This study was carried out to investigate the inhibitory effects of vitamin E on the oxidative damage of cellular lipids and proteins in free radical reaction induced by $FeCl_3$, and ascorbic acid. In this experiment, a vitamin E treated rat group was administered with 100mg/kg body weight of $dl-{\alpha}-tocophery$ 1 acetate and an untreated rat group was administered with the same volume of corn oil. And then assays of malondialdehyde and carbonyl group in total homogenate, mitochondrial and microsomal fraction of rat liver were carried out at the scheduled time. The results obtained from this study were summarized as follows; 1. Lipid peroxidation levels in vitamin E administered rat liver cells were significantly (p<0.05) decreased at the intervals between 1 hour and 4 hours in liver homogenate, at all times except for 1 hour point in mitochondrial fraction, and also at the intervals between 0.5 hour and 3 hours in microsomal fraction compared with those of the control rat liver cell. 2. Protein oxidation levels in vitamin E administered rat liver cell were also significantly (p<0.05) decreased at the intervals between 1.5 hours and 4 hours in liver homogenate, at over 4 hours in liver mitochondrial fraction, and at the intervals between 0.5 hour and 3 hours in liver microsomal fraction compared with those of the control rat liver cells.
The insulin-like growth factor-I(IGF-I) is an important metabolic factor involved in cell growth and metabolism. Although secretion of IGF-I in rat liver is regulated by growth hormone, the effects of forskolin, adenylate cyclase activator, on secretion of IGF-I have not been reported. Therefore, a modified perfused rat liver model was used to investigate the regulatory effects of forskolin on IGF-I secretion in this experiment. The results were summerized as follows : 1. Modified perfused rat liver model was not changed to aspartate aminotransferase(AST), alanine aminotransferase(ALT) and lactic dehydrogenase(LDH) secretion in time. 2. The IGF-I secretion in hepatic cell was increased by forskolin($10^{-5}$, $10^{-6}$ and $10^{-7}M$) in a dose-dependent manner as compared with those of the controls, and significantly increased by $10^{-5}$ and $10^{-6}$ forskolin(p < 0.05). 3. Secretion of glucose in hepatic cell significantly was decreased by $10^{-5}$ forskolin as compared with those of controls(p < 0.05). These results suggest that forskolin may be involved in the regulation of IGF-I secretion in the perfused rat liver.
A fulminant hepatitis is associated with massive liver cell necrosis and a high mortality rate. But survivors regenerate a normal liver and do not have chronic liver disease. This clinical course suggests that the acutely injured livers release a factor that allows a recovery from chronic hepatitis or cirrhosis. The objective of this study was to isolate and characterize an anti-fibrotic factor from acutely damaged rat livers. The liver cell necrosis was prepared from rat by warm ischemical perfusion and the perfusates were assessed against the growth inhibition of fat-storing cells (FSC). A liver-derived growth inhibitory factor (LDGIF) was purified from ischemically damaged rat livers by chromatographies on Sephacryl S-300, CM Sepharose, hydroxyapatite, and Superose 12. The LDGIF was isolated with an overall purification of 194-fold and 40% recovery. Although LDGIF was identified as the rat liver arginase by Nterminal sequence analysis, LDGIF exists as a monomer and the purified native arginase has a trimer form. Furthermore, LDGIF has a lower enzyme activity on the hydrolysis of L-arginine and a higher inhibitory effect on proliferation of FSC than the normal rat liver arginase. The catalytic activity of LDGIF is ascribed to the monomeric characteristics of the LDGIF. Therefore, the inhibitory action of LDGIF might not be due to the arginine depletion by the catalytic activity of arginase. In conclusion, the presence of the LDGIF could interpret the clinical course that serious fibrosis is not found in the liver of patients recovering from severe hepatic necrosis due to fulminant hepatitis, suggesting that this LDGIF may provide a novel target for the prevention and treatment of hepatic fibrosis.
Rat liver LDH A-cDNA has been isolated from a .lambda.gt11-rat lover cDNA library and partially characterized. The size of the isolated rat liver LDH A-cDNA if shown to be 1.6Kb and restriction enzyme sites for the rat liver LDH A-cDNA are also mapped. 682-nucleotide sequence coding for 3'-end of rat liver LDH A-cDNA has been analyzed and compared to the nucleotide sequence of the same region of rat $C_6$-glioma cell LDH A-cDNA which has been cloned from the hormonally stimulated cell cultures. The result shows that 177 nucleotide sequences coding for the C-terminal 59-amino acids are identical but 505 nucleotide sequences of 3'-nontranslated region of the two LSH A-cDNA exhibit characteristic differences in thier nucleotide sequences. Computer analysis for the folding structures for 3'-end 400 nucleotide sequences of the two LDH A-cDNA shows a possibility implying that the two LDH A-mRNAs isolated from different tissues of rats may have different half life and therefore their translational efficiency may be different. It has been previously demonstrated that isoproterenol stimulated rat $C_6$ -glioma cell cultures produce LDH A-mRNA showing 2 to 3-fold longer half life in comparison to that of noninduced LHD A-mRNA. The result therefore support for the idea that hormonally stimulated rat $C_6$-glioma cells may produce LDH A-mRNA containing different nucleotide sequences at the 3'-end nontranslated region by which the hormonally induced LDH A-mRNA could have more stable secondary mRAN structure in comparison to that of noninduced LDH A-mRNA.
소 체외수정란의 체외배양 체계는 현재 완전히 확립되지는 않은 상태로서 8∼16 세포기 발육억제현상, 수정란의 파편하 현상, 성장지연 등 여러 가지 문제점들이 현 배양체계에서 나타난다. 그러나 hepler cell들과의 공배양에 의해 이러한 문제점들은 상당히 극복되며 또한 체외발생의 촉진 및 공배양된 수정란의 이식에 의해 임신율도 향상된다. 현재 소 체외수정란의 공배양에는 난관상피세포가 가장 널리 이용되나 이러한 시스템은 몇가지 문제점이 있다. 즉, primary culture를 확보하기 위하여 신선한 조직을 주기적으로 채취해야 하며 따라서 난관채취에 시간이 소요되고, 불편하며 또한 공배양에 이용되는 세포들이 균일하지 않은바 난관상피세포에 따라 배 발생 촉진작용에 변이를 나타내기도 한다. 그러나 확립된 cell line을 이용할 수 있다면 이러한 난관상피세포의 이용에서 나타나는 문제점들이 해결될 수 있다. Buffalo Rat Liver cell은 이러한 목적에 이용될 수 있는 cell line 중의 하나로서 이들은 여러 가지 성장인자(growth factor)를 분비하는 것으로 알려져 있다. 따라서 본고에서는 소 체외수정란의 공배양을 위한 BRL(Buffalo Rat Liver)cell의 이용성, 이용방법 및 이용에 있어서 고려하여야 할 요인들에 대하여 살펴보고자 한다.
Objective : This study purposed to investigate the anti-oxidative effect of Lithospermi Radix (root of Lithospermum erythrorhizon S.) on liver cells isolated from oxidatvely stressed rat by AAPH. Method : We investigate effects of Lithospermi Radix(LR) and its fractions on normal liver cells' proliferation. And the amounts of SOD, GSH, catalase, NO, MDA production by liver cells isolated from the oxidatively stressed rat by AAPH also were measured after incubation with various fractions of LR extraction. Results : LR and its fracitons showed no toxicity on the normal liver cells from rat. LR and its fracitons increased the activity of SOD and reduced the amounts of NO and MDA in the liver cells from the oxidatively stressed rat. Conclusion : Lithospermi Radix could be supposed to have antioxidant effect on liver cells with no toxicity.
Changes of thiol methyltransferase (TMT) activity in cholestatic rat liver were studied. Hepatic subcellular and serum TMT activities were determined in cholestatic rat induced by common bile duct (CBD) ligation over a period 28 days. The mitochondrial and microsomal TMT activities in cholestatic rat liver were found to be significantly increased between the 1st and the 28th day after CBD ligation. The TMT activity in serum was significantly increased throughout the experiments. The Vmax values of the above hepatic TMT in cholestatic rat were significantly increased at the 7th day after CBD ligation. However, the Km values of the above hepatic enzymes did not vary in all the experimental groups. Therefore, the results indicate that the biosynthesis of TMT was increased in cholestatic rat liver. The elevated serum TMT activity is most likely caused by increased hepatocytes membrane permeability due to cholestasis mediated liver cell necrosis.
초산납을 투여한 rat에 양파즙을 투여하여 양파의 납해독 능력 유무를 알아보기 위한 본 연구에서 다음 결론을 얻었다. 납만 투여한 P군은 28일간에 대조군보다 30.2% 낮은 체중 증가를 보이나 납과 함께 양파즙을 투여한 OP군은 P군보다 증가율이 약 3% 향상되었다. 외관과 해부소견상 P군은 3~4주째 OP군 보다 뚜렷한 납중독 현상 즉 경련 탈진 간변색 위점막 염증 등을 보였다. P군에서 혈청 GPT, cholesterol, blood urea nitrogen, alkaline phosphatase 값이 대조군 보다 각각 57.0, 50.3, 70.5, 71.7% 증가했다. 반면 OP군에서는 이들 측정치가 36.7, 38.5, 48.1, 37.4%로 증가하여 P군 보다 비교적 낮은 증가를 보여 양파즙에 의한 납해독 영향으로 보였다. P군의 hemoglobin 함량 9.7g/dl도 대조군 보다 37.4% 감소되나 OP군은 12.6g/dl로 개선되었다. 간의 납함량도 P군의 0.29mg/100g보다 양파즙 투여군(OP)에서 개선되어 0.1g/100g을 보였다. 28일이 경과한 P군의 다수 rat에서 간세포 변성 과 증식된 kuffer cell 내 많은량의 색소 침착과 모세혈관 주위의 출혈과 일부세포의 necrosis를 보이고 sinus 공간도 확장되었다. 그러나 OP군에서는 간세포 변성을 보이나 kuffer cell내 담흑색소량의 증가는 현저하지 않았다. 따라서 납에 중독된 rat(lead 100mg/kg rat)에 사료의 2%에 해당된 양파를 투여하므로서 납 중독의 예방 내지 중독증상을 경감할 수 있음이 나타났다.
A rat (Rottus norvegicus) infected with C. hepatica was trapped incidentally. At necropsy, grossly yellowish-white nodules were scattered on the liver surface. Microscopically, granulomatous and fibrotic nodules containing eggs and/or adult worms of C. hepatica were detected in the liver. Septal fibrosis forming pseudolobules was observed as a diffuse change throughout the liver. In double staining with immunostaining of -SMA and toluidine blue, myofibroblasts and mast cells were generally observed within the fibrous septa with mast cells being along the myofibroblasts. In this case, we hypothesized that myofibroblast and mast cell might playa role in septal fibrosis of rat liver induced by C. hepatica infection.
Expressed sequence tags (ESTs) were generated from two 3'-directed CDNA libraries constructed from quiescent and activated rat hepatic stellate cell (HSC) to analyze the expression profiles of active genes in both cells. From quiescent and activated HSC, 694 ESTs and 779 ESTs, respectively, were obtained after excluding those having shorter than 30 bp. Amonq ESTs obtained from quiescent and activated HSC, 68 and 73 kinds of ESTs (186 clones and 236 clones), respectively, appeared more than once, implying that their genes are expressed highly in each cell type. 52 among 73 ESTs appeared only in the activated HSC 47 amonq 68 ESTs only in the normal HSC, and 21 in both cells. The genes of these 52 ESTs were assumed to be expressed more highly in the activated HSC. To confirm the high expression of genes of which the ESTs appeared more than twice in the activated HSC, northern hybridization was carried out with RNAs derived from rat normal and fibrotic liver using each of 18 EST DNAs as probe. 13 ESTs showed more intense bands with RNA isolated from the fibrotic liver than normal liver. From these results, we confirm the positive correlation between abundance of transcript in activated HSCs and the expression level in fibrotic liver, The expression profile of the transcripts serves as an important tool in understanding the biological properties of HSC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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