• 한국수의병리학회지
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• 제5권2호
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• pp.57-62
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• 2001

Recently various molecular diagnostic techniques have been used to identify rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV), a causative agent responsible for acute hepatitis and disseminated intravascular coagulation in rabbit. But they were hard to perform and time consuming. To detect RHDV in a rapid and easy way, we developed biotinylated oligonucleotide probe within ORF 1 region encoding the polyprotein of RHDV in formalin-fixed and paraffin-embedded tissues from various tissues of 20 rabbits naturally infected with RHDV, Our in situ hybridization (ISH) was quickly carried out within two hours by MicroProbe capillary action system. The ISH produced a positive reaction in liver, kidney and lung. In conclusion, ISH with a biotintlated oligonucleotide probe provided a useful diagnostic method for detecting RHDV.

• 대한수의학회지
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• 제29권2호
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• pp.99-108
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• 1989

In order to observe the pathological changes of kidney in rabbits infected with the viral haemorrhagic disease, the kidney tissues from the 91 rabbits infected with the viral haemorrhagic disease were examined by light and electron microscopy. The results observed were as follows: 1. On light microscopic observation, the kidney lesions were identified as haemorrhagic glomerular necrosis(33.0%), membranous glomerulonephritis(20.9%), thrombotic glomerulopathy(19.8%), membranoproliferative glomerulonephritis(8.8%), mesangial proliferative glomerulonephritis(8.8%) ischemic acute tubular necrosis(7.7%), and acute serous glomerulitis(6.6%). 2. On electron microscopic observation, cytoplasmic degeneration of mesangial cells, and irregular thickening of basement membranes with electron dense granular materials were observed. In podocytes swelling of mitochondria, dilatation of endoplasmic reticulum and extensive fusion of foot processes were also observed. Nonenveloped round icosahedral picornaviral particles with a diameter of 28~33nm were detected in the cytoplasm of degenerative endothelial cells, polymorphonuclear leucoytes, and monocytes.

• 대한의생명과학회지
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• 제2권2호
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• pp.257-265
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• 1996

토끼 바이러스성 출혈증의 원인체를 실험 토끼에 접종하여 증식을 유도하고 간장에서 hematoxylin & eosin 염 색 에서 조직학적 진단과 세포내 viral RNA의 소재를 결정하기 위해 post-unicryl 포매한 block의 절편을 사용하여 단 염색과 전자현미경적 in situ hybridization을 시도하였다. 토끼 출혈증 viral RNA의 보합 결합에 이용하는 probe는 4717에서 4800(84bases)까지 oligonucleotide를 5'말단에 biotin-CE phosphoramidite로 표지하여 사용하였다. 보합결합물의 증명은 신호 표지로서 antibiotin antibody-l0nm gold를 사용하였으며, hybridization이나 증명은 기존 protocol에서 약간의 변법을 사용하였다. 0.02% glutaraldehyde에서 고정하고 unicryl resin 포매한 표본, biotinylated oligonucleotide probe, antibiotin antibody-l0nm gold로 실험한 결과 증강된 신호를 얻을 수 있었다. 특히 전처리를 생략하므로써 실험 과정을 간단하게 하여 신속한 결과를 얻을 수가 있었다. 전자현미경 in situ hybridization을 통하여 토끼 출혈증 바이러스의 주요 표적은 간세포로 감염 세포의 세포질 내 미토콘드리아와 핵 사이에서 immune gold입자가 뚜렷하게 표지 됨으로서 viral RNA를 증명할 수 있었다.

• 대한수의학회지
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• 제33권1호
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• pp.125-129
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• 1993

An acute fatal infectious disease in rabbits has been outbroken in Korea since 1985. This disease has been characterized as an acute hepatitis caused by viruses. However, viral pathogenesis in rabbit viral hepatitis leading to sudden death remain unclear. This report dealt with the electron microscopic findings on the spleen of experimentally infected rabbits, because spleen is one of the affected organs which have high titer of virus by a haemagglutination test. A typical crystalline array of virus was not found in the splenic cells of infected rabbits with acute hepatitis. Virus-like particles were seen within the phagosome of macrophages of the spleen. Ultrastructural changes in the spleen were severe with the lapse of time after inoculation. From these results, virus-like particles in the spleen were supposed to be phagocytosed by macrophage during viremia, while active replication of virus occurred in the liver. It was concluded that sudden death in this viral disease was caused by hepatic coma and/or circulatory disturbance.

• 대한수의학회지
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• 제32권3호
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• pp.399-402
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• 1992

국내에서 발생한 토끼 바이러스성 간염 소위 토끼 출혈병의 원인 바이러스를 감염토끼의 간조직으로 부터 분리정제한 후 바이러스의 핵산과 구성 단백질의 특징을 관찰하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 토끼간염바이러스는 분자량이 약 54 kilodalton인 한개의 구조단백을 가진 RNA 바이러스이며 바이러스 핵산의 크기는 약 7.5 kilobases로 나타났고 바이러스의 RNA는 배양세포에서는 감염을 일으키지 않았다. 바이러스 구성단백의 양상과 핵산의 크기 등을 종합해 볼 때 토끼의 간염 바이러스는 Caliciviridae에 속하는 것으로 간주된다.

• 대한수의학회지
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• 제39권2호
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• pp.359-364
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• 1999

We investigated the pathological changes in young rabbits which were experimentally infected with rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV). Experimental infection of RHDV was carried out in both thymectomized and non-thymectomized young immature rabbits and adult rabbits. None of young rabbits infected with RHDV died during the experiment. Histologically, single or focal hepatocellular degeneration and necrosis with mild lymphocyte infiltration were observed in the rabbits killed at 30 hours and 5 days PI. Lymphocyte infiltration was more severe at 5 days PI than at 30 hours PI. RHDV antigens were mainly detected in the degenerating hepatocytes adjacent to the infiltrated lymphocytes at 30 hours PI and 5 days PI. In electron microscopical observation, infiltrated lymphocytes in the lesions had large nuclei without cytoplasmic granules and interdigitated with adjacent hepatocytes. It is assumed that infiltrated lymphocytes in hepatic lesions in RHDV infected young rabbits are T-lymphocytes and originate from peripheral lymphoid organs or tissues rather than from thymus.

• 대한수의학회지
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• 제32권4호
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• pp.605-608
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• 1992

국내에서 발생된 토끼 virus성간염의 병리학적 소견을 명확히 규명하기 위하여 2~14개월령의 재래토끼에 간염에 이환된 토끼의 간조직 유제를 접종한후 임상 및 병리학적으로 관찰하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 접종한 30마리중 90%인 27마리가 감염되어 접종후 96시간이내에 폐사되었고 2~3월령 3두는 감염이 일어나지 않았다. 임상증상으로는 식욕부진, 체온상승, 연변 등이 나타났고 3두에서는 비강내로부터 혈액성 포말이 관찰되었다. 부검소견으로는 장기의 충출혈, 간장의 변성이 전예에서 관찰되었고 소장의 카타르성 장염과 방광내 혼탁한 뇨충만도 관찰되었다. 광학현미경적 소견으로는 간괴사가 정도의 차이가 있기는 하나 폐사된 27두 전예에서 관찰되었고, 출혈빈도는 폐가 가장 많았고 심장, 간장, 비장, 신장 및 흉선 순으로 나타났다. 한편 출혈이 관찰되지 않은 예에서도 간의 괴사소견은 현저하였다. 소장의 카타르성 장염과 뇌의 혈관주위 임파구 침윤도 관찰되었다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 본 질병에서 출혈소견은 개체에 따라 변화가 심하였으나 중요한 소견은 간염으로 나타났고 원인 virus는 일차적으로 간에 친화성을 가지며 동시에 viremia를 일으켜 전신장기에 출혈을 야기하는 것으로 추정된다.

• 대한의생명과학회지
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• 제2권2호
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• pp.249-255
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• 1996

토끼 출혈증 바이러스에 감염된 조직을 10% 포르말린 고정, 파라핀 블록으로 보관했던 것으로 표본을 만들고 biotin 표지된 올리고뉴클레오티드 probe를 사용하는 in situ hybridization 기법으로 viral RNA를 조사하였다. in situ hybridization 기법은 핵산을 규명하는 다른 방법들에 비하여 신속하고 특이성인 높은 기법으로 모든 과정이 MicroProbe$^{TM}$ capillary action system에서 1-2시간 이내에 완료된다. Viral RNA는 간세포의 세포질과 신장의 피질에서 주로 관찰되었으나, 폐조직과 신장의 수질에서는 부분적으로 적색신호가 보였다. 비록 기술적인 한계를 가지고 있지만 다른 핵산 진단방법 보다 많은 장점을 가지고 있어 조직 병리학적으로 바이러스 진단하는데 하나의 독특한 기법으로 채용되리라 기대된다.