Bifidobacteria have been known as beneficial inhabitant of human intestine. Therefore, bifidobacteria began to be noticed as a starter in the manufacture of fermented dairy products. Perhaps the key for effective use of bifidobacteria in commercial dairy products is the maintenance of viability of bifidobacteria during large scale preparation of starter culture and distribution of products. So we tried to obtain the bifidobacteria having suitable characteristics for using as a starter in the manufacture of fermented dairy products. Among bifidobacteria isolated from Korean, E-4 strain showed the highest resistance to oxygen. To know whether the selected strain will be fit for manufacture of fermented dairy products, we also investigated resistance of the selected strain to HCI. The selected strain, E-4, was more resistant to environmental stresses such as oxygen, H2O2 and HCI than Bifidobacterium longum known as resistant strain to environmental stresses. According to carbohydrate fermentation patterns and morphological characteristics, E-4 strain was identified as B. bifidum. In conclusion, the selected strain, E-4, was thought to be fit for manufacture of fermented dairy products.
A mutant strain having increased productivity of both enzymes, protease and amylase, was obtained from A. flavus KU 153, isolatd from South Korea for its high protease production by successive ultra-violet light irradiation, Two glucoamylases from the mutant strain selected were purified from wheat branculture by successive salting out, followed by dialysis and column chromatography, and their characteristics were compared with those of the wild strain. Glucoamylase production of the mutant selected was increased about 3.3 times compared with the wild strain, and 2.1 times compared with the parental strain, ${\alpha}-amylase$ activity of the mutant selected was about 2 times hugher than that of the wild strain or the parental strain. Protease and cellulase productivities of the muant selected were all alike compared with those of the highly proteolytic mutant, the parental strain. Therefore, it was considered that the back mutation on the protease production did not occurred in the formation process of the glucoamylase producing mutant. Total activities of glucoamylase I and II from the mutant selected were 2.86 and 3.65 times higher compared with those from the wild strain, respectively. Considering the optimal pH-thermal stability and Km-Vmax value of glucoamylase I and II from both strains, wild and mutant, it was deduced that the characteristics of glucoamylase I and II from the wild strain did not altered during the mutation process. Therefore, it was concluded that the selected mutant did not induce the formation of another glucoamylase isozyme, or the changes in the characteristics of the glucoamylase, but induce the productivity of the same glucoamylase I and II by the action of regulatory gene.
The pumb gene encoding a basic amino acid transport protein in Neurospora crassa could be cloned by using a mutant strain defective in pmb gene as a host strain, using a negative selection on the media containing amino acid analogue canavanine. To select positive transformants of the genes for cloning, an auxotrophic marker (his-2) was added to a pmb mutant strain by mating ; a triple mutant (pmn : pmb : his-2) was constructued by crossing a strain defective in basic amino acid transport system (# 1683-bat um 535 "A") to a double mutant strain defective in neutral amino acid transport and histidine production (mitrol : his-2 "a"). Crossing was performed on synthetic crossing (SC) media containing histidine. The pmn : pmb and pmn :pmb : his-2 strains were selected among the progeny colonies from crosses on plates containing 5- .mu.g/ml para-fluoro-phenylalanine (PFPA), 200 .mu.g/ml canavanine, and 500 .mu.g/ml histidine. The selected colonies were cultured on minimal media with or without histidine for discarding pmn : pmb strain, because the pmn : pmb : his -2 strain grows only on histidine containing media. The pmn :pmb : his-2 strain selected can be used as a host strain for the cloning of the pmb and the pmn genes from a Neurospora genomic library by means of positive selections.
Genetic variability was monitored by random amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction (RAPD-PCR) in dicofol-susceptible (S), dicofol-resistant (R) and its reverse-selected (RS) strains of two-spotted spider mite, of Tetranychus urticae. Before the reverse-selection, RS strain, selected reversely from R strain, was 23-fold resistance ratio at {TEX}$LC_{50}${/TEX} to S strain. The resistance was started to in incline slowly to the resistance level of S strain after one year, and the resistance ratio was 4-fold in the 7 years after then. PCR-amplification of T. urticae DNA showed polymorphism in the amplifications with 12 primers in 100 kinds of arbitrary DNA sequences. RAPD amplification with primer OPR-12 (5`-ACAGGTGCGT-3`) showed amplified bands at 1,000 base pair in the S-and RS-strain, and at 350 base pair in R-strain. The results of polymorphism are genetic variabilities derived from development and selection of resistance in each strain. The peculiarly amplified fragments were guessed to participate in dicofol resistance. From the analysis of genetic similarity, it is inferred the gene composition of S-and RS-strain is much closer than that of R-strain.
The german cockroach, Blattello germanica L, populations were successively selected with dlchlowos for 11 generations. The resulting selected shin was investigated the resistance development. the cross resistance and the esterase actim@. In the dichlowos-selected(Rd) strain, the values of LCs increased 858 times more compared to the susceptible (S) strain. In the dich!o~vos-selected (Rd) strains, the cross-res~stance to chlorpyrifos, propoxur, fenvalerate and pemethnn showed 3.35. 4.09. 283 and 2.00 times. Esterase.activity of the Rd strain showed 1.33 times higher than that of the S strain in the filter paper test. In comparison of zymogram paitems of the estemse isoryme by thin agarose gel electrophoresis against the german cockroach, the S strain was separated by 4 bands uf esterase 3, 5, 6 and 8 bands and the Rd strain was separated by 6 bands of esterase 1, 2, 4, 5, 7 and 8 bands, and the resistant mechanisms of the Rd strain were considered as the 4 bands of esterase-1.2.4 and 7 bands except the common 2 bands of esterase.6 and 8 bands.
Mutational experiments were performed to improved to improve the protease productivity of Aspergillus flavus KU 153, which is selected among the wild strains. A UV-induced mutant strain having high protease productivity was obtained by the use of the clear zone method as a simple criterion for a primary screening test. Neutral and alkaline protease activities of hte mutant strain were higher than 1.8 times, comopared with those of the parental strain, respectively, while in the case of acid protease, it was 2.7 times. The mutant strain selected was more powerful in the production of cellulase and amylase, as well s protease in wheat bran, compared with those of the parental strain. protease production of the parental strain has reached maximum level at 3 days culture, while alkaline nad neutral protease production of the mutantstrain has reached at 2 days culture. On the other hand, the mutant strain formed the spore slowly, compared with the parental strain. Column chromatography of the neutral protease on DEAE-Sephadex A-50 showed that the mutant strain was not induced the formation of another neutral protease isozyme, but induced the variation in the function of regulatory gene.
This experiment was carried out to research for the use of the mycelium and enzyme on the production of fermented feed. Among 354 strains isolated from natural sources, 3 strains of useful yeasts were selected and identified, and the cultural conditions of these strains were examined. The results obtained were as follows. 1) The strian No.55, No.112 and No. 340 selected were identified Endomycopsis fibuliger, Endomycopsis javanensis and Candida tropicalis, respectively. 2) The optimum pH and sugar concentration of the medium for the strain No.55, No.112 and 340 selected was around pH 6.5and Bllg.10.deg.. The optimum temperature for the growth of the strain No.55 and No.112 selected was 30.deg.C and was 25.deg.C of strain No.340. 3) The strain No.55 and No.112 were grown exceedingly well on the media containing 0.1 percent of (NH/sub 4/)/sub 2/SO/sub 4/.
The green peach aphid(Myzus pericae Sulzer) was selected over 20 generations with cypermethrin and pirmicarb, respectively. The resulting resistant strains were tested to inverting-ate the development of insecticide resistance and cross-resistance to some insecticides in the laboratory. The development of insecticide resistance against green peach aphid at the 20th selected generation was greatly varied with the insecticides: 20.5 fold for cypermethrin and 3.2 fold for pirimicarb compared with the parent strain. The cypermethrin selected strain exhibited cross resistance to acephate and pirimicarb, and pirimicarb selected strain to acephate and cypermethrin, respectively. Demeton-S-methyl, however, has not been shown cross-resistance by the selected strains.
This study was carried out to isolate and characterize the mutant strains of Schwanniomyces castellii NRRL Y-2477. Mutants were prepared with the treatment of ethyl methane sulfonate. 2-deoxy-D-glucose resistant mutants were isolated and two mutants were selected based on their high production of amylolytic enzymes and their ability to ferment starch. The mutants selected had higher a-amylase and glucoamylase activities than the wild type strain from several other carbon sources. Especially, it was revealed that mutant strain M-9, when cultured in the presence of glucose as a sole carbon source, shows relatively high activities of a-amylase and glucoamylase compared to those of the wild type strain. In result, this mutant strain can be considered as a constitutive producer of amylolytic enzymes. To compare the ethanol production ability of wild type strain and of mutant strains selected, an alcohol fermentation was carried out using 100 g/l soluble starch. Mutant strain M-9 did not improve the direct alcohol fermentation of starch, despite its excellent amylolytic activities performance. On the other hand, mutant strain M-6 produced 37.9 g/l (4.8%, v/v) ethanol by utilizing about 82% of substrate.
The diamondback moth (Plutella xylostella L.) was selected over 24 generations with fenvalerate. The resulting resistant strain was tested to study development of insecticide resistance and cross resistance to some insecticides in the laboratory. Insecticide resistance of diamondback moth at the 24th generation devleoped 66.2 fold compared to the parent strain for fenvalerate. The fenvalerate selected strain exhibited 145 fold, a high level of cross resistance to deltamethrin, and also showed 17.4-45.0 fold cross resistance to alphamethrin, cypermethrin, fenvalerate, permethrin, and tetramethrin in the pyrethroid insecticides. The fenvalerate selected strain showed 2.5-4.3 fold, low cross resistance to diazinon, dichlorvos, EPN, BPMC, cabaryl, and methomyl. However, it did not show cross resistance to acephate, fenitrothion, phenthoate, and carbofuran.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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