Proceedings of the Materials Research Society of Korea Conference
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2011.05a
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pp.53.1-53.1
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2011
Bioactive glass powders were synthesized by hydrothermal chemical route by the use of ultrasonic energy irradiation. We used sodalime, calcium nitrate tetra hydrate and di ammonium hydrogen phosphate as the precursor material to synthesize $SiO_2$ rich bio-active glass materials. The $SiO_2$ content was varied in the precursor mixture to 60, 52 and 45 mole%. Dense compacts were obtained by microwave sintering at $1,100^{\circ}C$. Mechanical properties were characterized for the fabricated dense bioactive glasses and were found to be comparable with conventional CaO-$SiO_2$-$Na_2O$-$P_2O_5$ bioactive glass. Detailed biocompatibility evaluation of the glass composition was investigated by in-vitro culture of MG-63 cell and mesenchyme stem cell. Cell adhesion behavior was investigated for both of the cell by one cell morphology for 30, 60 and 90 minutes. Cell proliferation behavior was investigated by culturing both of the cells for 1, 3 and 7 days and was found to be excellent. Both SEM and confocal laser scanning microscopy were used for the investigation. Western blot analysis was performed to evaluate the bimolecular level interaction and extent and rate of specific protein expression. The ability to form biological apatite in physiological condition was observed with simulated body fluid (SBF). In-vivo bone formation behavior was investigated after implanting the materials inside rabbit femur for 1 and 3 month. The bone formation behavior was excellent in all the bioglass compositions, specially the composition with 60% $SiO_2$ content showed most promising trend.
In vivo labeling of bone with fluorochromes is a widely used method for assessment of bone formation and remodeling processes. In particular, calcein is used as a marker for identification of bone growth, which is indicated by a green color. Calcein green is a calcium chelator that adheres to regions of mineralizing bone thereby allowing localization of new bone. Bone formation and remodeling in vivo can be assessed by calcium-binding calcein labeling. In this study, changes in the femoral bone of a normal mouse model at both 4 and 8 weeks were evaluated using calcein labeling. Intense deposition of calcium in the bone was observed after application for 8 weeks. A mouse model is suitable for application in in vivo experiments using genetically modified mice, such as knock-out mice, however data regarding femoral cross sectional bone in young mice are limited. The current study confirmed calcein as a useful marker for identification of bone growth, which was indicated by a green color on photomicrographs. This methodological process may provide basic information for interpreting bone formation and regeneration to pharmacologic or genetic manipulation in mice.
Safi, Ihab Nabeel;Hussein, Basima Mohammed Ali;Al-Shammari, Ahmed Majeed
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.52
no.3
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pp.242-257
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2022
Purpose: This study investigated periodontal ligament (PDL) restoration in osseointegrated implants using stem cells. Methods: Commercial pure titanium and zirconium oxide (zirconia) were coated with beta-tricalcium phosphate (β-TCP) using a long-pulse Nd:YAG laser (1,064 nm). Isolated bone marrow mesenchymal cells (BMMSCs) from rabbit tibia and femur, isolated PDL stem cells (PDLSCs) from the lower right incisor, and co-cultured BMMSCs and PDLSCs were tested for periostin markers using an immunofluorescent assay. Implants with 3D-engineered tissue were implanted into the lower right central incisors after extraction from rabbits. Forty implants (Ti or zirconia) were subdivided according to the duration of implantation (healing period: 45 or 90 days). Each subgroup (20 implants) was subdivided into 4 groups (without cells, PDLSC sheets, BMMSC sheets, and co-culture cell sheets). All groups underwent histological testing involving haematoxylin and eosin staining and immunohistochemistry, stereoscopic analysis to measure the PDL width, and field emission scanning electron microscopy (FESEM). The natural lower central incisors were used as controls. Results: The BMMSCs co-cultured with PDLSCs generated a well-formed PDL tissue that exhibited positive periostin expression. Histological analysis showed that the implantation of coated (Ti and zirconia) dental implants without a cell sheet resulted in a well-osseointegrated implant at both healing intervals, which was confirmed with FESEM analysis and negative periostin expression. The mesenchymal tissue structured from PDLSCs only or co-cultured (BMMSCs and PDLSCs) could form a natural periodontal tissue with no significant difference between Ti and zirconia implants, consequently forming a biohybrid dental implant. Green fluorescence for periostin was clearly detected around the biohybrid implants after 45 and 90 days. FESEM showed the invasion of PDL-like fibres perpendicular to the cementum of the bio-hybrid implants. Conclusions: β-TCP-coated (Ti and zirconia) implants generated periodontal tissue and formed biohybrid implants when mesenchymal-tissue-layered cell sheets were isolated from PDLSCs alone or co-cultured BMMSCs and PDLSCs.
Park, Soo-Ran;Park, Yang-Ho;Park, Young-Ju;Park, Jun-Woo;Lee, Yong-Chan;Ahn, Byoung-Keun
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.28
no.4
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pp.302-309
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2002
In order to improve the success rate of implants, various implant designs have been developed. Although there have been enough efforts to handle the surface of the implant with careful choice of material and mechanics so that the bone and the implant can be tightly joined together, they have still failed to play the role of periodontal ligaments of the natural teeth in the past. The role of periodontal ligaments is very important since it can improve the initial stability of implant by absorbing the impacts. The purpose of this study is, thus, to test the possibility of alleviating the impact when the surface of the implant was coated with chitosan, a natural polymer, and making sure that the coated material stayed on. Then, the condition of newly developed bone formation and the degree of inflammation in response was closely observed in the surface level. In the main experiment, Chitosan coated implant ($3.3mm{\times}7mm$) was implanted on both the right and the left side of rabbit's femur. The animals were each sacrificed on the $1^{st}$, $2^{nd}$, $3^{rd}$, $7^{th}$, $14^{th}$, $21^{st}$ and 28th day. The process was observed under an light microscope after the Toluidin Blue staining. From the experiment, it was found that the chitosan was evenly distributed on the surface of the screws, and the implant was adjoined with adjacent bone. There was a sign of inflammation on the $3^{rd}$ day, but on the $14^{th}$ day, the formation of woven bone and newly formed bones were noticed. Also, chitosan filled the gap was formed between the implant and the newly formed bone. The implant, the chitosan and the newly formed bone were forming one unit as a result. Therefore, it was found that chitosan coated implant could absorbe the impact in the initial stage of implant.
In recent years immediate implantation has been tried by a few clinicians. This study placed IMZ implants in the rabbit femur with and without bony defects around the implant for simulating fresh extraction site. And one group with bony defects used porous hydroxyapatite ganules(HA) to fill if and the other group left the bony defects around the implant. The purpose of this study was to compare the shear bond strength and the bony contact and formation around the implant. Fifteen rabbits were divided into three groups and placed 10 IMZ implants to each group. Implant sites were surgically prepared with IMZ drills kit and implants were placed(Control), artificial bony defect was created with Apaceram drills kit around the implant sites and implants were placed(Experimental I), bony defect was filled with porous hydroxyapatite granules(Experimental II). Thereafter, rabbits were sacrificed at 8th week and specimens were prepared and pushout tested for shear bond strength of bone-implant interface immediately. Undecalcified and decalcified specimens were prepared with Vilanueva and hematoxylin-eosin stain for light microscopic finding. The results of this study were as follows. 1. In the control group, mean shear strength of bone-implant interface was $2.614{\pm}0.680$ MPa, experimental I was $0.664{\pm}0.322$ MPa, and experimental II was $2.281{\pm}0.606$ MPa. There was significant difference between control and experimental I, between experimental I and experimental II, but did not show significant difference between control and experimental II statistically. 2. In the bony formation surrounding IMZ implant of the three groups, that of cortical bone is more advanced than cancellous bone area. 3. In the histological findings of undecalcified specimens, control and experimental II showed more than 50% of bony or osteoid formation at the bony-implant interface. 4. In the histological findings of undecalcified specimens, experimental I showed less than 50% of bony or osteoid formation at the interface, and observed partial bony defect in the coronal zone. 5. In the experimental II group, were observed direct bony contact to hydroxyapatite granules, and infiltration of a few giant cells. 6. No inflammatory responses were seen around the titanium implants and the hydroxyapatite granules.
The biocompatibility of the titanium has been estabilished through various experimental studies such as cell culture toxicity test, pyrogen test, mutagen test and others. In order to confirm biocompatibility after fabrication of titanium and to clarify the difference between the bone reaction after insertion of the lathed titanium rods and the bone reaction after insertion of the finished and polished rods, both rods were implanted into the proximal femur of a rabbit. Histologic reactions in the bone were observed according to the ASTM standards at the intervals of 6 weeks, 12 weeks and 26 weeks after implantation. The result were as follows : In 6 weeks after implantation of lathed titanium rods, inflammatory reactions, such as minimal degree infiltration of polymorphonuclear leukocytes and lymphocytes were observed in all cases. This was thought to he caused by surgical trauma. However, inflammatory cell infiltration was not seen after implantation of polished and finished rods in all cases. The cellular infiltration and the histologic reaction of the hone after implantation of lathed group were significantly more pronounced than those after implantation of the finished group. In 12 weeks after implantation of lathed rods, two of four cases revealed a minimal degree of cellular infiltration. No inflammatory cell infiltration was demonstrated after implantation of the finished group. The cellular infiltration and histologic reaction seemed to be more pronounced in the lathed group, but they were not significant statistically. At 26 weeks after implantation of the lathed and finished group, there was no cellular infiltration in both groups. New bone formation was observed up 26 weeks, and no difference between lathed titanium rods and finished titanium rods were apparent. Mild bone necrosis was observed in 1 case out of 11 cases in which lathed titanium rods were implanted. Bone necrosis was not observed in the finished titanium rod group. Fibrosis was observed in both groups, but differences were not significant between the experimental groups. In the lathed titanium rods group and the shorter interval group, inflammatory cell infiltration was significantly higher. Finished titanium rods and longer interval groups had markedly decreased tendences in histologic reaction ratings. As a conclusion, although certificated titanium might be safe to use, difference of biocompatibility were observed depending on the method of surface finish. By identifying biocompatibility as a long-term standardized animal study, we can develop progressed internal fixation device that is safe for human beings.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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