The crude polysaccharide from Panax ginseng prepared by hot water extration and precipiation with ethanol was further fractionated into neutral and acidic fractions by DEAE- cellulose ion exchange chromatography. The chemical compositions were 85.0% carbohydrorate and 15.0% protein for the neutral fraction, and 28.4% carbohydrate, 10.0% protein and 29.0% uronic acid for the acidic fraction. The acidic fraction was more effective in increasing of the ratio of spleen to body weight, the number of antibody secreting cells to SRBC and phagocytic activity of reticuloendothelial system, as well as antitumor activity against the solid form of sarcoma 180 in ICR mice than the neutral fraction. All polysaccharide fractions were mitogenic to cultured spleen cells of C57BL/6 mice. However, FA was different from FN in the co-mitogenicities with lectin mitogens. Both crude and acidic fractions potentiated remarkably the mitogenic activity of PHA-P or LPS in dose-dependent manner but neutral fraction enhanced only that of LPS. Three polysaccharide fractions had no effect on that of Con A. These results suggest that the acidic fraction may stimulate B and Td cells as well as macrophages while the neutral fraction may simulate only B cells and macropages.
The composition of monosaccharides of acidic polysaccharide isolated from ethanol-insoluble and water-soluble fractions of red ginseng roots was analysed and its immunological activities were investigated. Red ginseng acidic polysaccharide (RGAP) was composed of glucose (26.1 mole %), arabinose (1.6 mole %), glucuroninc acid (51.8 mol %) and galacturonic acid (5.1 mole %) as determined by gas liquid chromatography. Addition of RGAP increased production of nitric oxide (NO) and tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$ in the rodent macrophage cultures. Peritoneal macrophages from RGAP-treated mice exhibited potent tumoricidal activities toward P815 and WEHI 164 tumor cells. It was also observed that concentrations of NO and TNF-$\alpha$ were high in the culture medium of macrophages from the mice administered with RGAP. Moreover, treatment of RGAP in vivo stimulated tumoricidal activities of natural killer (NK) cells. Treatment with RGAP increased life span of sarcoma 180-bearing mice and decreased tumor weights of B16-tumor-bearing mice. These results suggest that activation of macrophages and NK cells serve to enhance in vivo anticancer activities of RGAP.
Panax ginseng has been extensively used in the traditional oriental medicine as a restorative, tonic and Prophylactic agent. Recently, several reports regarding to anticancer effects of Panax ginseng has accumulated. These studies emphasized the fact that the anticancer activities might be due to a glycoside group called ginsenoside or pan.u saponin which has a water soluble characteristic. However, the authors and collaborates demonstrated that a highly lipid soluble component in extract of Panax ginseng roots contains a considerable cytotoxic activities against marine leukemic cells (L1210, P388) and human censer cells (HRT-18, HT-29, HCT48). This study was devised to observe the cytotoxic activities of Petroleum-ether extract of Panax giuseng roots (crude GBD and its Partially Purified fraction from silicic acid column chromatography (7 : 3 GX) against sarcoma-180 (5-180) and Walker carcinosar- coma 256 (Walker 256) in vivo, and murine leukemic Lymphocytes (L1210) and human rectal cancer cells (HRT-18) and human colon cancer cells (HT-29 and HCT48) in vitro. Each cell-line was cultured in medium containing serial concentration of the crude GX or 7 : 3 GX in vitro. A highly lipid soluble compound in the extract of Panax ginseng root was cytocidal to murine leukemic cells and human colon and rectal cancer cells in vitro. In the meantime, ginseng saponin derivatives did not have cytotoxic effects at its corresponding concentration. The growth rates of the cancer cells in medium containing ginseng extracts were inhibited gradually to a significant degree roughly in proportion to the increase of the extract concentration. The cytotoxic activity of 7 : 3 GX was about 3 times more potent than that of crude GX, one unit of cytotoxic activity against L1210 cells being equivalent to 2.54 Ug and 058 Ug for the crude GX and 7 : 3 GX, respectively. The Ri value of the active compound on silica- gel thin layer chromatography with petroleum-ether/ethyl ether/acetic acid mixture (90 : 10 : 1, v/v/v) as a developing so lvent was 053. While, the Panaxydol and Panaxynol as active compounds were purified from Petroleum-ether extract of Panax ginseng root by Drs. Ahn and Kim, and author found out that the one unit of cytotoxic activity of the Panaxydol and Panaxynol against L1210 cells being equivalent to 056 Ug and 0.3918 respectively. The survival times of mice inoculated with S-180 cells were extended about 1.5 to 2 times by the 7 : 3 GX treatment compared with their control group. The significantly decreased hemoglobin values of rats after inoculation with Walker 256 were recovered to normal range by oral administration of the crude Gt The synthetic levels of protein, DNA and RNA in human colon and rectal cancer cells were significantly diminished by treatment with the crude GX, which can explain a part of the origin of its anticancer activity.
본 연구에서는 누에번데기 또는 누에애벌레를 기주로 하여 인공 재배된 밀리타리스동충하초의 고형암 성장억제 및 면역조절 기능을 평가하였다. 이를 위해 sarcoma-180 세포주를 겨드랑이에 피하 이식받은 ICR 마우스를 대상으로 밀리타리스동충하초 또는 유효성 분으로 알려진 cordycepin을 10일간 복강투여한 후 고형암 성 장저지능, 면역관련 장기의 무게변화, 비장 내 면역세포수의 변화, 그리고 비장세포에 의한 interleukin-2(IL-2) 생성능을 측정하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 겨드랑이에 고형암을 이식받은 마우스에게 50 mg/kg(CMP50) 또는 100 mg/kg(CMP100)의 누에번데기 밀리타리스동충하초 추출물을 10일간 투여한 결과 생리식염수를 투여한 대조군에 비해 3주 후 고형암 성장이 47.3% 및 57.6% 유의하게 억제되었다(p<0.05). 50 mg/kg(CML50) 및 100 mg/kg(CML100)의 누에애벌레 밀리타리스동충하초를 투여받은 경우 35.5% 및 37.1%, 그리고 1 mg/kg 및 2 mg/kg의 cordycepin을 투여받은 군의 경우 26.1%와 29.8%의 고형암 성장 억제효과가 관찰되었다(p<0.05). 고형암을 이식받은 후 누에번데기 또는 누에애벌레 밀리타리스동충하초를 투여받은 마우스는 대조군에 비해 흉선무게가 38∼44% 유의하게 증가하였고(p<0.05), 비장내 CD4+ 및 CD8+ T-세포수, NK-세포수(63∼110% 증가), 그리고 비장세포에 의한 IL-2 생성능(33∼51%증가)이 모두 유의하게 증가하였다(p<0.05). 이상의 결과를 종합해 볼 때, 밀리타리스동충하초 열수추출물은 고형암의 성장을 억제하는 효과가 있으며, 이와 같은 밀리타리스동충하초 추출물의 항암활성은 면역기능 증강효과와 연관이 있을 것으로 생각된다. 아울러 밀리타리스동충하초의 고형암 성장억제 및 면역조절 기능은 cordycepin 단일물질에 비해 더 우수하였다.
Even though appropriate immune response is necessary for the survival of the individual, excessive or insufficient immune Response might cause autoimmune or allergic disease. So the immune response must be controlled to the degree that is beneficial for the well being of the individual. This study was undertaken to know the effects of Gunleetang Gagambang on the immune system of the mouse. Gunleetang Gagambang has been used for cure of tumor as a traditional medicine without any experimental evidence to support the rational basis for its clinical use. This study was carried out to evaluate the possible therapeutic or antitumoral effects of Gunleetang Gagambang extract against tumor, and to carry out some mechanisms responsible for its effect. Some kinds of tumor were induced by the typical application of 3-methylcholanthrene(MCA) or by the implantation(s.c) of malignant tumor cells such as leukemia cells(3LL cells) or sarcoma cells(S180 cells). Treatment of the Gunleetang Gagambang on water-extract(dailly 1mg/mouse, i. p.) was continued for 7 days prior to tumor induction and after that the treatment was lasted for 20 days. Against squamous cell carcinoma induced by MCA, Gunleetang Gagambang decreased not only the frequency of tumor production but also the number and the weight of tumors per tumor bearing mice(TBM). Gunleetang Gagambang on also significantly suppressed the development of 3LL cell and S180 cell-implanted tumors in occurrence-frequency and their size. and some developed tumors were regressed by the continuous treatment of Gunleetang Gagambang extract into TBM. In vitro, treatment of Gunleetang Gagambang extract had no effect on the growth of some kinds of cell line such as FsaII, A431 strain but significantly inhibited the proliferation of 3LL, S180 cells and augmented the DNA synthesis of mitogen-activated lymphocytes. Gunleetang Gagambang also stimulated the migrative ability of leukocyte, the MIF and IL-2 production of T lymphocytes, but not IL 6 production of B cells. Gunleetang Gagambang administration to mice enhanced NK cells activities. These results demonstrated that Gunleetang Gagambang extract exhibited a significant prophylactic benefits against tumors and its antitumor activity was manifested depending on the type of tumor cells. And these results also suggested that effect of Gunleetang Gagambang might be chiefly due to nonspecitie enhancement of NK cell activities and cell-mediated immune responses.
약초 음료인 HC와 PG의 항균효과, 항암효과 및 항알레르기효과에 대해 다음과 같은 결과를 얻었다. 원판확산법을 통해 관찰한 S. aureus와 P. aeruginosa에 대한 저지 효과는 약초 음료 HC에 비해 약초 음료 PG에서 더 크게 나타났으며 S. aureus보다 P aeruginosa에 대한 항균력이 더 강하게 나타났다. 48시간 동안 약초발효 음료의 농도를 달리하여 S. aureus와 P. aeruginosa에 대한 증식 저해 정도를 관찰한 결과 S. aureus에 관한 증식 저해 정도는 약초 음료 HC군의 경우 $5\%$대에서부터 확실한 균 증식 억제 정도를 나타내었으며, 48시간 경과 후에는 $10\%$이상의 첨가군에서 균 증식 저해능이 더욱 커짐을 볼 수 있었다 S. aureus에 관한 약초 음료 PG의 증식 저해능은 24시간 경과 후 $5\%$ 첨가군에서 부터 확실한 균증식 억제능을 보였다. P. aeruginosa에 대한 증식 저해 정도는 약초 음료 HC군의 경우 24시간 경과 후 $10\%$대에서부터 확실한 균증식 억제를 나타내었으며, 약초음료 PG의 증식 저 해능은 24시간 경과 후 $5\%$ 첨가군에서 부터 확실한 균 증식 억제능을 나타내었다. 약초 음료 HC와 약초 음료 PG의 고형암(S-180) 성장 억제에 대한 실험 결과 대조군에 비해 $5\%$ HC군에서는 $62\%,\;10\%$ HC군에서는 $66\%$의 고형암 억제효과를 나타내었고, $5\%$ PG군에서는 $53\%,\;10\%$ PG군에서 는 $61\%$의 고형암 성장 억제효과를 나타내었다. 암세포 성장 저해효과 실험결과 인간 유래 간암세포인 Hep3B에 대해 약초 음료 HC원액은 $24.6\%$,약초 음료 PG원액은 $69.2\%$의 저해율를 보였다. 약초 음료 HC와 약초 음료PG의 히스타민 유리 억제효과를 측정한 결과compound 48/80을 처리하여 유리된 히스타민량에 비해 약초 음료PG는 $46.4\%$, 약초 음료 HC는 $17.9\%$의 히스타민 분비 억제효과를 나타내었다.
Kim, Young-So;Ryu, Ku-Hyun;Mo, Young-Keun;Lee, Chong-Kil;Han, Seong-Sun
생약학회지
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제25권4호통권99호
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pp.348-355
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1994
An antitumor component, F-D-P, was purified from the hot water extract of the carpophores of Elfvingia applanata by precipitation with ethanol, dialysis, and passage through a column of DEAE-cellulose ion exchange. F-D-P inhibited the growth of Sarcoma 180 in mice showing the tumor inhibition ratio of 88.3% in doses of 20 mg/kg for ten days. Chemical analysis of F-D-P showed that it was composed of polysaccharide(65.3%) and protein(6.5%0, and that the monosaccharides consisting of the polysaccharide was glucose(89.1%) and mannose(10.9%). The immunomodulatory activities of F-D-P were explored by determining its effect on the proliferation of the whole and subpopulations of lymphocytes, and on the generation of natural killer(NK) cell activity in vitro. F-D-P was mitogenic to total lymphocytes and B cells, but not to purified T cells, even in the presence of accessory cells. F-D-P did not increase NK cell activity when added to cultures of resting lymphocytes. From these results, it is clear that F-D-P modulates primarily the humoral immune responeses.
한약재(韓藥材)의 암치료(癌治療)에 응용(應用) 가능성(可能性)을 연구(硏究)한 23종(種)의 논문(論文)을 대상(對象)으로 하여 문헌적(文獻的)으로 고찰(考察)한 바, 한의학(韓醫學)에서는 청열해독(淸熱解毒), 소종지혈(消腫止血), 활혈화어(活血化瘀), 이기보비양혈(理氣補脾養血), 화담연견(化痰軟堅), 건비화습(健脾化濕), 이기산결(理氣散結)하는 한약재(韓藥材)를 이용하여 부정법(扶正法), 거사법(祛邪法), 부정거사법(扶正祛邪法)으로써 암치료(癌治療)에 응용(應用)하고 있으며, 실험(實驗)에 사용(使用)된 약물(藥物)은 총(總) 103종(種)으로 이 중(中)에서 어성초(魚腥草), 저령, 천산갑(穿山甲), 오수유(吳茱萸), 목향(木香), 흑축(黑丑) 등의 항암효과(抗癌效果)가 우수(憂愁)한 것으로 나타났는데, 특히 어성초(魚腥草)는 암세포주(癌細胞柱)에 대한 감수성(感受性)도 높게 나타났지만 정상세포(正常細胞)에 대한 억제효과(抑制效果)는 낮게 나타났고, 오수유(吳茱萸), 목향(木香), 흑축(黑丑)은 20여종의 암세포주(癌細胞柱)에 모두 높은 세포독성(細胞毒性)이 나타났으며, 삼백초(三白草)는 HT-29, melanoma, SK-MEL-5에, 지모(知母)는 난소암(卵巢癌) 세포주(細胞柱)에, 형개(荊芥)는 HT-29 세포주(細胞柱)에 특히 높은 활성(活性)을 보였다. 또한 실험(實驗)에 사용된 암세포주(癌細胞柱) 중에서 생쥐 유래의 P815, Yac-1 세포주(細胞柱)와 사람의 Sarcoma 180, K562, SNU-1 세포주(細胞柱)가 가장 다용(多用)되었다.
해양심층수 간장 및 일반간장을 제조하여 항돌연변이원성과 세포독성을 측정하였으며 sarcoma-180 cell을 이용하여 in vivo에서 항암효과를 살펴보았다. S. typhimurium TA98과TA100 균주를 이용한 실험에서 모든 시료에서 돌연변이원성이 없었으며, 항돌연변이원성 실험에서는 직접변이원인 MNNG($0.4{\mu}g$/plate)의 경우 TA100 균주에서 해양심층수간장의 시료농도 $200{\mu}g$/plate에서 90.9%의 높은 억제효과를 나타내었으며 4NQO($0.15{\mu}g$/plate)에 대해서는 같은 시료농도에서 62.0%의 억제효과를 나타내었다. 그리고 4NQO의 경우 TA98 균주에 대해서 해양심층수 간장은 61.7%의 억제효과를 나타내었으며 모든 시료는 농도 의존적으로 억제하는 것으로 나타났다. 세포독성 효과를 알아보기 위하여 HeLa, Hep3B, AGS, A549와 MCF-7을 사용하였다. 각 시료 추출물의 암세포 성장효과를 조사한 결과, 해양심층수 간장이 1 mg/mL의 농도에서 각각 69.4%, 70.5%, 55.6%, 82.1% 및 73.2%의 억제율을 나타내었다. 그리고 해양심층수 간장은 고형암 성장 억제 실험에서 대조군에 비해서 40.9%의 고형암 성장 억제효과를 나타내었다.
와송으로부터 고온 고압의 열수 추출로 다당체 조추출물(OJP1)을 얻어 디스크 확산법, fluorescein diacetate(PDA)법 및 액체 배지 희석법을 통하여 세균과 진균에 대한 항균 활성을 조사하였다. 또한 Sephadex G-50을 통하여 다당체(FI)와 올리고당류(FII)를 분리하고, 이들의 항암 활성을 조사하였다. FI과 FII의 분자량은 각각 30$\~$50 kDa과 1$\~$3 kDa으로 추정되었다. OJP1의 항균 효과는 디스크 확산법에서 Candida albicans가 $20\pm4.9\;mm$의 억제대로 가장 높았으며, Salmonella typhimurium과 Staphylococcus aureus도 각각 $18\pm2.0\;mm$ 와 $17\pm1.0\;mm$의 억제대로 비교적 높게 나타났다. 또한 Escherichia coli와 Pseudomonas aeruginosa에 대해서도 양성 대조군인 프로폴리스보다 높게 나타났으며, FDA법, 액체배지 희석법에서도 비슷한 양상을 나타냈다. OJP1과 Fl, FII의 인체 암세포주와 Sarcoma 180 세포주에 대한 항암 활성을 측정해 본 결과, 이들은 모두 MTT assay와 형태 변화 관찰에서 강력한 암세포주 증식 억제 효과를 나타내었는데, 특히 폐암 세포주인 A549 세포와 자궁 경부암 세포주인 HeLa 세포, 위암 세포주인 AGS에서 현저한 효과를 보였다. 더 나아가 DNA 분절화를 통해 apoptosis 유발 여부를 확인해 본 결과, 대조군에 비해서 이들 물질을 처리한 실험군에서 apoptosis발생을 뜻하는 DNA 분절화 현상이 뚜fut하게 나타났다. 요컨대, OJP1과 Fl, FII는 광범위한 병원성 균주에 대하여 효과적인 항균 활성을 보였으며, 각종 암세포주에 대하여 현저한 항암 활성을 나타내는 것으로 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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