Some characteristics of two forms of glucoamylase (glucan 1 A-$\alpha$-glucosidase, EC 3. 2. I. 3) purified from Aspergillus coreanus NR 15-1 were investigated. The enzymes were produced on a solid, uncooked wheat bran medium of A. coreanus NR 15-1 isolated from traditional Korean Nuruk. Two forms of glucoamylase, GA-I and GA-II, were purified to homogenity after 5.8-fold and 9.6-fold purification, respectively, judged by disc- and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular mass of GA-I and GA-II were estimated to be 62 kDa and 90 kDa by Sephadex G-1OO gel filtration, and 64 kDa and 91 kDa by SDS-polyacrylarnide gel electrophoresis, respectively. The optimum temperatures of GA-I and GA-II were 60$^circ$C and 65$^circ$C, respectively, and the optimum pH was 4.0. The activation energy (Ea value) of GA-I and GA-II was 11.66 kcal/mol and 12.09 kcal/mol, respectively, and the apparent Michaelis constants (K_{m}) of GA-I and GA-II for soluble starch were found to be 3.57 mg/ml and 6.25 mg/ml, respectively. Both enzymes were activated by 1 mM Mn^{2+} and Cu^{2+}, but were completely inhibited by 1 mM Nbromosuccinimide. The GA-II was weakly inhibited by 1 mM p-CMB, dithiothreitol, EDTA, and pyridoxal 5-phosphate, but GA-I was not inhibited by those compounds. Both enzymes had significant ability to digest raw wheat starch and raw rice starch, and hydrolysis rates of raw wheat starch by GA-I and GA-II were 7.8- and 7.3-fold higher than with soluble starch, respectively.
Itaconic acid has been produced during the cutivation of Aspergillus terreus DSMZ 5770 by using several starchs as carbon sources. The starchs were pretreated by partial hydrolysis with some acids at various pH conditions. The highest yield for the production of itaconic acid has been found when rice starch was pretreated by sulfonic acid at pH 2.5 and utilized for the cultivation. Using the results from shaker fermentation A. terreus has been cultivated in 2.5 L bioreactor for the production of itaconic acid and its on-line monitoring.
The objective of this study was to investigate the resistance starch(RS) content and in vitro hydrolysis index of roasted rice flours for low GI food development. This study used intermediate and high amylose rice varieties containing resistant starch. The intermediate amylose rice varieties 'Ilmi' and high amylose rice varieties, 'Goami4' and 'Dodamssal' were tested. The crude fat and crude protein contents of the rice cultivars ranged 2.12~3.08% and 6.2~7.63%, respectively. The RS and amylose contents of Dodamssal and Goami4 were higher than those of Ilmi. RS content of Ilmi was not significantly different before and after roasting treatment. The RS content of Goami4 before roasting was significantly higher than that of Dodamssal, but the RS content of Dodamssal was higher than that of Goami4 at temperatures above $210^{\circ}C$ of roasting. The soluble starch decreased after roasting in Goami4 and Dodamssal. Starch hydrolysis index (HI) and expected glycemic index (GI) were higher in order of Imi, Goami4 and Dodamssal regardless of roasting treatment. The sensory evaluation showed high scores in Dodamssal for color, flavor, bitter taste, bitter taste, sweet taste and sweetness at $240^{\circ}C$ for 10 min and $210^{\circ}C$ for 30 min. The results of this study indicate that Dodamssal was suitable varieties for powder meal with low GI.
Some structural characteristics of kidney bean starches (3 varieties : Pink kidney bean, Red kidney bean and White kidney bean) were investigated. The amylose content and the ${\beta}$-amylolysis limit of kidney bean starches were $32.6{\sim}34.5%$ and $69.9{\sim}71.0%$, respectively. The kidney bean amylopectin was composed of super long chain of ${\overline{DP}}$ above 60 ($5.28{\sim}12.62%$), B chain of ${\overline{DP}}$$45{\sim}60\;(29.85{\sim}33.65%)$ and A chain of ${\overline{DP}}\;10{\sim}20(22.94{\sim}29.85%).$ The chain distribution of kidney bean starches were different from variety to variety. The acid (2.2 NHCI) hydrolysis of kidney bean starches showed, as hydrolysis time increased, the patterns of three stages. The acid hydrolysis rate and iodine reaction of acid treated starches were different from variety to variety As acid hydrolysis time increased, the amylose and the ${\alpha}$-1.6-glucosidic linkage of amylopectin of amorphous state were gradually hydrolyzed. Finally, the chain of ${\overline{DP}}$ 20 of crystalline state was left in the acid treated starches.
To meet the need of protein feed and fine more efficient ways of returning waste to resources, we have carried out the study of the production of yeast for foods and feeds from the corn starch cake. The present study includes the method for acid-hydrolysis, the selection of yeast capable of utilizing hydrolyzate of the corn starch cake, and culture condition of Candida tropicalis under the liquid culture and the semisolid culture. Obtained results were as follows. 1. Hydrochloric acid was more excellent on the hydrolysis of the corn starch cake than sulfuric acid, and the yield of sugar was maximum, 57.2%, when the corn starch cake was hydrolyzed with 1.0% of hydrochloric acid at 2.0kg/cm for 30 minutes. 2. As the acid solution content was increased, more sugar was liberatedfrom the mixture, until the acid solution-substrate ratio reached 10:1. Beyond this point, no further increase was observed. To prepare the cultural medium of semisolid fermentation, a acid solution to substrate ratio of 3:1 appeared to be optimum. 3. Out of 6 yeast strains, Candida tropicalis had excellent growth on the hydrolyzate of the corn starch cake, and optimum temperature and initial pH were $30^{\circ}C$ and 6.0 respectively. 4. Optimum liquid medium of Candida tropicalis is ures 0.3%, potassium phosphate monobasic 0.15g and magnesium sulfate 0.04g in 100ml of the hydrolyzate of the corn starch cake, while optimum semisolid medium is ammonium chloride 0.4g, potassium phosphate monobasic 0.1%, magnesium sulfate 0.04%. 5. Candida tropicalis could assimilate the sugar in the hydrolyzate up to more than 88.75%, and a yield of dry yeast reached 19.13% to the corn starch cake under the liquid culture. 6. Compared to the that of the untreated corn starch cake, the cellulose content of the semisolid fermented cake decreased by 3.76% to 14.7%, whereas dry yeast contents increased by 13.89%.
Kim, Jong-Wook;Shin, Hae-Hun;Kim, Jung-Min;Kim, Young-Sook;Pyun, Yu-Ryang
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.26
no.6
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pp.819-823
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1994
For the development of rice-derived fat replacing ingredient, low dextrose equivalent (D.E.) malto dextrin was prepared by enzyme hydrolysis, and its physical and rheological properties were studied. The molecular sizes of rice maltodextrin were measured by gel permeation chromatography on Sephadex G-50. Gel permeation column chromatograms showed a large single peak, suggesting a limited hydrolysis, and the average degree of polymerization decreased from 72.8 for 3 D.E. maltodextrin to 48.7 for 6 D.E. maltodextrin. Cold water solubility of maltodextrin was increased with increasing D.E. value and its values ranged from 47.3% to 71.3%. 8% solution of rice maltodextrin showed pseudoplastic behavior. Flow behavior index was decreased as D.E. value was increased.
Improved amylases were developed from protoplast fusants of two amylase-producing Aspergillus species. Twenty regenerated fusants were screened for amylase production using Remazol Brilliant Blue agar. Crude enzyme extracts produced by solid state fermentation of rice bran were assayed for activity. Three variable factors (temperature, pH and enzyme type) were optimized to increase the amylase activity of the parents and selected fusants using rice bran medium and solid state fermentation. Analysis of this optimization was completed using the Central Composite Design (CCD) of the Response Surface Methodology (RSM). Amylase activity assays conducted at room temperature and 80℃ demonstrated that Aspergillus designates, T5 (920.21 U/ml, 966.67 U/ml), T13 (430 U/ml, 1011.11 U/ml) and T14 (500.63 U/ml, 1012.00 U/ml) all exhibited improved function making them the preferred fusants. Amylases produced from these fusants were observed to be active over the entire pH range evaluated in this study. Fusants T5 and T14 demonstrated optimal activity under acidic and alkaline conditions, respectively. Fusants T13 and T14 produced the most amylase at 72 h while parents TA, TC and fusant T5 produced the most amylase after 96 h of incubation. Response surface methodology examinations revealed that the enzyme from fusant T5 was the optimal enzyme demonstrating the highest activity (1055.17 U/ml) at pH 4 and a temperature of 40℃. This enzyme lost activity with further increases in temperature. Starch hydrolysis using fusant T5 gave the highest yield of glucose (1.6158 g/100 ml). The significant activities of the selected fusants at 28 ± 2℃ and 80℃ and the higher sugar yields from cassava starch hydrolysis over their parental strains indicate that it is possible to improve amylase activity using the protoplast fusion technique.
Thermal characteristics and granular morphology on enzyme-resistant starches (RS) formed during heat-moisture treatment (HMT) and retrogradation were investigated in high amylose corn starches, Hylon V and Hylon VII. With each treatment, both starches showed a similar trend in the increase of RS, but RS yield of Hylon VII is higher than that of Hylon V. Specially, RS was increased remarkably by HMT. It was more than doubled from 11.4% to 26.6% for Hylon V and from 15.9% to 32.8% for Hylon VII. A small increase of RS resulted from retrogradation. HMT on starch increased gelatinization temperature, decreased enthalpy. Retrograded starch exhibited small three endothermic transitions at $94^{\circ}C$, $110^{\circ}C$ and $140^{\circ}C$ in differential scanning calorimetry (DSC) thermogram due to the remained ungelatinized starch granules, dissociation of amylose-lipid complex and melting of recrystallized amylose, respectively. Enzyme-resistant starches isolated from native and heat-moisture treated starches showed a broad endothermic transition at higher temperature than native starch, while retrograded starch exhibited a very sharp peak at ${\sim}150^{\circ}C$ due to the melting of amylose crystallites. Under microscopy, starch granules with HMT was not changed, but retrograded starches showed the aggregates of starch granules because amylose leached out during gelatinization. Iodine stained RS clearly showed the differences in enzyme hydrolysis on the native, heat-moisture treated and retrograded starches.
Acid-modified starch was prepared by treating a warm aqueous starch suspension with dilute mineral acid$(0.2\;N\;HCl,\;45^{\circ}C,\;20\;mim{\sim}1\;h)$. The swelling power and solubility of acid-modified red bean starches increased and the changes occurred at tower temperature. According to gel chromatography of starches, the amylose and amylopectin moieties of red bean starches were not affected very much by hydrolysis conditions used. The elution profiles of soluble carbohydrate showed that the larger molecules were leached as the heating temperature increased. Total amounts of soluble carbohydrate were increased by acid-modification. The gel strength of acid-modified starches at each temperature increased, whereas cohesiveness decreased in acid-modified starch gels except at $85^{\circ}C$.
Based on its α-amylase activity at pH 5.0 and optimal pH of the crude enzyme, a strain (named B-5) with acid α-amylase production was screened. The B-5 strain was identified as Bacillus amyloliquefaciens through morphological, physiological, and biochemical characteristics analysis, as well as 16S rDNA phylogenetic analysis. Its α-amylase gene of GenBank Accession No. GU318401 was cloned and expressed in Escherichia coli. The purified recombinant α-amylase AMY-Ba showed the optimal pH of 5.0, and was stable at a pH range of 4.0-6.0. When hydrolyzing soluble starch, amylose, and amylopectin, AMY-Ba released glucose and maltose as major end products. The α-amylase AMY-Ba in this work was different from the well-investigated J01542-type α-amylase which also came from B. amyloliquefaciens. AMY-Ba exhibited notable adsorption and hydrolysis ability towards various raw starches. Structure analysis of AMY-Ba suggested the presence of a new starch-binding domain at its C-terminal region.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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