from differentially expressed genes (DEGs) of our previous RNA-sequencing data in vitro. Also, we investigated the effects of exercise-induced stress including heat, oxidative, hypoxic and cortisol stress on horse skeletal muscle derived cells with the top six upregulated genes of DEGs. Methods: Enriched pathway analysis was conducted using the Database for Annotation, Visualization, and Integrated Discovery (DAVID) tool with upregulated genes in horse skeletal muscle tissue after exercise. Among the candidates, the top six genes were analysed through geneMANIA to investigate gene networks. Muscle cells derived from neonatal horse skeletal tissue were maintained and subjected to exercise-related stressors. Transcriptional changes in the top six genes followed by stressors were investigated using quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (qRT-PCR). Results: The inflammation response pathway was the most commonly upregulated pathway after horse exercise. Under non-cytotoxic conditions of exercise-related stressors, the transcriptional response of the top six genes was different among types of stress. Oxidative stress yielded the most similar expression pattern to DEGs. Conclusion: Our results indicate that transcriptional change after horse exercise in skeletal muscle tissue strongly relates to stress response. The qRT-PCR results showed that stressors contribute differently to the transcriptional regulation. These results would be valuable information to understand horse exercise in the stress aspect.
건조 스트레스는 작물의 생존과 생산성을 결정하는데 매우 중요한 환경요인이다. 본 연구의 목적은 배추에서 신규 건조 스트레스 저항성 유전자를 동정 검정하는 것이다. 건조 스트레스 하에서 생육된 지부('Chiifu') 배추를 이용하여 제작된 KBGP-24K 마이크로어레이 데이터 분석을 통해 738개의 건조 반응 유전자 중 기능은 밝혀져 있지 않지만, 건조 스트레스 하에서 발현량이 6배 이상 크게 증가한 1개의 유전자를 선발하여 BrDSR(B. rapa Drought Stress Resistance)이라 명명하였다. 이의 검정을 위해 내혼계배추('CT001')에서 BrDSR을 동정한 결과 438bp의 오픈리딩프레임과 145개의 아미노산을 가지고 있음을 확인하였고, 동정된 완전장의 cDNA 염기서열은 형질전환용 과발현 vector인 'pSL100' 제작에 이용하였다. BrDSR이 식물체에서 건조 스트레스 저항성을 향상시켜줄 수 있는지 분석하기 위해 담배 형질전환을 수행하였다. PCR과 DNA 블롯 분석으로 선발된 T1 세대 담배 형질전환체들을 대상으로 quantitative real-time RT PCR 분석을 수행한 결과, 형질전환체의 BrDSR 발현량은 비형질 전환체 보다 2.6배까지 증가하였다. 또한 건조처리 10일째 수행한 표현형 분석에서 BrDSR이 발현되는 담배 형질전환체들이 비형질전환체들 보다 우수한 건조 저항성을 보였다. 연구 결과들을 종합하면 BrDSR은 건조 스트레스 하에서 식물의 생장과 생존에 효과적인 저항성 기능을 할 것으로 기대된다.
The effect of PSOD expression on lacZ-sodP fusion (pYK4) was explored in Escherichia coli sodA sodB mutants (QC774) under oxidative stress. In this system, although .betha.-galactosidase activity was not fully induced by isopropyl-1-thio-.betha.-galactosidase (IPTG) and was inhibited by glucose, functional PSOD was under lacZ promotor control and was induced by IPTC, lactose, PQ and copper isons, finally, the results show that higher PSOD expression leel was consistently importnat in defending against superoxide radicals.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.125.2-125.2
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2003
Hepatic ischemia and reperfusion predisposes the liver to secondary stresses such as endotoxemia possibly via dysregulation of the hepatic microcirculation secondary to imbalanced regulation of vascular stress gene. In this study, we determined the effect of endotoxin on hepatic vasoregulatory gene expression in response to hepatic ischemia and reperfusion (I/R). Rats were subjected to 90 min of hepatic ischemia and 6 h of reperfusion. Lipopolysaccharide (LPS, 1 mg/kg) was injected intraperitoneally after reperfusion. (omitted)
Heat shock proteins (HSPs), one of the most highly conserved groups of proteins characterized to date, play crucial roles in protecting cells against environmental stresses, such as heat shock, salinity and oxidative stress. The glutathione S-transferases (GST) have important role in detoxification of oxidative stress, environmental chemicals and environmental stress. GST mRNA expression have been used as biomarkers on environmental stress. The purpose of this study was to investigate the death rate and the gene expression of Hsp70 and GST during air exposure and starvation. Results showed that, the expression of Hsp70 mRNA was significantly changed in the experiment groups, such as air exposure and starvation. GST mRNA expression was significantly increased in the experimental group of starvation. These results suggest that Hsp70 and GST were played roles in biomarker gene on the air exposure and starvation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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