The role of $Cl^-$ channels in regulatory volume decrease (RVD) in human salivary gland acinar cells was examined using a whole-cell patch clamp technique. Human tissues were obtained from healthy volunteers or from patients with oromaxillofacial tumors. During the measurements, $K^+$-free solutions were employed to eliminate contamination of whole-cell conductance by $K^+$ currents. When the cells were exposed to a 70% hypotonic solution, outward-rectifying currents, which were not observed in the resting state, were found to have significantly increased both in human labial and parotid gland acinar cells. The amplitudes of the currents were reduced in a low $Cl^-$ bath solution. Furthermore, the addition of $100{\mu}M$ 5-Nitro-2- (3-phenyl propylamino) benzoic acid (NPPB) or $100{\mu}M$ 4,4'-diisothio cyanatostilbene-2,2'-disulphonic acid (DIDS), known to partially block $Cl^-$ channels, significantly inhibited these currents. Its outward-rectifying current profile, shift in reversal potential in a low $Cl^-$ bath solution and pharmacological properties suggest that this is a $Ca^{2+}$-independent, volume activated $Cl^-$ current. We conclude therefore that volume activated $Cl^-$ channels play a putative role in RVD in human salivary gland acinar cells.
Kim, Byung Joo;Lee, Jae Hwa;Jun, Jae Yeoul;Chang, In Youb;So, Insuk;Kim, Ki Whan
Molecules and Cells
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제21권3호
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pp.337-342
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2006
Interstitial cells of Cajal (ICCs) are pacemaker cells that activate the periodic spontaneous depolarization (pacemaker potentials) responsible for the production of slow waves in gastrointestinal smooth muscle. The effects of vasoactive intestinal polypeptide (VIP) on the pacemaker potentials in cultured ICCs from murine small intestine were investigated by whole-cell patch-clamp techniques. Addition of VIP (50 nM-$1{\mu}M$) decreased the amplitude of pacemaker potentials and depolarized resting membrane potentials. To examine the type of receptors involved in ICC, we examined the effects of the $VIP_1$ agonist and found that it had no effect on pacemaker potentials. Pretreatment with $VIP_1$ antagonist ($1{\mu}M$) for 10 min also did not block the VIP (50 nM)-induced effects. On the other hand exposure to 1H-(1,2,4)oxadiazolo(4,3-A)quinoxalin-1-one (ODQ, $100{\mu}M$), an inhibitor of guanylate cyclase, prevented VIP inhibition of pacemaker potentials. Similarly KT-5823 ($1{\mu}M$) or RP-8-CPT-cGMPS ($10{\mu}M$), inhibitors of protein kinase G (PKG) blocked the effect of VIP (50 nM) on pacemaker potentials as did N-nitro-L-arginine (L-NA, $100{\mu}M$), a non-selective nitric oxide synthase (NOS) inhibitor. These results imply that the inhibition of pacemaker activity by VIP depends on the NO-cGMP-PKG pathway.
The most common feature of neurodegenerative disease (i.e. Alzheimer's disease, AD) is the increased number of activated microglial cells nearby the pathogenic area of the brain, such as amyloid plaque in AD. An abnormality of protein regulation and an imbalance of clearance against ${\beta}-amyloid\;(A{\beta})$ produced amyloid precursor protein (APP) can turn microglia into the activated feature out of the ramified resting phase. We examined the possibility that ginsenoside Rb1 could attenuate the microglial activation induced by massive $A{\beta}$ that has known to induce a chronic inflammation, which is a major cause of AD by damaging neuronal cells (i.e. apoptosis or necrosis). Aggregated $A{\beta}42\;(5\;{\mu}M)$ peptide was used with lipopolysaccharide (LPS) ($10\;{\mu}g$) for a comparative control up to 48hours. We found that Rb1 reduced the production of nitric oxide as well as proinflammatory cytokines, such as $IL-1{\beta}$ and $TNF-{\alpha}$.
Choi Youn Hee;Kim Tae Ik;Hur Young Baek;Go Chang-Soon;Chang Young Jin
Fisheries and Aquatic Sciences
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제6권2호
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pp.51-58
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2003
The gonadal development and the gametogenic cycle and the fine structure of ripe germ cells of the cultured Pacific oyster, Crassostrea gigas were investigated using oysters monthly collected from the southern coast of Korea from October 2000 to September 2001. Monthly changes in the condition index were similar to that of meat weight rate and the highest value was observed in between April and May, and the lowest value in August. The external colors of the testis and the ovary were milky white and yellowish, respectively. The spawning period of the Pacific oyster was continued from May to September, with a peak in July. The gametogenic cycle could be classified into five successive stages: multiplicative stage (December to March), growing stage (March and April), mature stage (April to June), spawning stage (June to August) and resting stage (August to January). Variety of egg yolk granules, lipid granules, mitochondria, and endoplasmic reticula were observed in cytoplasm of ripe oocyte. The spermatozoon consisted of the head, middle piece and tail; including cap-shaped acrosome with domed structure, elliptical shaped nucleus, four mitochondria, two centrioles and flagellum.
The gonadal development, the annual reproductive cycle and the first sexual maturity of surf clam, Mactra veneriformis Reeve were studied histologically. Speciemens were monthly collected at the intertidal zone of Naechodo, Chollabuk-do, Korea, for one year from March 1986 to February 1987. Sexuality of the clam is dioecious. The gonads were located between the subregion of mid-intestinal gland in the visceral cavity and the reticular connetive tissues of the foot, The ovary is composed of a number of ovarian sacs, and the testis comprise several testiculat lobules. The undifferentiated mesenchymal tissues and eosinophilic granular cells function as nutritive cells in the early stage. The ripe eggs were about 50-60${\mu}{\textrm}{m}$ in diameter, and they were wurroundedby the gelatinous membranes. The spawing period was from early June to September the main spawning occurred beetween July and August when the water temperature reached above 24$^{\circ}C$. The annual reproductive cycle of this species could be classified into five successive stages: multiplicative(January to March), growing(March to May), mature(April to August), spent(June to September), degenerative and resting(September to February). The monthly changes of fatness coefficient closely correlated with the annual reproductive cycle. Percentages of the first sexual maturity of female and male clams were over 50% among those individals ranging from 2.1 To 2.5cm, and 100% in those over 2.6cm in shell length.
The levels of maternal immunity enhancing factor(MIEF), which is an immunomodulatory protein identified from bovine colostrum, were determined by indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for the colostrum and normal milk collected during the first two weeks of lactation. The mean concentration of MIEF in the colostrum of the first day of lactation was $109\;{\mu}g/ml$, and fell from the third day of lactation to $3{\sim}4\;{\mu}g/ml$. The molecular weight of the purified MIEF determined by reducing SDS-PAGE and TSK G2000SW column chromatography was 22,000 and 24,000 daltons, respectively, showing that MIEF is a monomeric peptide in its native form. To examine the capacity of MIEF to induce differentiation of B Lymphocytes, human tonsillar Iymphocytes were cultured in the presence of different concentrations of MIEF, and then antibody secreting cells were enumerated by enzyme-linked immunospot(ELISPOT) assay. When added to cultures of human tonsillar Lymphocytes, MIEF induced differentiation of resting B Iymphocyte to antibody secreting plasma cells as efficiently as LPS.
R. sphaeroides K-7에 의한 수소 생성에 미치는 생리적 조건을 조사한 결과 수소생성은 혐기성조건하에서 $30^{\circ}C$, pH 6.8-7.0s 조명도 약 12,000 lux을 쉰지하였을 때 할발히 이루어지는 것으로 내타났다. 아미노산으로서는 글루타민산, 유기산으로는 초산, 젖산, 혹은 사과산을 이용했을 때 높은 수소생성이 나타났으며 포도당과 같은 당류에서도 수소생성이 이루어졌다. 휴지기 세포는 약 40일 보관후에도 90% 정도의 수소생성능을 유지하고 있었다.
줄새우아재비, Palaemon serrifer의 뇌와 흉부신경절에 분포하는 신경분비세포와 생식소발달과의 관련 기능을 알아보고자 생식소발달의 조직학적 변화를 조사하여 생식년주기를 밝히고, 뇌와 흉부신경절에 분포하는 신경분비세포를 분류하여 분비활성변화를 조사하였으며, 생식소발달에 따른 이들 분비세포들의 활성변화를 연구하였다. 1. 줄새우아재비, Palaemon serrifer는 수컷의 경우 1월부터, 암컷은 3월부터 생식소가 성장하기 시작하는 성장기를 거쳐, 성숙기, 완숙 및 산란기, 퇴화 및 휴지기의 연속된 생식연주기를 가지며, 주산란기 는 7-8월이었다. 2. 신경분비세포로서 뇌에서는 A-, B-그리고 E-cell이 흉부신경절에서는 A-, A'- 그리고 B-cell이 구분되었으며 A-와 A'-cell은 크기가 $80-90{\mu}m$로 가장 큰 세포였고 B-cell은 $30-40{\mu}m$의 크기였으며, E-cell은 $10-15{\mu}m$ 크기로 미세한 세포였다. 3. 활성중인 A-와 B-cell은 CHP와 AF에, 그리고 B-cell은 AF에만 양성반응을 나타냈었고, A-cell은 분비과립이 축색으로 이동하는 것 외에 주변방출(peripheral discharge)을 나타냈다. 4. 신경분비세포의 활성변화를 생식소발달상태와 연관하여 볼 때 난소의 성장과 성숙시기에는 E-cell, 배란시기에는 A-cell의 분비활성이 강했고, 정소의 성장시기에는 E-cell, 정자의 변태 및 방정시기에는 A-cell의 강한 분비활성이 관찰되었다.
피뿔고둥, Rapana venosa의 정소소엽 내에서 정자형성과정 중에 생성되는 정상적인 생식세포의 발달과 함께 섞이어 일정 시기에만 출현하는 비정형세포들을 미세구조적으로 관찰하였고, 또한 정소 발달단계에 따른 저정낭 내층 상피세포들의 주기적 변화를 조직학적 관찰에 의해 조사하였다. 생식세포의 발달단계는 정원세포기, 정모세포기, 정세포기, 정자기로 나누어지며, 정모세포기는 다시 제1 정모세포기와 제2 정모세포기로 세분할 수 있어, 총 5 단계로 구분할 수 있었다. 정상적인 웅성생식세포들의 분화와 발달과정은 다른 복족류 종들과 유사하였다. 정자는 길이가 대략 $50{\mu}m$ 정도이었다. 정자의 미부 편모의 악소님 (axoneme) 은 주변에 9쌍의 미세소관들과 중앙에 1쌍의 미세소관들로 구성되어 있다. 즉, 9+2 구조를 이루고 있다. 특히, 대형 복족류 중 뿔소라과 피뿔고둥의 경우는 예외적으로 다른 이매패류나 두족류 등과 달리 정소소엽 내에서 정자형성과정 중에 정상적인 생식세포들 사이에서 총 4종 (Type IA, IB, Type IIA, IIB) 의 비정형세포들 (atypical cells) 이 함께 출현하는 특징을 보이고 있는데, 이러한 현상은 대형 복족류의 단지 소수의 종들에 한하여 출현하는 예외적인 특이한 현상이라 할 수 있다. 그러나 비정형세포들은 저정낭의 여러 단계 중 내층 상피세포들 내에서는 발견되지 않았다. 추측컨대 몇 가지 비정형세포들은 리소좀-모양의 공포들이나 리소좀-모양의 소체들을 가지는데, 이들은 정소소엽 내에서 붕괴나 그 자신들의 흡수에 관여하는 것으로 추정된다. 상당량의 정자들이 정소소엽 내에서 형성되어, 그들의 일부는 7월 말까지 정소에서 저정낭으로 이동된다. 교미 성기는 6-7 월 사이이었다. 피뿔고둥 저정낭 발달단계의 주기적 변화는 (1) S-1 단계 (휴지단계), (2) S-II 단계 (축적단계), 그리고 S-III 단계 (배정단계) 의 3 단계로 구분되었다.
Choi, Seok;Parajuli, Shankar Prasad;Yeum, Cheol Ho;Park, Chan Guk;Kim, Man Yoo;Kim, Young Dae;Cha, Kyoung Hun;Park, Young Bong;Park, Jong Seong;Jeong, Han Seong;Jun, Jae Yeoul
Molecules and Cells
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제26권2호
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pp.181-185
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2008
The effects of calcitonin gene-related peptide (CGRP) on pacemaker currents in cultured interstitial cells of Cajal (ICC) from the mouse small intestine were investigated using the whole-cell patch clamp technique at $30^{\circ}C$. Under voltage clamping at a holding potential of -70 mV, CGRP decreased the amplitude and frequency of pacemaker currents and activated outward resting currents. These effects were blocked by intracellular $GDP{\beta}S$, a G-protein inhibitor and glibenclamide, a specific ATP-sensitive $K^+$ channels blocker. During current clamping, CGRP hyperpolarized the membrane and this effect was antagonized by glibenclamide. Pretreatment with SQ-22536 (an adenylate cyclase inhibitor) or naproxen (a cyclooxygenase inhibitor) did not block the CGRP-induced effects, whereas pretreatment with ODQ (a guanylate cyclase inhibitor) or L-NAME (an inhibitor of nitric oxide synthase) did. In conclusion, CGRP inhibits pacemaker currents in ICC by generating nitric oxide via G-protein activation and so activating ATP-sensitive $K^+$ channels. Nitric oxide- and guanylate cyclase-dependent pathways are involved in these effects.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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