목적 : 두경부암 환자들은 방사선조사 후 부작용으로 타액선의 기능부전인 구강건조증이 흔히 유발되어 치료 후 회복이 늦어지고 삶의 질이 저하된다. 방사선조사와 함께 혈류개선제로 알려져 있는 pentoxifylline (PTX)과 칼슘 통로차단제로 알려져 있는 diltiazem (DTZ)을 단독 또는 병합으로 투여한 후 타액선의 만성변화를 분석하여 이 약제들의 방사선손상 억제 가능성을 분석해 보고자 하였다. 대상 및 방법 : Sprague-Dawley 쥐 16마리를 네 군 즉, 1) 방사선조사 단독군, 2) 방사선조사와 PTX 투여군, 3) 방사선조사와 DTZ 투여군, 4) 방사선조사와 PTX, DTZ의 병합투여군으로 분류하였다. 4 MV 선형가속기를 이용하여 16 Gy 일회로 타액선 부위에 방사선조사를 시행하였다. PTX은 방사선조사 20분 전에 kg당 50 mg을, DTZ은 방사선조사 30분 전에 kg당 20 mg을 복강 내로 각각 투여하였다. 방사선조사후 10주와 16주후에 타액선을 절제하여 H&염색을 하여 병리학적 소견을 관찰하였고 만성변화의 객관적 지표인 세포질내 공포 형성의 정도를 백분율로 측정하여 각 군간의 평균값을 비교하여 통계적인 유의성을 $x^2$-검사에 의해 확인하였다. 결과 : 방사선조사 10주 후 타액선의 선방세포질 내에서 다수의 공포형성이 관찰되었으며 방사선조사와 PTX 투여군, 또는 PTX과 DTZ 병합투여군에서는 이들 세포질내 공포 형성이 통계적으로 의미 있게 감소하였다(p vaiue, 0.001). 그러나 DTZ 투여군에서는 세포질내 공포 형성 정도가 방사선조사단 독군에 비해 통계적으로 의미 있게 감소되지 않았다(p value, >0.05). 방사선조사 후 16주에 관찰한 실험 군들에서도 선방세포질내 공포형성의 차이가 10주군들과 각기 유사한 소견을 보였으며 10주와 다른 점은 선방세포의 전체 수가 감소된 것과 간질 내 섬유화의 증가였다. 결론 : 방사선조사를 받은 쥐의 타액선에서 PTX 투여, 혹은 PTX과 DTZ 병합 투여결과 만성손상이 감소되었음을 관찰하였고 이로 미루어 보아 PTX이 방사선조사후 발생하는 구강건조증을 예방하는 효과적인 약제가 될 수 있으리라 생각한다.
두 경부 악성종양 치료를 위한 방사선조사가 정상 타액선 조직에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 체중 100 gm 내외의 sprague dawley종 암컷흰쥐 42마리를 대조군, 실험 1, 2군으로 분류하고 대조군은 6마리, 실험군은 18마리씩 나누어, CLINAC 2100 C-D 6 MV X-RAY를 사용하여 조사거리 100 cm분당 100 cGy로 실험군 흰쥐의 두 경부에 조사시켜 희생시킨 후 통법에 따라 현미경 표본을 제작 관찰하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 악하선의 소포세포의 손상은 분할조사의 양이 증가할수록 심하였으며 12 Gy군은 매우 경미한 손상을 보이는데 비해 24 Gy군은 심한 손상을 야기하였다. 2. 악하선의 소포세포는 핵의 다형태성, 분비과립의 감소와 다형태성, 과립형질내세망의 확장, 사립체의 팽창과 창백, 골지체의 확장 등이 관찰되었다. 3. 방사선감수성이 예민한 순서는 장액세포, 장점액세포, 분비소관세포의 순이었다. 4. 도관상피세포 및 점액세포에는 중요한 변화가 없었다. 5. 모든 실험군을 통하여 미세혈관의 손상 소견이 없어 미세혈관 손상이 타액선에 조기 손상을 유발시키지 않는 것으로 생각된다.
Obstructive sialadenitis of major salivary glands is a common entity that occurs either in sialolithiasis or in foreign-body obstruction of the excretory ducts. This is characterized histologically by the presence of duct-like structural groups in a highly fibrotic stroma. Although the pathologic features are well recognized, the various cell types involved in the atrophy and subsequent regeneration of the obstructed salivary gland have been controversial. For this reason, an animal model of obstructive sialadenitis that induced atrophy in the salivary gland was used. Experimental study was performed to observe changes of submandibular gland in rabbit and apply the results to clinical activity. Forty-five rabbits each weighing about 3Kg were used and divided into control and experimental group. In the experimental group, ducts of submandibular gland was ligated and cutted divided into each twenty rabbits. Rabbits were serially sacrificed on the 3rd, 5th, 14th, 30th day of experiment. The submandibular glands were dissected out at sacrifice and stained with H&E, MT, immunohistochemical stain and the histological examinations were carried out under the light and transmission electron microscope. After examination and comparison of all specimens, the results of this study were as follows: 1. In the features of H&E stain, moderate infiltration of inflammatory cell were present at 3rd day of experiment. The features of ductal metaplasia was observed after 7th day in the ligation group and destructive changes was continued. In the cutting group, atrophic changes were less severe than ligation group but the small ductule were separated from stroma after 7th day. 2. In the feature of MT stain, apposition of connective tissue was increased in all group, more active in ligation group. 3. In the features of immunohistochemical stain, ligation group showed increased PCNA positive response at 7th day and the higher activity of duct cells was observed. Severance group showed more PCNA positive response than ligation group at 30th day. 4. In TEM features, ductal metaplasia was started at 7th day and degenerative change with margination of nucleus had been severe. Although ductal metaplasia was seen in the severance group, more numerous granule in different size was founded than ligation group. From above results, degenerative change was identified with ductal metaplasia, apically apposition of granule, r-ER destruction in ligation group. Severance of duct elicit degenerative change of grandular cells but the change was less severe than ligation group and more PCNA positive cell was founded at acinar cell.
본 연구에서는 백서에 구속 스트레스를 통하여 정서적인 스트레스를 가한 후, 이하선 조직의 형태학적 변화 양상을 광학 현미경으로 관찰하였으며, 타액선 조직에서 세포자멸사의 평가는 TUNEL assay에 양성을 보이는 세포 수를 측정하여, 각 군별 차이를 비교하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 백서 이하선에서 구속 스트레스를 가한 후, 5일부터 타액선 선포의 위축 및 농염이 관찰되었으며, 7일부터 세포자멸사소견이 관찰되기 시작하였다. 2. In situ DNA end labelling assay를 통하여 TUNEL 염색을 시행한 결과, 타액선 장액선포에서 양성세포가 구속 스트레스에 대해 5일부터 통계학적으로 유의하게 증가하여 7일째에 가장 큰 지수를 보여 조직학적 소견과 일치하였다. 따라서 구속에 의한 스트레스 증가에 따라 생체 내 타액선조직에서 세포자멸사가 유도됨을 증명할 수 있었으며, 향후 유도 신호전달 기전에 관한 연구가 이루어져야 한다고 사료된다.
Although the epiglottis plays a vital role in deglutition, histological studies of the epiglottis and surrounding ligaments associated with swallowing dysfunction are limited. Therefore, we performed histological observations to clarify age-related changes in the morphological characteristics of the epiglottis and surrounding structures. Tissue samples comprising the epiglottis and surrounding structures were collected from corpses that were both orally fed and tubefed during their lifetimes. Following hematoxylin and eosin, Elastica Van Gieson, and immunohistochemical staining procedures, the chondrocytes, connective tissue, and glandular tissue were observed under the epiglottis epithelium, and intervening adipose tissue was observed in the surrounding area. Fatty degeneration of acinar cells was also observed in the glandular tissue, possibly because of aging. Bundles of elastic fibers were present around the vascular wall in the peri-epiglottic ligament, but some were reduced. Furthermore, large amounts of collagen fibers ran toward and through the cartilage, whereas the mesh-like elastic fibers stopped in front of the cartilage. Microfibrils considered to be oxytalan fibers, which are thinner and shorter than elastic fibers, were observed around the vascular wall and in the fiber bundles. Age-related changes included connective tissue fibrosis shown by the large amount of collagen fibers, atrophy of salivary glands, and an accompanying increase in adipose tissue. Regarding stretchability and elasticity, the elastic fibers may have an auxiliary function for laryngeal elevation during deglutition. This suggests that disuse atrophy of the laryngeal organs with or without oral intake might reduce the amount of elastic fiber in older adults.
Salivary proteins which are produced in the saliary acinar cells have been known to be involved in the Calcium and phosphate metabolism. The acquired pellicle resulting from such metabolism is considered as a secondary defence membrane against tooth caries. In this respect, some proteins included in saliva probably play an important role in the prevention of demineralization in enamel. On the other hand, fluoride has long been known to prevent the demineralization of enamel by the inhibition of the growth of Streptococcus mutans(S. mutans) and by the chemical reaction with calcium and phosphate, Therefore, I have examined the roles of amylase and albumin in the demineralization of enamel and compared these preteins with fluoride in terms of anticariogenic effect. 1. The demineralization caused by S. mutans occurred slowly and progressively for the first 60 min, then the rate of demineralization was accelerated afterwards. 2. pH decreased continuously during the entire period of each experiment. 3. The demineralization was significantly inhibited by the preteatment of amylase and fluoride but albumin had little effect on it. 4. An addition of 0.1 mM lactic acid (final concentration 0.1 ${\mu}M$) caused a rapid increase in calcium concentration reaching a maximum within 10 min. 5. pH decreased rapidly by the addition of 0.1 mM lactic acid and reached a minimum within a few seconds followed by an increase in pH. pH reaced a plateu with 10 min. 6. Fluoride, amylase and albumin played little role in the 0.1 mM lactic acid-induced demineralization. 7. A slow infusion of 0.1 M lactic acid at a rate of 5 ${\mu}l/min$ caused a slower increase in calcium concentration compared with the bolus addition of lactic acid. 8. Fluoride had an inhibitory effect on the calcium release caused by slow infusion of lactic acid while amylase and albumin had no effect on it. These results suggest that fluoride inhibits demineralization by protecting the HA from the acid attack whereas amylase has a direct effect on S. mutans to prevent demineralization.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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