We studied steroid metabolites produced from red-spotted grouper ovarian follicles during maturation. Oocytes with 350-500 ㎛ diameter were in vitro incubated in the presence of [3H] 17α-hydroxyprogesterone as a precursor. Steroid metabolites were extracted from incubated media and oocytes. The extracts were separated and identified using thin layer chromatography, high performance liquid chromatography and gas chromatography-mass spectrometry. The identified metabolites were androstenedione (A4), testosterone (T) and estrone (E1). The metabolites of A4 was dominant in all size of oocytes and it was the highest in 480 ㎛ diameter oocytes. The metabolites of two progestins, 17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one and 17α,20α-dihydroxy-4-pregnen-3-one were detected in the oocytes less than 480 ㎛ diameter although they were not identified definitely. In the oocytes of 480 ㎛ diameter, metabolite of progestin was the highest, and germinal vesicle (GV) was still in the middle of cytoplasm. In the oocytes of 500 ㎛ diameter, GV was began to migrate and the major metabolites were A4 and E1. The metabolite of E1 was detected in all size of oocytes and it was higher than that of E2. These results suggest that oocytes of 480 ㎛ diameter are the transitional stage involving steroidogenic shift to final oocyte maturation and potential function of E1 during maturation process.
As part of an effort to establish of novel grouper hybrids for the aquaculture industry, we compared the embryonic development of fertilized eggs of giant grouper Epinephelus lanceolatus ♀×kelp grouper E. bruneus ♂ (GGKG) and giant grouper ♀×red-spotted grouper E. akaara ♂ (GGRG) with a maternal purebred (giant grouper ♀×♂, GG) at 27-29℃. The hatching rates were lower in GGKG (2.59%) and GGRG (0.36%) than in GG (12.29%). The hatching times were considerably longer in the two hybrids than in GG (22 h), which were similar between GGKG (28 h 30 min) and GGRG (28 h). The total lengths of yolk-absorbed larvae of GGKG (2.546±0.132 mm) and GGRG (2.602±0.093 mm) were similar to that of GG (2.565±0.149 mm). The deformity rates of hatched larvae (64.29-75.00%) did not differ between the two hybrids and GG. Although the hatching and deformity rates of GGKG and GGRG were inferior to those of GG, the possibility of mass production of the two hybrids larvae was demonstrated in this study.
Mun, Seong Hee;You, Jin Ho;Oh, Hyeon Ji;Lee, Chi Hoon;Baek, Hea Ja;Lee, Young-Don;Kwon, Joon Yeong
한국발생생물학회지:발생과생식
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제23권1호
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pp.35-42
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2019
Fish shows great difference in growth rate between individuals during larval development and early growth. This difference seriously reduces the production efficiency in fish culture. Growth hormone (GH)/Insulin-like growth factor 1 (IGF1) system is said to play some pivotal roles in fish growth. In this study, we investigated differences of GH, IGF1 and GHR gene expressions in juvenile red spotted grouper (Epinephelus akaara) with different growth performance. Red spotted groupers were reared under the same environmental condition (water temperature $24{\pm}1^{\circ}C$, natural light) for 96 days after hatching. They were divided into 3 groups by size (fast growing, middle growing and slow growing groups: FGG, MGG, and SGG, respectively). RNA was extracted from the brain, liver and muscle tissues from each group, and target gene expression was examined by real-time PCR. In the brain with pituitary gland, expression of GH gene in FGG was significantly higher than the expression in SGG, but the expression of IGF1 and GHR genes in the muscle was highest in SGG. Difference of GHR and IGF1 mRNA in the liver between groups with different growth performance was less clear than that in other tissues, although level of IGF1 mRNA was higher in SGG than in MGG. These results suggest that hormonal governing of growth is not the same in fast growing and slow growing fish, and size grading could cause a shift of hormonal state and growth pattern in this species.
본 연구는 붉바리 배란유도를 위해 다양한 호르몬과(ovaprim, pimozide, LHRHa, HCG)과 LHRHa의 농도별 효과를 조사하였다. LHRHa는 50 ㎍kg-1, 100 ㎍kg-1, 150 ㎍kg-1, 200 ㎍kg-1의 농도로 처리하였다. 호르몬은 등 근육에 주사하였으며, 조사 결과 LHRHa 단독, 그리고 LHRHa와 Pimozide를 혼합하여 투여했을 때 가장 효과적이었으며, 두 실험구 사이의 차이는 거의 없는 것으로 나타났다. 따라서 LHRHa를 단독으로 사용하는 것이 가장 효율적인 것으로 판단된다. 그리고 LHRHa를 다양한 농도로 처리하여 배란유도 효과를 조사한 결과 100 ㎍kg-1의 농도로 투여했을 때 가장 우수한 것으로 조사되었다.
Rising of water temperature due to global warming is a great concern to aquaculturists and fishery biologists. Hence, the present study aimed to investigate the effects of high water temperature on juvenile red spotted grouper, Epinephelus akaara based on the evaluation of stress responses in blood. E. akaara juveniles were exposed to different thermal conditions ($25^{\circ}C$, $28^{\circ}C$, $31^{\circ}C$, and $34^{\circ}C$) for 6 weeks following 2 weeks of acclimation at $25^{\circ}C$. Blood cell morphology and number were examined at three sampling points (2, 7, and 42 days) from a total of 180 fish. Major erythrocytic cellular abnormalities (ECA) observed in blood smears of thermally stressed groups ($31^{\circ}C$ and $34^{\circ}C$) after 6 weeks were echinocytes, teardrop-like cells, swollen cells and vacuolated cells. Both red and white blood cell number (RBC and WBC) were significantly (p<0.05) elevated in $31^{\circ}C$ and $34^{\circ}C$ group after 6 weeks thermal exposure. Differential leucocytes number showed significant increases in neutrophil (N) and decreases in lymphocytes (L) in the highest temperature ($34^{\circ}C$). Different N:L ratio was observed at different thermal conditions which can be used as a reliable alternative to measure stress response. Taken together, these results suggest that higher temperature ($31^{\circ}C$ and $34^{\circ}C$) can interfere the immune system of red spotted grouper by altering the blood cell morphology and number.
The main objective of this study was to provide anesthetic criteria of clove oil for an effective manipulation and transportation of red spotted grouper, Epinephelus akaara. When anesthesia temperature (20, 24, and $28^{\circ}C$) and concentration of clove oil (25, 50, and 75 ppm) were increased, the anesthesia and recovery time decreased and tended to be similar to each other between juvenile and adult. Also, as the temperature and concentration increased, the ratio of exposure time and recovery time between juvenile and adult were decreased. When plasma cortisol concentrations were compared for 48 h after anesthesia with 50 ppm of clove oil, both the juvenile and adult fish grew up to 12 h; however, thereafter decreased and there was no significant difference from control at 48 h.
Park, Jong Youn;Han, Kyeong Ho;Cho, Jae Kwon;Kim, Kyong Min;Son, Maeng Hyun;Park, Jae Min;Kang, Hee Woong
한국발생생물학회지:발생과생식
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제20권2호
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pp.81-90
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2016
The effect of sudden changes of water temperature (WT) on the survival rate and physiological responses of the red spotted grouper (Epinephelus akaara) were examined by manipulating WT control system for 9 days. Experimental condition was divided in two different regimes at low (from $10^{\circ}C$ to $4^{\circ}C$, decreased $1^{\circ}C/d$) and high (from $28^{\circ}C$ to $34^{\circ}C$, increased $1^{\circ}C/d$) WT. Survival rate of experimental fishes were observed, and determined the changes of hematological characteristics by analyzing plasma levels of cortisol, glucose, total protein, and electrolytes ($Na^+$, $Cl^-$, $K^+$). No mortality was observed until low WT $6^{\circ}C$ (144 h) and high WT $32^{\circ}C$ (96 h), and 100% mortality was observed at low WT $4^{\circ}C$ (216 h) and high WT $35^{\circ}C$ (171 h). Plasma levels of cortisol and glucose increased rapidly as decreasing WT, and the loss of swimming ability and respiration response was observed at low WT $7^{\circ}C$ and high WT $34^{\circ}C$ conditions.
Park, Jong Youn;Han, Kyeong Ho;Cho, Jae Kwon;Myeong, Jeong In;Park, Jae Min
한국발생생물학회지:발생과생식
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제20권2호
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pp.65-79
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2016
We observed the osteological development of larval and juvenile red spotted grouper (Epinephelus akaara) in order to generate data for the assessment of skeletal deformities and to inform phylogenetic systematics research. Larvae and juveniles were obtained from a aquafarm in Muan-gun, Jeolla-namdo Province, Korea. The average water temperature at the time of breeding was $23.0^{\circ}C$ and average water salinity was 33.0 psu. Freshly hatched fish larvae had not undergone any ossification, but ossification of the parasphenoid bone, which forms the base of the cranium, occurred as the juveniles reached an average body length (BL) of 2.49 mm. At the same time, ossification of the preopercle and opercle occurred in the operculum, and ossification of the maxilla, which forms the upper jaw, and the dentary bones, which form the lower jaw, began. In addition, ossification of the vertebra occurred by formation of 7 vertebral centra and the neural spine in the abdominal vertebra. When the juveniles reached an average (BL) of 5.22 mm, ossification of the nasal, lateral ethmoid, and alisphenoid bones occurred in the cranium; ossification of the endopterygoid and metapterygoid bones began in the palatine region; and ossification of the hypohyal and interhyal bones occurred in the hyoid arch. At an average (BL) of 20.9 mm, ossification of the basisphenoid bone in the cranium and the suborbital bone in the orbital region occurred. Ossification of the vertebra then occurred by the formation of long pairs of ribs from the third to the ninth abdominal vertebrae, completing osteological development.
Park, Jong Youn;Cho, Jae Kwon;Choi, Young Jae;Han, Kyeong Ho;Hong, Chang Gi
한국발생생물학회지:발생과생식
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제22권4호
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pp.369-378
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2018
We determined the morphologic characteristics (body weight and degree of abdomen inflation) of the red spotted grouper, Epinephelus akaara, mother fish producing healthy eggs. Experimental fish were chosen from fish reared in a sea cage. The fish were divided into four size groups by body weight: 400~600, 600~800, 800~1,000, and 1,000~1,200 g and four stages (I~IV) of the degree of abdomen inflation. After hormone treatment, we observed the amount of ovulation-induced eggs, and rates of buoyancy, fertilization, embryonic survival, and hatching. As a result, mother fish with a body weight of 600 g or more spawned, and the fertilization rate, embryonic survival rate, and hatching rate were high in the 800~1,000 g range, thus showing effective ovulation induction. As a result of dividing the degree of abdomen inflation based on the anal fin of the mother fish into I-IV stages and determining hormone treatment time, the GSI was $0.9{\pm}0.2%$ at stage I, $2.3{\pm}0.2%$ at stage II, $5.6{\pm0.2%$ at stage III, and $7.9{\pm}0.9%$ at stage IV. The flotation rate and hatching rate were highest at stage III, and the fertilization rate and embryonic survival rate were highest at stage IV. Therefore, in terms of egg quality, the amount of eggs collected per mother fish, maturation, and histology were different depending on the degree of abdomen inflation. At stage III, where the abdomen inflation degree of the mother fish was based on the basal part of the dorsal fin relative to the height of the anal fin was 1, the egg quality was highest.
In this study, we crossbred Epinephelus akaara and E. lanceolatus to produce a hybrid grouper with faster growth and adaptation to domestic aquaculture environments. The plasma cortisol and glucose levels and osmoregulation (stress response indicators) of the hybrid grouper, E. akaara ♀ × E. lanceolatus ♂, were investigated under several salinity levels (32, 24, 16, and 8 psu). The body lengths and weights of E. akaara (8.2 ± 0.1 cm, 8.3 ± 0.4 g) and the hybrid (8.6 ± 0.1 cm, 10.0 ± 0.4 g) were similar at the start of the experiment, but were significantly different at the end of the experiment. Juveniles of both E. akaara and the hybrid showed greater weight gain, specific growth, and feed conversion rate (FCR) under low salinity of 16 psu. Under the 8 psu treatment, the juvenile E. akaara all died, while the hybrid juveniles survived. Plasma cortisol levels were not affected by lower salinity in both species. The above results indicate that the hybrid is more tolerant of low salinity than is E. akaara, although both species exhibited higher growth and FCR at 16 psu, lower than the salinity of natural seawater. Thus, juveniles of both E. akaara and the hybrid can be more effectively cultured in brackish areas or waters with salinity lower than that of seawater.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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