본 연구는 미니 돼지와 일반 돼지(Duroc)의 동결융해 후 정자의 수정 능력을 비교하여 동결 보존체계의 기틀을 확립하고자 하였다. 정액 제조는 수압법으로 정액 채취하여 1차 희석하였다. 동결은 LEY (1차: 11% ${\alpha}$-lactose+egg yolk, 2차: 1차 동결액+glycerol+OEP) 동결액을 이용하여 동결을 실시하여 동결 보존하였다. 동결 정액의 융해는 0.5 ml straw를 각각 20, 37 및 $50^{\circ}C$ water bath에서 1분, 40 초 및 10초간 융해하여 세척 과정 후 BTS 5 ml를 첨가하여 $37^{\circ}C$에서 배양하였다. 정자 성상 검사로는 기형율(Rose Bengal staining), 첨체율(Chlortetra-cycline staining) 및 생존율(SYBR-14/PI staining)등을 배양 후 0, 3, 6, 9 및 12시간에서 검토하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 정자의 보존 시간에 따른 기형율은 동결 융해 직후 miniature pig가 $19.5{\pm}1.7%$ 로 Duroc의 $13.9{\pm}0.3%$에 비해 유의적으로 높았다. (p<0.05). 첨체 검사에서 수정능 획득이 일어나지 않은 F pattern은 동결 융해 후 miniature pig와 Duroc 종 정액이 $24.1{\pm}2.8%$와 $37.9{\pm}1.1%$로 Duroc 종에서 유의적(p<0.05)으로 높게 나타났으며, 동결 융해후 miniature pig와 Duroc 종의 AR pattern은 $21.1{\pm}1.6%$ 및 $15.5{\pm}2.2%$로 miniature pig가 유의적(p<0.05)으로 높게 나타났다. 융해 온도별 생존율에서는 20과 $37^{\circ}C$에서는 두 종간에서 유의적 차이는 없었으나, $50^{\circ}C$에서는 miniature pig가 $63.8{\pm}3.6%$로 $47.4{\pm}3.2%$인 Duroc 종에 비해 유의적(p<0.05)으로 높게 나타났다. 본 연구의 결과로부터 첨체율과 기형율에 대한 연구를 보완함으로써 miniature pig정액의 안정적인 동결 체계를 확립할 수 있을 것으로 판단된다.
The comparative morphology of epididymal spermatozoa in the lesser white-toothed shrew, Crocidura suaveolens, the Japanese white-toothed shrew, C. dsinezumi and the big white-toothed shrew, C. lasiura, belonging to the subfamily Crocidurinae was studied with the light and electron microscopes. The spermatozoa of C. lasiura and C. dsinezumi were characterized by the large acrosome, serrated inner acrosomal membrane, common apical body and fistulous proximal centriole with slightly dense electron granular materials, which are the charateristics of the Crocidurinae. The C. suaveolens, however, is distinguished from the two species mentioned above in the sperm morphology. That is, the spermatozoa possess not only the charateristic of the Crocidurinae such aw the large acrosome, but also those of the Soricinae, i.e. the smooth inner acrosomal membrane, wavy, finger-like and electron-dense apical body, and the solid proximal centriole filled with electron-dense materials. The results suggest that C. suaveolens has conserved characteristics of the Soricinae.
The spermatozoa of Leiocassis nitidus are relatively simple cells composed of a spherical head, a short midpiece, and a tail, as in most Siluriformes. The ultrastructure is characterized by the following features: Acrosome absent, as in most teleosts; around nucleus about $1.8\;{\mu}m$ long, with a deep nuclear fossa containing the proximal and distal centrioles and mitochondria. Two centrioles approximately $180^{\circ}$ from each other; 10 or more mitochondria surrounding the axoneme (with a 9+2 microtubular pattern), arranged in two layers in the postnuclear cytoplasm and separated from the axoneme by the cytoplasmic canal. Two lateral fins on the same plane as the two central microtubules; doublets 3 and 8, which are ultrastructural characteristics of the sperma tail unlike other siluroids laking the lateral fins.
Highly significant correlation (p < 0.001) was found between body weight and chest circumference of the local Katjang and cross-bred (local Katjang ♀ ${\times}$ German Fawn ♂ bucks under study. Increase in body length, chest circumference, depth of chest and height at withers (p < 0.001) reflected significantly the increase in body weight of the bucks. At the same age the cross-breds were bigger than the indigenous breed. No significant correlation was detected between body weight and scrotal circumference, or the latter with sperm counts in both buck types under study. However, the fluid portion of the semen increased in acidity and volume, the latter being significant (P < 0.01) in the local Katjangs, with increase in scrotal circumference. Although the effects of body condition on buck libido of both groups were not significant, the reaction time taken to mount the teaser females were significantly diminished (p < 0.001) with better body condition, at least in the local Katjangs. The reaction time gad an inverse, though not necessarily significant, relationship with semen characteristics such as volume, pH (in local Katjangs, p < 0.05), concentration, color (in cross-breds, p < 0.05), agglutination and mass movements in both phenotypes.
웅성생쥐에 일정량의 BPA를 15일과 30일간 투여한 결과, 총정자수는 15일과 30일 대조구가 각각 25.1$\pm$6.5$\times$$10^{6}$$m\ell$ 및 23.7$\pm$6.7$\times$$10^{6}$$m\ell$, BPA 15일과 30일 처리구가 각각 17.0$\pm$6.6$\times$$10^{6}$$m\ell$ 및 19.3$\pm$5.7$\times$$10^{6}$$m\ell$로서 처리구가 대조구에 비하여 유의적으로 낮게 나타났다(P<0.05). 생존율은 15일과 30일 대조구가 각각 34.4$\pm$12.1% 및 34.0$\pm$9.7%, BPA 15일과 30일 처리구가 각각 25.6$\pm$7.6%와 28.6$\pm$5.8%로서 처리구가 대조구에 비하여 낮게 나타났지만 유의적인 차이는 인정되지 않았다(P〉0.05). 기형율은 15일과 30일 대조구가 각각 11.7$\pm$3.5% 및 15.1$\pm$3.8%, BPA 15일과 30일 처리구가 각각 18.5$\pm$6.4% 및 22.2$\pm$4.5%로서 처리구가 대조구에 비하여 유의적으로 높게 나타났다(P〉0.05). 체중과 번식 기관 무게는 BPA 15일과 30일 처리구에서 처리구간에 차이가 인정되지 않았다. 장기무게중 간, 신장은 BPA 15일과 30일 처리구에서 처리구간에 차이가 인정되지 않았으나, 비장은 15일과 30일 대조구가 각각 0.116 $\pm$0.0169 및 0.117$\pm$0.016g, BPA 15일과 30일 처리구가 각각0.216$\pm$0.0789 및 0.222$\pm$0.1149로서 처리구가 대조구에 비하여 유의적으로 높게 나타났다(P<0.05).
유전자원을 동결 보존하는 것은 유전적인 개량과 우수한 종축의 재생산 및 멸종 위기종의 유전자 집단을 보존하는데 있어 중요한 방법으로 알려져 있다. 그러나 동결 유전자원의 대표적인 정액은 살아 있는 종축에서 채취하여 보존하고 있는데 동결자원은 그 수가 제한되어 있어 이용에 한계가 존재하고 있다. 이러한 단점을 극복하기 위하여 본 연구에서는 동결정액을 2가지 방법으로 융해하고 재 동결을 실시하여 그 정자의 특성을 CASA로 분석하고 생존성을 비교하였다. 일반적으로 사람의 정액은 재동결 과정을 극복하여 반복적인 동결 및 융해가 가능하다고 보고되었으나 한우 정액에 관한 재 동결 성적에 관한 연구는 자료는 찾아보기 힘들다. 본 연구에서는 칡소 2두, 흑우 1두, 백한우 2두 및 보증씨수소 1두의 동결정액을 이용하여 재 동결에 관한 연구를 실시하였으며 개체에 따라 29.7%에서 46.6%의 생존율을 얻었다. 2차 동결 방법에 있어서 생존율은 $5^{\circ}C$에서 융해하는 방법이 $37^{\circ}C$ 융해방법보다 더 높으며 변이가 낮은 것으로 관찰되었다. 그럼에도 불구하고 2가지 방법에 의한 재동결 기법은 체외 수정이나 OPU 유래 수정란 생산을 위하여 한우의 증식에 적용할 수 있을 것으로 보이며 추후 수정란 생산에 관한 연구에 도움이 될 것으로 판단된다.
Cryopreservation of boar semen is continually researched in reproductive technologies and genetic resource banking in breed conservation. For evaluating the boar semen quality, sperm motility (MOT) is an important parameter because the movement of spermatozoa indicates active metabolism, membrane integrity and fertilizing capacity. Various researches have been trying to improve the quality of semen Post-thawed in boar. Recently, polymorphism (g. 35756 T>C) of Estrogen Receptor 1 (ESR1) gene reported to be significant association with MOT. This study was conducted to evaluate the ESR1 gene as a positional controlling for motility and kinematic characteristics of post-thawed boar semen. To results, The g.35756 T>C SNP of ESR1 was significantly associated with frozen semen motility and kinematic characteristics. The g.35756 T>C SNP was high significantly associated with MOT, VCL, VSL and VAP (p<0.001). The SNP was also significantly associated with ALH (P<0.05). Therefore, we suggest that the g. 35756 T>C polymorphism in the intron 1 region of the porcine ESR1 gene could potentially be applied in frozen semen programs to improve MOT trait, but only after validation in other populations.
Cryopreservation of boar semen is continually researched in reproductive technologies and genetic resource banking in breed conservation. For evaluating the boar semen quality, sperm motility (MOT) is an important parameter because the movement of spermatozoa indicates active metabolism, membrane integrity and fertilizing capacity. Various researches have been trying to improve the quality of semen post-thawed in boar. Recently, polymorphism (g.158T>C) of phospholipase C zeta (PLCz) gene reported to be significant association with MOT. This study was conducted to evaluate the PLCz gene as a positional controlling for motility and kinematic characteristics of post-thawed boar semen. To results, The g.158 T>C SNP of PLCz was significantly associated with frozen semen motility and kinematic characteristics. g.158 T>C SNP was high significantly associated with MOT, VCL, VSL and VAP (p<0.0001, p=0.0002, p<0.0001 and p<0.0001, respectively). Therefore, we suggest that the intron region of the porcine PLCz, may be used as a molecular marker for Duroc boar post-thawed semen quality, although its functional effect was not defined yet. Whether the association is due to the candidate gene or not require further verification. Thus, it will be of interest to continue association studies in the regions surrounding those genes.
A study was conducted to determine the effect of prostaglandin $F_2$ alpha ($PGF_2$ alpha) on the reaction time and seminal characteristics of buffalo bulls. Semen was collected from three Murrah bulls in three periods: pre-treatment, treatment and post-treatment. During the treatment period each bull was administered 2 ml $PGF_2$ alpha (Synchrocept, Fenprostalene) im, 1 hour prior to semen collection. In the post-treatment, semen was collected 7 days after the last injection of $PGF_2$. Semen samples were evaluated immediately after collection. Pre-collection injection of $PGF_2$ alpha has no significant effect on reaction time, semen volume, percentage motility, sperm concentration and total number of sperms per ejaculate. Fluctuations in semen color and consistency were observed. There is a significant (p<0.05) increase in the mean percentage of normal spermatozoa during the treatment and post treatment periods. Likewise, administration of PG results into a significant (p<0.05) rise on the average percentage of live sperms but this effect was not manifested in the post-treatment period. Improvement in mass activity was observed during the treatment and post-treatment periods.
The ultrastructures of germ cells and the functions of Leydig cells and Sertoli cells during spermatogenesis in male Kareius bicoloratus (Pleuronectidae) were investigated by electron microscope observation. Each of the well-developed Leydig cells during active maturation division and before spermiation contained an ovoid vesicular nucleus, a number of smooth endoplasmic reticula, well-developed tubular or vesicular mitochondrial cristae, and several lipid droplets in the cytoplasm. It is assumed that Leydig cells are typical steroidogenic cells showing cytological characteristics associated with male steroidogenesis. No cyclic structural changes in the Leydig cells were observed through the year. However, although no clear evidence of steroidogenesis or of any transfer of nutrients from the Sertoli cells to spermatogenic cells was observed, cyclic structural changes in the Sertoli cells were observed over the year. During the period of undischarged germ cell degeneration after spermiation, the Sertoli cells evidenced a lysosomal system associated with phagocytic function in the seminiferous lobules. In this study, the Sertoli cells function in phagocytosis and the resorption of products originating from degenerating spermatids and spermatozoa after spermiation. The spermatozoon lacks an acrosome, as have been shown in all teleost fish spermatozoa. The flagellum or sperm tail of this species evidences the typical 9+2 array of microtubules.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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