Estradiol-17${\beta}$($E_2$)에 의한 Vitellogenin (VTG) 함성에 미치는 Cu 및 Zn의 영향을 무지개송어의 배양 간세포를 이용하여 조사하였다. 간세포는 2일간 배양 한 후, E하(2) ($2{\times}10^6$ M)와 동시에 Cu ($2{\times}10^{-5}$~$10^{-4}$M) 또는 Zn ($10^{-5}$~$10^{-3}$M)을 배양액에 첨가하여 5일간 배양하였다. VTG 합성률은 총 단백질에 대한 VTG의 배율로 나타내었다. CU 및 Zn의 첨가는 배양 간세포의 생존율에는 영향을 미치지 않았다. 그러나, Cu의 첨가에 사용된 모든 농도에서, Zn의 첨가에는 농도 의존적으로 감소하여(10^{-3}$M에서 유의하게 감소하였다. 이러한 감소는, Zn의 제거시에는 회복되었으나, Cu에서는 회복되지 않았다. 그리고, Cu (10^{-4}$M의 첨가 시에 Ca (1.8 mM) 농도를 2.5 및 5.0 mM로 증가시켜도 Cu의 작용을 저해하지 못하였다. 이러한 결과로 보아, Cu 및 Zn은 간세포에서 합성되는 다른 단백질 보다 VTG 합성에 더 깊이 관여하는 것으로 추정된다.
열목어를 비롯한 산천어, 시마연어, 연어, 무지개송어 등 우리나라 연어아과 어류의 미토콘드리아 DNA control region의 염기서열 조성 및 구조적 변이를 비교 분석하였다. 열목어속의 열목어는 연어속의 종들과 다수의 염기치환 및 삽입/결실에 의해 뚜렷하게 구별되었으며, 연어속어종간에는 5.42~16.49%의 염기치환율을 나타내었다. 한편, 산천어와 시마연어의 염기서열은 100% 일치하였으며, 무지개송어와 알비노사이에는 단지 3개의 전이만이 관찰되었다. 3' 말단쪽에 77~96 bp의 반복서열이 종렬배열되어 종간에 뚜렷한 길이변이를 나타내었는데, 특히 열목어에서는 특징적으로 81 bp 영역이 2 copy로 배열되어 있었다. 각각의 반복서열상의 염기조성에 있어서도 종간 특이성을 나타내었으며, 이러한 control region에서의 염기변이는 연어아과 어류의 표지인자로써 유용하게 사용되어질 수 있으리라 사료되어진다.
The mechanism by which gonadotropin-releasing hormone (GnRH) and dopamine (DA) control gonadotropin (GTH) release was studied in male and female rainbow trout using cultured pituitary cells obtained at different reproductive stages. The mechanisms of follicle-stimulating hormone (FSH) release by GnRH and DA could not be determined yet. However, basal and salmon-type GnRH (sGnRH)- or chicken-II-type GnRH (cGnRH-II)- induced luteinizing hormone (LH) release increased with gonadal maturation in both sexes. LH release activity was higher after sGnRH stimulation than cGnRH-II stimulation at maturing stages in both sexes. The GnRH antagonist ([Ac-3, 4-dehydro-$Pro^1$, D-p-F-$Phe^2$, D-$Trp^{3,6}$] GnRH) suppressed LH release by sGnRH stimulation in a dose-dependent manner, although the effect was weak in maturing fish. The role of DA as a GTH-release inhibitory factor differs during the reproductive cycle: the inhibition of sGnRH-stimulated LH release by DA was stronger in immature fish than in maturing, ovulating, or spermiated fish. DA did not completely inhibit sGnRH-stimulated LH release, and DA alone did not alter basal LH release. Relatively high doses ($10^{-6}$ or $10^{-5}M$) of domperidone (DOM, a DA D2 antagonist) increased LH release, which did not change with reproductive stage in either sex. The potency of DOM to enhance sGnRH-stimulated LH release was higher in maturing and ovulated fish than in immature fish. These data suggest that LH release from the pituitary gland is controlled by dual neuroendocrine mechanisms by GnRH and DA in rainbow trout, as has been reported in other teleosts. The mechanism of control of FSH release, however, remains unknown.
계절성 번식기 동안에 자성무지개송어 (Oncorhynchus mykiss)의 혈장내 $estradiol-17\beta$, 혈장성분, 전기영동상 그리고 미세구조 변화의 특징을 살펴보았다. 정상적인 자연조건에서 혈장내 $estradiol-17\beta$는 난황형성기(vitellogenic season)말인 9월에 peak를 나타내었고, 산란이 이루어진 시기 이후인 12월에는 서서히 감소하였으며, 난소의 재형성 초기인 2월과 3월에는 급격하게 감소하였다. 이러한 $estradiol-17\beta$의 변화 추이를 볼 때 이 호르몬은 자성 무지개송어에서 혈장내 calcium, phosphorus, glucose, albumin및 total protein수준의 증가에 의해서 증명된 것과 같이 난황전구물질(vitellogenin)의 생성을 자극하는 것으로 나타났다. Latematuring단계 혹은 산란중인 난모세포의 전기영동상(분자량이 각각 약 70,000과 200,000 Da)은 late perinucleolus단계의 난모세포의 전기명동상보다 훨씬 두껍고 진한 경향을 나타내었다. 이 단백질 2개의 전기영동상은 $estradiol-17\beta$ 호르몬 peak와 일치하는 추이를 나타내면서 SDS-PAGE에서 확인되었다. 생식소 숙도지수 일명 성성숙지수, [gonadosomatic indices(GSI)]는 10월로부터 그 이듬해 1월까지 유의성 있게 증가하는 경향을 나타내었고, 성숙난자의 급격한 수적인 증가와 일치하면서 1월에 가장 높은 peak를 나타내었다. 산란 전단계에서 estradiol-17 수준과 CSI간에는 정 (+)의 상관관계 (r=0.701, p<0.01)를 나타내었고, 간숙도지수 [hepatosomatic index (HSI)]는 번식시기인 12월에 가장 높은 수치를 나타내었다. 번식시기 (12월)에 생식소 자극호르몬 분비세포(gonadotropes)는 granules와 globules와 같은 생식소자극호르몬을 포함한 봉입체로 가득찬 상태를 나타내었다. 난황형성기에는 late perinucleolus 난모세포가 난황의 축적을 통해서 early maturing난모세포로 변형되는 과정이며, 이 시기의 난모세포는 late maturing단계로 되면서 난황으로 완전히 가득찬 상태로 확인되었다. 핵이주 단계에 있는 난모세포의 과립막세포의 미세구조를 살펴보면 팽창된 조면 내형질세망과 tubular cristae가 있는 간상의 미토콘드리아로 구성되어 있었다. 방사대 (zona radials)와 난황막 사이에 있는 미세융모(finger-like projections)는 각각 성장하면서 난황형성기에 pore canals을 이루면서 서로 연결되나, 난성숙기에 방사대가 더욱더 치밀하게 되면 수축되어 봉쇄되면서 위축되는 것으로 확인되었다. 방사대는 외측에 않은 homogeneous layer와 내측에 2개의 두꺼운 helicoidal layers (zona radiata interna and zona radials externa)총 3개의 구조물로 구성되어 있었다. 정상적인 환경조건에서 볼 때 난포는 난형성과 생식소에서 분비되는 스테로이드 흐르몬의 생성에 충분할 만큼 조직의 발달과 호르몬의 주기적인 분비에 영향을 주는 것으로 나타났다.
Three experiments were conducted to determine the effects of dietary arginine concentrations on plasma free amino acid (PAA) concentrations in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss (Walbaum). The first experiment was conducted to determine appropriate post-prandial and food deprivation sampling times in dorsal aorta cannulated rainbow trout averaging 519${\pm}$9.5 g (mean${\pm}$SD) at $16^{\circ}C$. Blood samples were taken at 0, 2, 3, 4, 5, 6 and 24 h after feeding (0 and 24 h blood samples were taken from the same group of fish). PAA concentrations increased by 2 h post-feeding and the concentration of all essential amino acids except histidine peaked at 5 h and returned to 0 time values by 24 h. In the second experiment dorsal aorta cannulated rainbow trout averaging 528${\pm}$11.3 g (mean${\pm}$SD) were divided into 6 groups of 4 fish to study the effect of dietary arginine levels on PAA. After 24 h food deprivation, each group of fish was fed one of six L-amino acid diets containing graded levels of arginine (0.48, 1.08, 1.38, 1.68, 1.98 or 2.58%) by intubation. Blood samples were taken at 0, 5 and 24 h after feeding. Post-prandial (5 h after feeding) plasma-free arginine concentrations (PParg) showed a breakpoint at 1.03% arginine in the diet and post-absorptive (24 h after feeding) plasma free-arginine concentrations (PAarg) showed a breakpoint at 1.38% arginine. PAarg increased linearly from fish fed diets containing arginine between 0.48% and 1.38%, and the concentrations remained constant from fish fed diets containing arginine at or above 1.38%, but were all below PParg at all time points. Results of the third experiment confirm the results that PParg concentrations from fish fed arginine deficient diets were higher than PAarg (0 or 24 h values). Thus, in contrast to mammals and birds, the PParg when arginine is present in the diet as the most limiting amino acid such that it severely limits growth, increases in plasma rather than decreases.
Kim, Soon-Hag;Choi, Cheol-Young;Hwang, Joo-Yeon;Kim, Young-Youl;Park, Chan;Oh, Berm-Seok;Kimm, Ku-Chan;Scott A. Gahr;Sohn, Young-Chang
한국양식학회지
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제17권1호
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pp.1-7
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2004
A rainbow trout uncoupling protein 3 (UCP3) cDNA clone, encoding a 310 amino acid protein, was cloned and sequenced from a liver cDNA library. Two different splice variants designated UCP3-vl and UCP3-v2, were identified through liver cDNA library screening using rainbow trout UCP3 cDNA clone as a probe. UCP3-vl has 3 insertions in the UCP3 cDNA: the first insertion (133 bp), the second (141 bp), and the third (370 bp) were located 126 bp, 334 bp and 532 bp downstream from the start codon, respectively. UCP3-v2 contained a single insertion, identical in sequence and location to the second insertion of UCP3-vl. UCP3, a mitochondrial protein, functions to modulate the efficiency of oxidative phosphorylation. UCP3 has been detected from heart, testis, spinal cord, eye, retina, colon, muscle, brown adipose tissue and white adipose tissue in mammalian animals. Human and rodent UCP3s are highly expressed in skeletal muscle and brown adipose tissue, while they show weak expression of UCP3 in heart and white adipose tissue. In contrast to mammalian studies, RT-PCR and Southern blot analysis of the rainbow trout demonstrated that UCP3 is strongly expressed in liver and heart. UCP3, UCP3-vl, and UCP3-v2 all contain an Ava III short interspersed element (SINE), located in the 3'untraslated region (UTR). PCR using primers from the Ava III SINE and the UCP3 3'UTR region indicates that the UCP3 cDNA is structurally conserved among salmonids and that these primers may be useful for salmonid species genotyping.
The most important of various merits are the capacity to investigate an total genome for polymorphism and AELP is superior to any other systems in terms of the number of sequences amplified per reaction and its reproducibility(Vos et al., 1995). The AFLP technique provides a novel and very powerful DNA fingerprinting technique for DNAs of origin o. complexity (Vos et at., 1995). (omitted)
Park, Jung-Youn;Kim, Woo-Jin;Lee, Jeong-Ho;Min, Kwang-Sik
한국어업기술학회:학술대회논문집
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한국어업기술학회 2001년도 춘계 수산관련학회 공동학술대회발표요지집
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pp.232-233
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2001
The isozymic polymorphism among the Oncorhynchus masou subspecies (O. m. masou and O. m. ishikawai) and the genetic variation in the O. mykiss species (rainbow trout and its albino mutant) were examined in present study. The biochemical marker might be identified at the sublevel of species. The aims of this study is to examine such feasibility of using the isozyme polymorphisms of the fish management and characterization between subspecies or morphomutants such as albinism. (omitted)
The aim of this study was to determine the effect of chitosan (CH)-based nanocomposite coating applications [chitosan+TiO2 (CHT) and chitosan+TiO2+rosmarinic acid (CHTRA)] on changes in quality attributes of rainbow trout fillets during cold storage (4℃). Fish fillets were randomly divided into four groups and subjected to treatments (CH, CHT, CHTRA, and control). After treatments, the groups were packaged under a modified atmosphere (40% CO2+30% O2+30% N2) and stored at 4℃ for 18 days. During cold storage, the samples were subjected to physico-chemical and microbiological analyses. During storage, CH, CHT, and CHTRA treatments showed lower aerobic mesophilic and psychrotrophic bacteria counts than the control. However, the differences between coating treatments were not significant. The highest mean pH value was determined in the control group. As the storage time increased, the thiobarbituric acid reactive substances value increased. At the end of the storage period, no significant differences were observed between the treatments, including in the control group. The total volatile basic nitrogen (TVB-N) level in the control group was above 25 mg/100 g on day 15 of storage. However, the TVB-N level in the treatment groups was below 20 mg/100 g on day 18. It was also determined that coating application×storage period interaction had a significant effect on all color parameters (p<0.01). At the end of storage, the highest CIE L* was observed in CHTRA treatment. However, the value of this treatment did not differ from that of the CH treatment.
In fresh water fish hatcheries and farms, Saprolegniales often cause serious mortality to the fish and their eggs. Malachite green is an effective antifungal agent, but is carcinogenic to fish and humans. Alternative antifungal agents are needed. Presently, we tested various concentrations of MBT-01108 (Opuntia ficus-indica extracts) alone and in combination with bronopol, formalin and sodium chloride (MBT-01108 mixture) on in vitro mycelial growth and in vivo remediation of adult eel, Anguilla japonica, infected with Saprolegnia sp. and fertilized eggs of chum salmon, Oncorhynchus keta, to evaluate the compounds' antifungal efficacy on eyed-egg and hatching rates. MBT-Oll08 mixtures incorporating bronopol and formalin at respective concentrations of 50 and 30 parts per million (ppm), and 100 and 20 ppm were most effective in controlling Saprolegnia in vitro and in vivo (P<0.05). Repeated daily exposures to 50 ppm and 100 ppm MBT-01108 were more effective than exposure every 2-3 days post-fertilization for the inhibition of Saprolegnia infection of rainbow trout, Oncorhynchus mykiss eggs as compared with control (0 ppm).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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