A new spore-less cultivar Lentinula edodes 'Daedam' was bred from monokaryotic strains of 'LE15401-24' and 'LE192118-10'. The optimum temperature for mycelial growth of 'Daedam' on potato dextrose agar was 22~25℃. Total cultivation period of the new cultivar, from inoculation to its first harvest, was 134 days, similar to that of the control cultivar 'Hwadam'. Total yield of 'Daedam' was 222g per 3kg substrate, and was lower than that of control cultivar(266.0g). The fruiting body of 'Daedam' had a thick and small pileus and a longer stem compare to control cultivar. As a result of a analyzing the productivity of 'Daedam' on the different substrate types, the biological efficiency was 26.7% in the 1.2kg cylindrical substrate(CS), which was higher than that of the 3kg rod-type substrate(RS). 'Daedam' had a similar yield compared to 'Hanacham' in first fruiting body production, but the cultivation period was 40 days shorter. Therefore, 'Daedam' can only harvest fruiting bodies once, it is thought that it can be used as spore-less oak mushroom cultivar for short-term cultivation instead of 'Hanacham' in mushroom farms.
Korean food waste, one of the abundantly available but environmentally problematic organic wastes in Korea, was utilized as solid-substrate by fungal strain Aspergillus niger ATcC 6275 for the production of enzymemixture containing amylase, cellulase and xylanase. The enzyme mixture can be used as high value-added animal feed. Solid-state fermentation method yielded a 84-fold enhancement in xylanase activity compared with submerged fermentation method. The effect of incubation period, incubation temperature, pH of medium, moisture content, inoculum size and enrichment of the medium with nitrogen and carbon sources were observed for optimal production of these enzymes The optimal amylase activity of 33.10 U/g, cellulase activity of 24.41 U/g, xylanase activity of 328.84 U/g were obtained at 8 days incubation with 50%(w/w) soy bean flake, with incubation temperature of $25^{\circ}C$, pH of 6.38, optimal moisture content of 55% and with inoculum size of $3.8{\times}10^6$spore/g. Enzyme activities were enhanced when ImM $CaSO_4$, 2% Malt extract and 2% galactose were added as mineral, nitrogen and carbon enrichment respectively.
The strain SL-387 which produces new inhibitors of aminopeptidase M, MR-387A and B, was isolated from a soil sample. The strain has branched substrate mycelia, from which aerial hyphae develop in the form of open spirals. Spore surface is smooth. Melanoid and soluble pigme- nts were observed. The isolate contains LL-diaminopimelic acid in its cell wall hydrolysate, and has no pectinolytic activity. The strain SL-387 is closely related to Streptomyces griseoruber and S. naganishii, but is different from these strains in some cultural and physiological characteristics. This strain was, therefore, designated as Streptomyces sp. SL-387. The effects of several carbon and nitrogen sources on the production of the inhibitor were examined. Among them, glucose, galactose, mannose, and xylose were effective as a carbon source and soybean meal, soytone, fish meal, and gluten meal were effective as a nitrogen source. The maximum peak of the inhibitor production in jar fermentor was obtained on the fifth day of culture.
Probing Streptomyces albus ATCC 21838 chromosomal DNA with a proline tRNA sequence resulted in an isolation of a putative integrating element in the 6.4-kb EcoRI fragment. It was found that Streptomyces lividans TK-24 transformed with a cloned DNA fragment on a multicopy plasmid, produced a higher level of spore pigment and mycelial red pigment on a regeneration agar. Furthermore, the transformant S. lividans TK-24 produced a markedly increased level of undecylprodigiosin in a broth culture. A nucleotide sequence analysis of the cloned region revealed several open reading frames homologous to the integrases of integrating plasmids or temperate bacteriophages, signal-transducing regulatory proteins with a conserved ATP-binding domain, oxidoreductases ($\beta$-ketoacyl reductase), and an AraC-like transcriptional regulator. To examine the effect on antibiotic production, each coding region was overexpressed separately from the other genes in the region in S. lividans TK-24 with; pJHS3044 for the expression of the signal-transducing regulatory protein homologue, pJHS3045 for the homologue of oxidoreductase, and pJHS3051 for the homologue of the AraC-like transcriptional regulator. Phenotypic studies of S. lividans TK-24 strains harboring plasmids for the overexpression of individual genes suggested the following effects of the genes on antibiotic production: The oxidoreductase homologue stimulated the production of actinorhodin and undecylprodigiosin, which was influenced by the culture conditions; the homologue of the AraC-like transcriptional regulator was the most effective factor in antibiotic production within all the culture conditions tested; the signal-transducing regulatory protein homologue repressed the effect due to the homologue of the AraC-like transcriptional regulator, however, the antibiotic production was derepressed upon entering the stationary phase.
Seol-Hwa Jang;Seyeon Kim;Shinhwa Kim;Hyunjung Chung;Sook-Young Park
Research in Plant Disease
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v.30
no.3
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pp.229-235
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2024
Conidial production is a critical factor in testing pathogenicity and studying the physiology and ecology of fungal pathogens. Therefore, selecting an appropriate condition and medium for consistent conidia production is essential. In this study, we investigated light conditions and suitable medium conditions using the slide culture method to establish optimal conditions for continuous spore acquisition of Bipolaris oryzae. Primarily, we observed conidial production using two B. oryzae isolates, CM23-042 and 23CM10, under two different light conditions: (1) consistent near-ultraviolet (NUV) with fluorescent light, and (2) a 12-hr shift of the NUV-dark cycle. Secondly, we examined conidial formation under seven different media on potato dextrose agar (PDA), V8-Juice agar, minimal medium (MM), sucrose-proline agar (SPA), rabbit food agar (RFA), rice bran agar (RBA), and rice leaf agar (RLA). Under consistent NUV light with fluorescent conditions, conidia were induced in both isolates, whereas conidia were not produced under other conditions after 7 days post-inoculation (dpi). Moreover, B. oryzae isolate CM23-042 produced the highest number of conidia in MM, while isolate 23CM10 yielded the highest number of conidia in PDA after 7 dpi. In summary, our data demonstrated that the consistent NUV light with fluorescent conditions were most conducive for conidia induction in B. oryzae. The selection of a medium for conidiation may vary depending on the B. oryzae isolates, but using MM and PDA or SPA and RFA medium could be effective for spore induction. These findings will contribute to improving conidiation according to the characteristics of collected isolates of B. oryzae.
Bacillus subtilis strains produce a broad spectrum of bioactive peptides. The lipopeptide surfactin belongs to one well-known class, which includes amphiphilic membrane-active biosurfactants and peptide antibiotics. Both the srfA promoter and the ComP-ComA signal transduction system are an important part of the factor that results in the production of surfactin. Bs-M49, obtained by means of low-energy ion implantation in wild-type Bs-916, produced significantly lower levels of surfactin, and had no obvious effects against R. solani. Occasionally, we found strain Bs-M49 decreased spore formation and the development of competence. Blast comparison of the sequences from Bs-916 and M49 indicate that there is no difference in the srfA operon promoter PsrfA, but there are differences in the coding sequence of the comA gene. These differences result in three missense mutations within the M49 ComA protein. RT-PCR analyses results showed that the expression levels of selected genes involved in competence and sporulation in both the wild-type Bs-916 and mutant M49 strains were significantly different. When we integrated the comA ORF into the chromosome of M49 at the amyE locus, M49 restored hemolytic activity and antifungal activity. Then, HPLC analyses results also showed the comA-complemented strain had a similar ability to produce surf actin with wild-type strain Bs-916. These data suggested that the mutation of three key amino acids in ComA greatly affected the biological activity of Bacillus subtilis. ComA protein 3D structure prediction and motif search prediction indicated that ComA has two obvious motifs common to response regulator proteins, which are the N-terminal response regulator receiver motif and the C-terminal helix-turn-helix motif. The three residues in the ComA N-terminal portion may be involved in phosphorylation activation mechanism. These structural prediction results implicate that three mutated residues in the ComA protein may play an important role in the formation of a salt-bridge to the phosphoryl group keeping active conformation to subsequent regulation of the expression of downstream genes.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.8
no.3
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pp.627-631
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2007
The factors affecting on sludge sedimentation are reported as F/M ratio, ingredient, composition of influent substrate, dissolved oxygen concentration, temperature, pH, filamentous bacteria and SRT. Aeration tank applying Bacillus sp. has an important role for maintaining the dominant microorganism species to make steady progress for spore growth affecting sedimentation. This research aims to investigate the affecting factor for the sedimentation in B3 system and RABC system with aeration tank applying tapered aeration. Extracellular polymeric substances(EPS), protein and carbohydrate can be produced for the extreme condition, that is down to 0.2 mg/L of dissolved oxygen in the aeration tank. This research found out the relation between the sedimentation and the EPS production, especially the ratio of protein/carbohydrate. The spore of Bacillus sp. was formed at the low DO then microorganisms produced EPS. The results showed that the production of EPS was 109.95 mgEPS/gSS at 1.6 mg/L of DO, however it was 131.77 mgEPS/gSS at 0.5 mg/L of DO. The sedimentation was affected by protein content in EPS and the ratio of protein and carbohydrate. The settleability of sludge was not affected by the ratio of protein/carbohydrate in B3 process, meanwhile settleability was affected by the ratio of it in RABC process, respectively.
This study was performed to investigate the inhibitory effect of Aloe vera on the growth and aflatoxin production of Aspergillus parasiticus. Spore suspension of A. parasiticus ATCC 15517 was inoculated on the yeast-extract sucrose broth containing 0.1%, 0.5%, 1.0% and 10.0% of chloroform extract of Aloe vera and then incubated at 30$\circ$C for 7 days. Mycelial weight was 160.7 mg/5ml in control group and decreased by the addition of the extract with no significance. The mold caused decrease in pH of the media with and without the extract. pH in the group contained 10.0% of the extract showed significantly higher value of 5.10 than that of 4.90 in control group (p<0.05). Fluorescence spots of four aflatoxins were observed under the 365 nm of UV light after extraction of the media and TLC. In the result of separation and determination by HPLC, the aflatoxins were produced in the order of $B_1, G_1, B_2$ and $G_2$ in all groups. Production of aflatoxins $B_1, B_2$ and $G_1$ was reduced by the addition of the extract and decreased as amount of the extract increased. The production of aflatoxins $B_1$ and $B_2$ significantly reduced when the media contained more than 1.0% of the extract, and $G_1$ more than 0.5%, respectively(p<0.05). No reduction and no significant difference among groups were observed in case of aflatoxin $G_2$. With the above result, the extract of Aloe vera reduced the production of aflatoxin by A. parasiticus though it did not inhibit mycelial growth.
Most of orange peels are disposed from orange juice manufacturing process. Thus, our purpose is to utilize these orange peels as fermentation substrate. We have investigated culture conditions and factors influencing citric acid production by an isolated strain, Asp. niger. Citric acid production was much higher in semisolid culture than in submerged culture and the particle size of ground orange peels was favored at 20 mesh in semisolid culture. The optimal pH and temperature were 4.5-5.0 and 3$0^{\circ}C$ respectively and the temperature cycling at 35$^{\circ}C$ for 20 hrs durig exponential phase, 1$0^{\circ}C$ for 4 hrs and 3$0^{\circ}C$ during stationary phase showed higher citric acid production than did at fixed temperature, 3$0^{\circ}C$. The addition of NH$_4$NO$_3$0.2%, MgSO$_4$7$H_2O$ 0.1%, methanol 2.5%, ethanol 1.5%, to culture medium promoted citric acid production but the addition of trace metal ions as nutrients had not effect on the acid production in orange peel medium. Under the optimal culture conditions, maximum yield of citric acid was 80.4% in solid medium. Almost of all original components of citrus peel was consumed by Asp. niger during fermentation.
El-Naggar, Moustafa Y.;El-Assar, Samy A.;Abdul-Gawad, Sahar M.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.5
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pp.468-473
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2009
The antibiotic meroparamycin was produced in the free culture system of Streptomyces sp. strain MAR01. Five solid substrates (rice, wheat bran, Quaker, bread, and ground corn) were screened for their ability to support meroparamycin production in solid-state fermentation. In batch culture, wheat bran recorded the highest antibacterial activity with the lowest residual substrate values. The highest residual substrate values were recorded for both ground corn and Quaker. On the other hand, no antibacterial activity was detected for rice as a solid substrate. The use of the original strength of starch-nitrate medium in the solid-state fermentation gave a lower antibacterial activity compared with the free culture system. Doubling the strength of this medium resulted in the increase in the activity to be equivalent to the free culture. The initial pH (7.0) of the culture medium and 2 ml of spore suspension (1 ml contains $5{\times}10^{9}spores/ml$) were the optima for antibiotic production. The water was the best eluent for the extraction of the antibiotic from the solid-state culture. Ten min was enough time to extract the antibiotic using a mixer, whereas, 60 min was required when shaking was applied. Semicontinuous production of meroparamycin using a percolation method demonstrated a more or less constant antibacterial activity over 4 runs ($450-480{\mu}g/ml$). The semicontinuous production of the antibiotic was monitored in a fixed-bed bioreactor and the maximum activity was attained after the fourth run ($510{\mu}g/ml$) and the overall process continued for 85 days.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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