Phenylmercuric 8-Oxyquinolinate의 광범위한 식물병원균에 대한 살균작용, 식물의 수분증산억제작용, 식물에 대한 약해작용, Gas작용 및 자외선에 의한 경시변화에 관해 실험을 행하였으며, 그 결과를 요약하면 다음과 같다. (1) 포자발아억제작용은 P.M.A.보다 약간 불량한 결과를 보이며, 균사생장억제작용은 P.M.A. 보다도 양호하였다. (2) 식물의 수분증산억제작용은 초기에는 8-Hydroxyquinoline sulfate가 P.M.Q.보다도 강한 억제작용을 나타내었으나, 끝에 가서는 반대로 P.M.Q가 Oxine sulfate보다도 강한 작용을 나타냈다. (3) 수도종자의 발아, 발근에 미치는 영향은 P.M.A. 보다 약해가 적었고 수도 및 대두의 유식물의 경엽(40ppm 처리)에도 약해가 없었다. (4) 식불병원균에 대한 Gas효과에 의한 살균력은 P.M.A.보다 적었다. (5) 자외선에 의한 영향은 생물학적인 변화와 화학적인 변화가 거의 일치하였으며 P.M.Q.는 P.M.A.보다도 훨씬 자외선에 안정하였다. 이상의 결과로 보아 본약제는 광범위한 식물병원균에 대해 살균작용을 가지고 있고 식물의 수분증산도 억제시키며 이화학적인 안정성을 가진 유망한 살균제가 될 것으로 생각된다.
본 연구는 면마과 가는쇠고사리[A. aristata (G. Forst.) Tindale]의 각 생육단계에 적합한 기내 대량증식법을 구명하기 위해 수행되었다. 포자를 1 / 8 - 1배로 조절한 MS 배지와 Knop 배지에 파종한 결과, Knop 배지에서 최종 발아율이 87.1%로 가장 높았다. 또한 전엽체를 배지의 종류, sucrose와 활성탄의 농도, 질소급원의 농도 및 비율을 다르게 처리하여 8주간 배양하였다. 실험의 결과, 가는쇠고사리의 전엽체는 sucrose 3%의 MS배지에서 $NH_4Cl$과 $KNO_3$의 비율을 20 : 40mM로 하여 총 농도를 60mM로 조절한 배지에서 증식이 가장 왕성하였다. 토양 종류에 따른 포자체 형성을 관찰한 결과, 상토:펄라이트를 2 : 1(v/ v)로 혼용하였을 때, 단위면적 당 발생한 포자체의 수가 73.8개 / $7.5{\times}7.5cm$로 가장 많았다. 반면 피트모스를 단용 및 혼용처리한 조건에서는 전엽체 발달 및 포자체 형성이 억제되었다. 따라서 가는쇠고사리는 MS 배지에서 전엽체를 증식시킨 다음 상토 : 펄라이트(v / v = 2 : 1) 혼합토양에서 포자체 형성을 유도하는 것이 효과적인 증식법으로 생각된다.
거저리 유충의 혈림프로부터 항진균성 단백질을 $C_{18}$ open column chromatography로 부분 정제하여 3종류의 효모형 진균류와 4종류의 사상형 진균류에 대한 항진균 활성을 측정하였다. 항균단백질은 대부분의 균류에 대해 생장억제의 활성을 보여주었으며 Saccharomyces cerevisiae와 Candida albicans에 대해서는 미약하나마 치사효과가 관찰되었다. 항진균단백질을 처리하였을 때, 달걀형의 효모형 균체모양이 둥글고 크게 변하였다. 사상형 진균류에 대해서는 생장억제 효과와 함께 균사체의 정단 부위가 심하게 변화한 형태가 관찰되었다. 이러한 결과로부터 거저리 유충의 혈림프에는 비교적 넓은 범위의 진균류에 대해 치사 또는 생장억제 기능을 가진 항진균 단백질들이 존재함을 알 수 있었다.
50종의 약용식물추출액을 공시하여 흰가루병에 대한 방제효과를 검정하고 생리활성 물질을 분리, 동정하였다. 공시약용식물중에서 대황의 물추출액은 200배의 희석농도에서도 100%의 포자발아억제 효과를 나타내서 가장 효과가 있었고, 대황의 물추출액 50배, 알콜추출액 100배, 조물질 500배, 표준품 1000배 희석농도까지도 60%이상의 발병억제효과가 있었으며, 조물질 500배액에서 2회 이상 살포하면 100% 발병억제 효과가 있었다. 그리고 조물질 100배 액에서는 약해가 있었으나 500배액에서는 약해가 없었다. 대황에 함유되어 있는 생리활성물질은 anthraquinone유도체인 1,8-dihydroxy-3-methyl-9,10-anthracenedione과 1,8-dihydroxy-3-methoxy-6-methyl-9,10-anthracenedione으로 잠정 동정되었다.
본 연구에서는 천연 항균물질의 개발 이용을 위해 황기 종자로부터 인체에 무해한 천연 항균 단백질을 ion exchange chromatography 및 gel filteration을 이용하여, 순수 분리하고 특성을 조사하였다. 황기종자로부터 추출한 천연 항균 단백질은 Aspergillus ocraceus, Penicillium expensum, P. digitatum, Botrytis cineria의 포자 발아 및 효모인 Candida albicans의 생육을 현저하게 저해하였으며 ammonium sulfate 포화도가 0.4일 때 단백질의 침전량이 122.6 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$로 가장 많았고 항균력도 15.2 mm로 가장 높게 나타났다. 강력한 cation exchange chromatography인 Mono-S를 이용하여 FPLC에서 단백질을 분획하였을때 첫번째 peak에서 분획된 단백질군이 항균력을 보였으며 Superose 12HR gel filteration column을 이용하여 2차 분획 하였을 때 분자량이 19 kDa되는 단일 단백질만을 순수분리 할 수 있었다. 전기 영동한 polyacrylamide gel위에 곰팡이 포자를 중층하는 bio autography로 19 kDa 단백질 band의 항균력을 직접 확인하였으며 분리된 항균 단백질의 아미노 말단의 아미 노산 22잔기를 sequencing하고 thaumatin 및 zeamatin 유사 단백질들과 상동성을 측정한 결과 50%내외의 homology를 나타내었다. 분리된 항균 단백질은 곰팡이 균사가 성장하는 선단부위에 가장 먼저 침투하여 channel을 형성함으로 osmolysis를 일으켜 곰팡이의 생육을 억제하는 것으로 추측할 수 있었다.
Pseudomonas fluorescens GL20 is a plant growth-promoting rhizobacterium that produces a large amount of hydroxamate siderophore under iron-limited conditions. The strain GL20 considerably inhibited the spore germination and hyphal growth of a plant pathogenic fungus, Fusarium solani, when iron was limited, significantly suppressed the root-rot disease on beans caused by F. solani, and enhanced the plant growth. The mechanism for the beneficial effect of strain GL20 on the disease suppression was due to the siderophore production, evidenced by mutant strains derived from the strain. Analysis of the outer membrane protein profile revealed that the growth of strain GL20 induced the synthesis of specific iron-regulated outer membrane proteins with molecular masses of 85- and 90 kDa as the high-affinity receptors for the ferric siderophore. In addition, a cross-feeding assay revealed the presence of multiple inducible receptors for heterologous siderophores in the strain. In order to induce increased efficacy and potential in biological control of plant disease, a siderophore-overproducing mutant, GL20-S207, was prepared by NTG mutagenesis. The mutant GL20-S207 produced nearly 2.3 times more siderophore than the parent strain. In pot trials of beans with F. solani, the mutant increased plant growth up to 1.5 times compared with that of the parent strain. These results suggest that the plant growth-promoting P. fluorescens GL20 and the genetically bred P. fluorescens GL20-S207 can play an important role in the biological control of soil-borne plant diseases in the rhizosphere.
포도 잎에서 병 발생을 경감하기 위한 수단으로 자외선의 활용 가능성을 확인하기 위하여, 자외선을 조사한 포도 잎에서 stilbene 화합물의 함량 변화와 Botrytis cinerea 생장의 차이를 조사하였다. 자외선의 조사는 포도 잎에서 resveratrol, piceatannol, piceid의 함량을 크게 증가시켰으며, 특히 resveratrol과 piceid는 B. cinerea의 포자 발아와 균사 생장을 억제하는 효과를 보였다. 자외선 조사에 의해 포도 잎에 축적되는 resveratrol과 piceid의 농도는 B. cinerea의 생장을 억제하기에 충분할 것으로 생각되며 자외선을 조사한 포도 잎에 B. cinerea의 포자를 접종하였을 때 괴사 반점의 형성이 억제되는 것으로 나타났다. 그러나 stilbene 화합물은 체내 이동성이 거의 없고 자외선에 직접 노출된 잎에서만 함량이 증가하므로 병 발생 경감의 수단으로 자외선을 활용하기 위해서는 수관 전체에 자외선을 균일하게 조사하는 방법의 도입이 필요해 보인다.
딸기육묘시 발생하는 탄저병의 1차 전염원을 밝히기 위해 본 시험을 수행한 결과, 육묘포의 토양과 주변 잡초중에는 탄저병균이 검출되지 않았으나 외관상 건전한 딸기의 모주를 습실처리하였을 경우에는 탄저병균이 검출되었다. 딸기묘에 탄저병균의 포자현탁액을 분무접종하였을때 발병은 되지 않았지만 습실처리하였을 경우, 접종 17일 후까지 발병이 되었고, 포자현탁액을 분무접종한 딸기잎을 주사전자현미경으로 관찰하였을 때 접종 7일 후 부착기만 관찰되었다 그러므로 딸기 탄저병은 육묘상에서 딸기 모주를 통해 전염이 되고, 탄저병균의 포자가 모주에 부착되어 있더라도 부적당한 환경조건에 의해 발병되지 않아 육안으로 판별이 불가능하며, 발아가 되었으나 침입이 완전히 이루어지지 않은 경우 부착기로 남아 침입을 시도하는 것으로 생각된다.
Antifungal activities of natural substrances from Eucalyptus darlympleana, E. globules, E. gunnii and E. unigera were evaluated against postharvest pathogens of kiwifruits, Botrytis cinerea, Botryosphaeria dothidea, and Diaporthe actinidiae, to screen effective natural substances as an alternative to chemical fungicides. Methanol extract of the Eucalyptus trees showed strong antagonistic activity against the pathogenic fungi. Among them, E. unigera and E. darlympleana effectively inhibited mycelial growth of the pathogens. For chemical identification of the antifungal substances, the methanol extract of E. darlympleana leaves was successively partitioned with $CH_2Cl_2$, EtOAc, n-BuOH and $H_2O$. Among the fractions, $CH_2Cl_2$ and n-BuOH showed strong inhibitory activity of mycelial growth of the fungi. Five compounds were isolated from EtOAc and n-BuOH fractions subjected to $SiO_2$ column chromatography. Two phenolic compounds(gallic acid and 3,4-dihydroxybenzoic acid) and three flavonoid compounds(quercetin, quercetin-3-O-$\alpha$-L-rhamnoside, quercetin-3-O-$\beta$-glucoside) were identified by $^1H$-NMR and $^{13}C$-NMR spectroscopy. Among them, only gallic acid was found to be effective in mycelial growth and spore germination of B. cinerea at relatively high concentrations. The results suggest that gallic acid can be a safer and more acceptable alternative to current synthetic fungicides controlling soft rot decay of kiwifruit during postharvest storage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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