• Communications for Statistical Applications and Methods
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• 제16권6호
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• pp.1037-1046
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• 2009

Copy number variations(CNVs) are known as one of the most important factors in susceptibility to genetic disorders because they affect expression levels of genes. In previous studies, pyrosequencing, mini-sequencing real-time polymerase chain reaction(PCR), invader assays and other techniques have been used to detect CNVs. However, the higher the copy number in a genome, the more difficult it is to resolve the copies, so a more accurate method for measuring CNVs and assigning genotype is needed. PCR followed by a quantitative oligonucleotide ligation assay(qOLA) was developed for quantifying CNVs. The aim of this study was to compare the two methods for detecting and quantifying the CNVs of duplicated gene: the published pyrosequencing assay(pyro_CNV) and the newly developed qOLA_CNV. The accuracy and precision of the assay were evaluated for porcine KIT, which was selected as a model locus. Overall, the root mean squares(RMSs) of bias and standard deviation of qOLA_CNV were 2.09 and 0.45, respectively. These values are less than half of those of pyro CNV.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제49권5호
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• pp.559-568
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• 2007

최근 들어 유전자 또는 DNA 분절의 반복수 변이 (CNV)에 관한 연구가 다수 수행되었으며, 그 분석 방법 및 기기 또한 다양하게 발달되었다. 본 연구는 Landrace 품종의 KIT 유전자 CNV 탐지를 위하여 다른 분석 방법들에 비하여 정확도가 높은 정량적 OLA 기법(qOLA)을 이용하였다. qOLA와 pyrosequencing assay의 조합하여 분석한 결과를 Landrace 44두에 대한 좌표 분석을 한 결과 I1/I1 또는 I3/i(IBe), I1/I2 또는 I3/IP, I1/I3, I1/IP 또는 I2/i(IBe), I2/I2, I2/IP의 6 genotype으로 분류되었으며, PROC FASTCLUS procedure을 이용한 통계 분석과 좌표 분석을 상호 비교한 결과 genotype의 분류가 100% 일치하였다. 기기간의 차이점을 조사하기 위해 qOLA_3100과 qOLA _3130의 관측치 비교를 실시한 결과 동일한 genotype 분류결과를 얻었다. 또한 정밀성 및 정확도 비교에서 qOLA_3100의 경우 표준편차와 변이계수의 평균이 2.33과 4.10로 qOLA_3130(2.67과 4.81)에 비하여 낮게 나타났다. qOLA 반응전 PCR 산물에 대하여 proteinase K 처리효과를 분석한 결과 pro- teinase K를 처리한 경우 전기영동 분석시 noise peak들이 제거되었으며 각 genotype의 이론적 비율에 보다 정확히 일치하였다.