Trichnuris suis does not excrete eggs during larval stage as well as in particular adult stage, It is impossible to diagnose by use of fecal examination method in those periods. Therefore, serological diagnostic method can be very useful for those stages. In order to produce monoclonal antibody, specific somatic and secretory-excretory (SE) antigens of T. suis were identified and analyzed by SDS-PAGE and Western blot. Monoclonal antibody-producing hybridoma cells were cloned, which were made of popliteal lymph node of BALB/c mice immunized with a 45 kDa somatic antigen of T. suis. Five clones (1B9, 2C4, n2C5, 2D7 and 2D8) showing strong responses to T. suis antigens were selected and the isotype identified. All monoclonal antibodies were IgG1 isotype and the light chains were k chain. Established monoclonal antibodies reacted specifically to somatic and SE antigens of T. suis and did not cross-reacted to antigens of ascaris suum, trichuris vulpis, or Trichinella spiralis. The sensitivity of somatic and SE antigens against these monoclonal antibodies were significant (p<0.01) associated with those of positive and negative sera.
Glucose-regulated proteins (grp's), srp94 3nd grp78/BiP, are a group of stress proteins which are highly synthesized in cells exposed to a variety of stressful agents including tunicamycin 3nd Ca2+ ionophore. Grp78/BiP is hon to function as a molecular chaperone which regulates the folding and assembly of secretory or membrane proteins, but the biological function of grp941 remains to be elucidated. In this study, we have examined the intracellular distribution of grV's and the function of srp94. Grp's are resident in the endoplasmic reticulum (ERI 3nd a specific sequence (Lys-Asp-Glu-Leu) at their C-terminus is known to be responsible for their retention within the ER. However, it has been unclear whether upon disturbance of cellular Caa+ homeostasis by the Ca2+ ionophore, grp94 is retained within the ER or secreted into the medium. In this study, we showed that in the presence of C3a+ ionophore, grp94 and gif78/BiP are present in the cells, mainly within the ER. We have also investigated whether grp94 might function as a molecular chaperone. Here we showed that in the immunoglobulin (Ig)-secreting hvbridom3 cells, grp94 transientlY interacts with fully glycosylated Is heavy chain, suggesting that grpg94 may be involved in facilitating the folding and assembly of Ig heavy chains.
In the present study, quids from La Cueva de los Muertos Chiquitos (CMC) were subjected to ELISA tests for 2 protozoan parasites, Toxoplasma gondii (n=45) and Trypanosoma cruzi (n=43). The people who occupied CMC, the Loma San Gabriel, lived throughout much of present-day Durango and Zacatecas in Mexico. The known pathoecology of these people puts them into at-risk categories for the transmission of T. gondii and T. cruzi. Human antibodies created in response to these 2 parasites can be detected in modern saliva using ELISA kits intended for use with human serum. For these reasons, quids were reconstituted and subjected to ELISA testing. All test wells yielded negative results. These results could be a factor of improper methods because there is no precedence for this work in the existing literature. The results could equally be a simple matter of parasite absence among those people who occupied CMC. A final consideration is the taphonomy of human antibodies and whether or not ELISA is a sufficient method for recovering antibodies from archaeological contexts. An additional ELISA test targeting secretory IgA (sIgA) was conducted to further examine the failure to detect parasite-induced antibodies from quids. Herein, the methods used for quid preparation and ELISA procedures are described so that they can be further developed by future researchers. The results are discussed in light of the potential future of quid analysis.
In vivo antagonistic effect of Lactobacillus helveticus CU 631 and Lactobacillus spp. against typical enteritis causing pathogen Salmonella enteritidis KU 101 have been determined, which showed an increase in survival rate and the decline in viable cell numbers of pathogen in liver and spleen at sacrifice. A signifcant difference in the antagonistic effect against KU 101 were observed, which was species and/or strain dependent of Lactobacillus (p<0.01), the survival rate of the mice in the Salmonella infection by feeding L. helveticus CU 631 has been shown to be 157%, whereas those of L. rhamnosus GG ATCC 53103, L. acidophilus ATCC 4356, L. johnsonii C-4 were 137%, 132%, 119% respectively on the basis of lactobacilli non-associated control KU101 fed mice to be 100%. Viable cells of S. enteritidis KU101 in the liver and in the spleen at sacrifice were decreased in Lactobacillus spp. fed group with no significant difference. The higher level of total secretory IgA concentration in the intestinal fluid of lactobacilli fed mice than control mice have been observed. In vitro antagonistic activity of Lactobacillus spp. against KU101 have been determined, a prominent antagonistic activity of CU 631 against KU 101 were demonstrated.
Background: Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) infection is a primary cause of livestock diarrhea. Therefore, effective vaccines are needed to reduce the incidence of ETEC infection. Objectives: Our study aimed to develop a multivalent ETEC vaccine targeting major virulence factors of ETEC, including enterotoxins and fimbriae. Methods: SLS (STa-LTB-STb) recombinant enterotoxin and fimbriae proteins (F4, F5, F6, F18, and F41) were prepared to develop a multivalent vaccine. A total of 65 mice were immunized subcutaneously by vaccines and phosphate-buffered saline (PBS). The levels of specific immunoglobulin G (IgG) and pro-inflammatory cytokines were determined at 0, 7, 14 and 21 days post-vaccination (dpv). A challenge test with a lethal dose of ETEC was performed, and the survival rate of the mice in each group was recorded. Feces and intestine washes were collected to measure the concentrations of secretory immunoglobulin A (sIgA). Results: Anti-SLS and anti-fimbriae-specific IgG in serums of antigen-vaccinated mice were significantly higher than those of the control group. Immunization with the SLS enterotoxin and multivalent vaccine increased interleukin-1β (IL-1β) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) concentrations. Compared to diarrheal symptoms and 100% death of mice in the control group, mice inoculated with the multivalent vaccine showed an 80% survival rate without any symptom of diarrhea, while SLS and fimbriae vaccinated groups showed 60 and 70% survival rates, respectively. Conclusions: Both SLS and fimbriae proteins can serve as vaccine antigens, and the combination of these two antigens can elicit stronger immune responses. The results suggest that the multivalent vaccine can be successfully used for preventing ETEC in important livestock.
Purpose: This study was to identify relationships of maternal psychosocial factors including mother's mood state, childcare stress, social support and sleep satisfaction with breastfeeding adaptation and immune substances in breast milk, especially secretory immunoglobulin A (sIgA) and transforming growth factor-beta 2 (TGF-${\beta}2$). Methods: Data were collected from 84 mothers who delivered full-term infants by natural childbirth. Structured questionnaires and breast milk were collected at 2~4 days and 6 weeks postpartum. Data were analyzed using descriptive statistics, Pearson's correlation, multiple linear regression, and generalized estimating equation (GEE). Results: Scores for the breastfeeding adaptation scale were significantly related with child care stress, mood state and social support. Mother's anger was positively correlated with the level of sIgA in colostrum (p<.01). Immune substances of breastmilk was significantly influenced by time for milk collection (p<.001) and the type of breastfeeding (sIgA, p<.001, TGF-${\beta}2$, p=.003). Regression analysis showed that breastfeeding adaptation could be explained 59.1% by the type of breastfeeding, childcare stress, the Profile of Mood States, emotional support and sleep quality (F=16.67, p<.001). Conclusion: The findings from this study provide important concepts of breastfeeding adaptation program and explanation of psychosocial factors by immune substances in breast milk. Future research, specially, bio-maker research on breast milk should focus on the ways to improve breastfeeding adaptation.
The third-stage larvae (L3) of the parasitic nematode, Anisakis simplex, have been implicated in the induction of hyperimmune allergic reactions in orally infected humans. In this work, we have conducted a review of an investigation into immune reactions occurring in animals experimentally infected with A. simplex L3. The patterns of serum antibody productions if the experimental animals against excretory-secretory products (ESP) of A. simplex L3 contributed to our current knowledge regarding specific humoral immune reactions in humans. In our review, we were able to determine that L3 infection of experimental animals may constitute a good model system for further exploration of immune mechanisms and allergy in anisakiasis of humans.
A 94-year-old female with end-stage renal disease presents with fever, fatigue, and hematochezia. She had previously resided in Hunan Province, China, and Myanmar, and she immigrated to Taiwan 30 years ago. Colonoscopy revealed a colonic ulcer. Biopsy of the colonic ulcer showed ulceration of the colonic mucosa, and many Paragonimus westermani-like eggs were noted. Serum IgG antibody levels showed strong reactivity with P. westermani excretory-secretory antigens by ELISA. Intestinal paragonimiasis was thus diagnosed according to the morphology of the eggs and serologic finding. After treatment with praziquantel, hematochezia resolved. The present case illustrates the extreme manifestations encountered in severe intestinal paragonimiasis.
The effects of diclazuril on the bursa of Fabricius (BF) structure and secretory IgA (SIgA) expression in chickens infected with Eimeria tenella were examined. The morphology of the BF was observed by hematoxylin and eosin staining, while ultrastructural changes were monitored by transmission electron microscopy. E. tenella infection caused the BF cell volumes to decrease, irregularly arranged, as well as, enlargement of the intercellular space. Diclazuril treatment alleviated the physical signs of damages associated with E. tenella infection. The SIgA expression in BF was analyzed by immunohistochemistry technique. The SIgA expression increased significantly by 350.4% (P<0.01) after E. tenella infection compared to the normal control group. With the treatment of diclazuril, the SIgA was relatively fewer in the cortex, and the expression level was significantly decreased by 46.7% (P<0.01) compared with the infected and untreated group. In conclusion, E. tenella infection in chickens induced obvious harmful changes in BF morphological structure and stimulated the expression of SIgA in the BF. Diclazuril treatment effectively alleviated the morphological changes. This result demonstrates a method to develop an immunological strategy in coccidiosis control.
Numerous physiological effects are attributed to conjugated linoleic acid(CLA). The purpose of this study is to consider these effects with respect to the cis-9, trans-11 and trans-10, cis-12 CLA isomer. Both isomers are natural products. The c9,t11-CLA isomer is the principal dietary form of CLA, but the concentrations of this isomer and the t10,c12-CLA Isomer in dairy products or beef vary depending on the diet fed to cows or steers, respectively. The influence of dietary CLA isomers on the immune response was examined, body weight and weight ratio of organ to body of Balb/C mice. Mice were divided into four groups of 8 mice. Balb/C mice were fed the experimental diets supplemented with 1% CLA (c9,t11-CLA isomer : t10,c12-CLA isomer = 2:3) (Group 1), 1% CLA (c9,t11-CLA isomer t10,c12-CLA isomer : 1:1) (Group 2), 1% safflower oil (Group 3) or nothing (Control) for 3 weeks. After 3 weeks, serum, gut lumen lavage, fat, liver, spleen and thymus were taken. Measurement of total immunoglobulin were executed using sandwich ELISA. Serum levels of IgA and IgM showed that group fed with t10,c12-CLA isomer significantly were higher than group fed with c9,tl1-CLA isomer. In addition serum level of IgG showed that group fed with t10,c9-CLA isomer significantly were lower than group fed with c9,tl1-CLA isomer. However, no significantly differences were observed in the serum IgE and secretory IgA. Weight ratio of spleen to body showed no significant differences. In weight ratio of liver and thymus to body, tl0,c9-CLA isomer significantly were respectively higher than group fed with c9,t11-CLA isomer. In weight ratio of fat to body, tl0,c9-CLA isomer significantly were respectively lower than group fed with c9,tl1-CLA isomer. In conclusion, t10,c12-CLA isomer produced a situation favorable for immunopotentiative effect and body composition. But it should be protected against hepatomegaly induced lipid accumulation in liver.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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