Prolactin has been reported to be present in the tear film of humans and prolactin-like immunoreactivity has been detected by immunofluorescence in acinar cells of the lacrimal glands of humans and rats. The present study was aimed at clarifying the intracellular distribution of the prolactin-like immunoreactivity, using the electron microscope immunogold technique. The lacrimal gland acinar cells have two types of secretory granules: 1) Secretory granules containing flocculent materials irregularly shaped and are often coalesced. 2) Secretory granules are fairly round and contain homogenous materials of a moderate electron density. The density of the granular content varies even within a single cell. We found prolactin-like reactivity in secretory granules, some smaller cytosolic vesicles, Golgi cisternae and nuclei in acinar cells from intact glands of rat. Our present results are consistent with the conclusion that prolactin is present in lacrimal cells. The presence of prolactin reactivity in the nucleus suggests that prolactin may be a regulatory factor modulating gene expression.
사람 무릎관절의 윤활막을 대상으로 정상과 퇴행성관절염 시의 윤활막의 변화와 tenascin의 발현을 면역전자현미경적 방법으로 비교, 관찰한 결과 다음과 같은 결과를 얻을 수 있었다. 1. 정상의 윤활막과 비교하여 퇴행성관절염 시에 윤활막이 두터워지는 것은 주로 윤활분비세포의 수적인 증가에 의한 것임을 알 수 있었다. 2. Tenascin에 대한 면역금의 관찰 결과 정상의 윤활막을 구성하는 세포에서는 면역금의 표지가 관찰되지 않았다. 3. 퇴행성관절염 시 윤활막의 윤활분비세포 과립세포질 세망에서 면역금의 표지가 관찰되어 tenascin의 분비세포가 윤활분비세포임을 확인할 수 있으며, 윤활세포 사이의 바탕질의 아교섬유에서도 tenascin의 표지가 관찰되었다. 이상의 결과를 종합해 보면, 퇴행성관절염 시에 윤활막이 두터워지는 것과 병변의 진행과정에, 윤활분비세포의 수가 증가와 tenascin의 발현 증가가 관련성이 있는 것으로 생각된다.
The tremendous changes of uterine endometrium are observed during early pregnancy and protease and their inhibitors are involved in regulation of cell proliferation and remodeling of the tissues through remodeling the extracellular matrix (ECM). Some of the proteases and protease inhibitors have been suspected to a factor in endometrial changes but many parts of their expression profiles and the physiological roles are not uncovered. To evaluate the functional roles of them, in this study the expression profiles of proteases and protease inhibitors were analyzed using real-time quantitative PCR analysis. Mmp9 (matrix metalloproteinase 9) mRNA levels peaked on day 4 at the time of implantation. On the other hand, Ela2 (neutrophil elastase, NE) mRNA levels were peaked on day 2 of pregnancy. Its expression were decreased until day 4 of pregnancy but increased rapidly until day 7 of pregnancy and decreased again. NE inhibitor Slpi (secretory leukocyte protease inhibitor, SLPI) mRNA levels were related with the implantation stage and with the levels of Ela2. At the time of implantation the expression levels of Slpi mRNA were about 5 times higher than the Ela2 mRNA in the uterus. In the implantation stage embryos, Mmp9 specific mRNA was only detected at the blastocyst. On the other hand, the expression level of SLPI was higher than that of the Ela2 mRNA at blastocyst and 4.5 day p.c. embryos. Based on these results it is suggested that MMP9, SLPI, and NE have important physiological role in embryo implantation both in uterus and embryos.
Background: Although microbial infection is direct cause of periodontal disease, various environmental factors influence the disease severity. Aging is considered a risk factor for oral diseases, with the prevalence of periodontal diseases increasing with age. Moreover, senescence-associated secretory phenotype (SASP) expressed in age-related diseases is a key marker of chronic inflammation and aging phenotypes. Therefore, this study aimed to understand the relevance of senescent cells to periodontal health and disease, investigate the possibility of regulating the expression of aging- and osteolysis-related factors in gingival fibroblasts, and investigate the effect of senescence induction in gingival fibroblasts on osteoclast differentiation in mouse bone marrow-derived macrophages (BMMs). Methods: After stimulation with 400 nM hydrogen peroxidase, human gingival fibroblasts (HGFs) were examined for senescence-associated β-galactosidase. Western blot and enzyme-linked immunosorbent assays were performed to assess the expression of SASP. Osteoclast formation was assessed in BMMs using a conditioned medium (CM) from hydrogen peroxide-stimulated HGFs. Osteoclastic differentiation was investigated using tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) staining and activity. Data analysis was performed using SPSS version 25.0. Results: The expression of senescence-related molecules, including p53, p16, and p21, and the expression of osteolytic factors, including IL-6, IL-8, and IL-17, were found to be significantly higher in the hydrogen peroxide-stimulated HGF than in the control group. Regarding the indirect effects of senescent gingival cells, the number of osteoclasts and TRAP activity increased according to the differentiation of BMM cultured in CM. Conclusion: Our results on the of between osteolytic factors and cellular senescence in gingival fibroblast cells helped to reveal evidence of pathological aging mechanisms. Furthermore, our results suggest that the development of novel therapies that target specific SASP factors could be an effective treatment strategy for periodontal disease.
Cyclooxygenase (COX) is an enzyme involved in the conversion of arachidonic acid to prostaglandins (PGs), and exists in two forms, COX-1 and COX-2. COX has been reported to be involved in early implantation by secretion of PGs which causes permeability of vessels and reaction of decidual cells around the implantation site. Recently, in mice and sheep studies, COX-1 and COX-2 expression in the endometrium has been reported to be different according to implantation and stages of the estrous cycle, but expression of COX-1 and COX-2 in human endometrium during the menstrual cycle has not yet been established. The purpose of this study was to observe the variances of COX-1 and COX-2 expression by immunohistochemical staining in endometrial samples obtained from human hysterectomy specimens and biopsies of women of reproductive age according to different stages of the menstrual cycle. Also, we attempted to observe COX-1 and COX-2 expression in the epithelial and stromal cells of the endometrium obtained during the mid-secretory phase, which were cultured separately. COX-2 showed a cyclic pattern of expression according to the different stages of the menstrual cycle and was strongly expressed particularly at the mid-secretory phase which corresponds to the time of implantation. However, COX-1 tended to be increased in the early proliferative, and mid- and late secretory phases, but was also expressed in the whole menstrual cycle showing no particular pattern. In the separately cultured cells COX-1 was expressed in epithilial cells and COX-2 in the stromal cells. The above results suggest that since COX-2 is expressed at the same time as implantation and cultured cells display a specific secretory pattern, COX-2 has inductive endocrine enzyme properties and has an important effect on endometrial cells during implantation. Also, COX-2 expression in endometrial cells may be utilized as a useful marker of endometrial maturation.
A recombinant human growth hormone(hGH) was expressed as a secretory product in the yeast Saccharomyuces cerevisiae. There different leader sequences derived from the mating fac-tor $\alpha$1(MF$\alpha$1) inulinase and invertase were used to direct the secretion of hGH into the extracel-lular medium. Among three leader sequences tested, the inulinase leader sequence was found to be the most efficient in the secretory expression of hGH. In contrast, no hGH was detected in the ex-tracellular medium with the invertase leader sequence. After 48 h shake-flask culture, the yields of hGH secreted into th emedium by the invertase. MF$\alpha$1 inulinase and invertase leader sequences were approximately 0, 0.3 and 0.9 mg/L, respectively. The secretion efficiencies were also found to be 0, 3.8 and 13% for the invertase , MG$\alpha$1 and inulinase leader sequences, respectively.
Kim, Yoo-Kyeong;Yu, Dae-Yeul;Kang, Hyun-Ah;Yoon, Sun;Chung, Bong-Hyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권2호
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pp.196-200
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1999
A recombinant human $\alpha_{s1}$-casein was expressed as a secretory product in the yeast Saccharomyces cerevisiae. Three different leader sequences derived from the mating factor $\alpha$l (MF$\alpha$l), inulinase, and human $\alpha_{s1}$-casein were used to direct the secretion of human $\alpha_{s1}$-casein into the extracellular medium. Among the three leader sequences tested, the native leader sequence of human $\alpha_{s1}$-casein was found to be the most efficient in the secretory expression of human $\alpha_{s1}$-casein, which implies that the native leader sequence of human $\alpha_{s1}$-casein might be used very efficiently for the secretory production of other heterologous proteins in yeast. The recombinant human $\alpha_{s1}$-casein was proteolytically cleaved as the culture proceeded. Therefore, an attempt was made to produce human $\alpha_{s1}$-casein using a S. cerevisiae mutant in which the YAP3 gene encoding yeast aspartic protease 3 (YAP3) was disrupted. After 72 h of culture, most of the human $\alpha_{s1}$-casein secreted by the wild type was cleaved, whereas more than 70% of the human $\alpha_{s1}$-casein secreted by yap3-disruptant remained intact. The results suggest that YAP3 might be involved in the internal cleavage of human $\alpha_{s1}$-casein expressed in yeast
Trichomoniasis caused by the parasitic protozoan Trichomonas vaginalis is the most common sexually transmitted disease in the world. Dendritic cells are antigen presenting cells that initiate immune responses by directing the activation and differentiation of naive T cells. In this study, we analyzed the effect of Trichomonas vaginalis-derived Secretory Products on the differentiation and function of dendritic cells. Differentiation of bone marrow-derived dendritic cells in the presence of T. vaginalis-derived Secretory Products resulted in inhibition of lipopolysaccharide-induced maturation of dendritic cells, down-regulation of IL-12, and up-regulation of IL-10. The protein components of T. vaginalis-derived Secretory Products were shown to be responsible for altered function of bone marrow-derived dendritic cells. Chromatin immunoprecipitation assay demonstrated that IL-12 expression was regulated at the chromatin level in T. vaginalis-derived Secretory Products-treated dendritic cells. Our results demonstrated that T. vaginalis- derived Secretory Products modulate the maturation and cytokine production of dendritic cells leading to immune tolerance.
Jeong, Ji Young;Son, Younghae;Kim, Bo-Young;Eo, Seong-Kug;Rhim, Byung-Yong;Kim, Koanhoi
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제19권6호
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pp.549-555
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2015
We attempted to investigate molecular mechanisms underlying phenotypic change of vascular smooth muscle cells (VSMCs) by determining signaling molecules involved in chemokine production. Treatment of human aortic smooth muscle cells (HAoSMCs) with thrombin resulted not only in elevated transcription of the (C-C motif) ligand 11 (CCL11) gene but also in enhanced secretion of CCL11 protein. Co-treatment of HAoSMCs with GF109230X, an inhibitor of protein kinase C, or GW5074, an inhibitor of Raf-1 kinase, caused inhibition of ERK1/2 phosphorylation and significantly attenuated expression of CCL11 at transcriptional and protein levels induced by thrombin. Both Akt phosphorylation and CCL11 expression induced by thrombin were attenuated in the presence of pertussis toxin (PTX), an inhibitor of Gi protein-coupled receptor, or LY294002, a PI3K inhibitor. In addition, thrombin-induced production of CCL11 was significantly attenuated by pharmacological inhibition of Akt or MEK which phosphorylates ERK1/2. These results indicate that thrombin is likely to promote expression of CCL11 via PKC/Raf-1/ERK1/2 and PTX-sensitive protease-activated receptors /PI3K/Akt pathways in HAoSMCs. We propose that multiple signaling pathways are involved in change of VSMCs to a secretory phenotype.
Bacterial lipopolysaccharide(LPS) is can stimulate the most LPS-responsive cells in the mammalian host. The macrophage response to LPS can protect the host from infection but high levels, contribute to systemic inflammatory response syndrome and destruction of host itself, The previously study, secretory leukocyte pretense inhibitor (SLPI) was known LPS-induced product of macrophage and had the function that antagonizes their LPS-induced activation of pro-inflammation signaling factors. Purpose of this study was to identify the expression of SLPI involving the infection in various cell lines including odontoblast cell line. Therefore, we conducted in vitro researches, which treated the LPS to the MDPC-23, and compared to NIH3T3, RAW264.7. To investigate the expressionof SLPI in mRNA level, the methods was used RT-PCR and western blotting for protein expression of SLPI. Moreover, we performed the scanning electron microscopic (SEM) observation for the morphological change. This work was supported by Korea Science and Engineering Foundation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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