자극성 액체의 주성분인 allyl isothiocyanate, capsaicin 및 dihydrocapsaicin을 기체크로마토그래피-질량분석기로 정량하는 방법에 대하여 연구하였다. 방호용인 목적이지만 스프레이 약제의 유해성과 품질관리는 또 다른 사회적 문제를 야기할 가능성이 있다. 이를 위해 시판 유통되고 있는 호신용 스프레이로부터 자극성 액체의 pH, 약제의 세척을 위한 세제의 용해정도, 기타 물질의 사용유무를 검토하였다. 마지막으로 자극성 성분으로 이용되는 allyl isothiocyanate, capsaicin 및 dihydrocapsaicin의 함량을 GC-MS로 정량하였다. 약제의 pH는 5.7 정도로 약산성이었고, 세제를 사용할 경우 약제의 유화되는 정도가 우수하였고, 실험에 사용된 액체에는 형광물질 및 유해 유기용매가 포함되지 않았다. 이전 연구 결과를 바탕으로 기체크로마토그래피-질량분석기를 이용하여 분석한 실제시료 3가지에 포함된 성분은 한 가지 제품에서는 allyl isothiocyanate 단일 성분[47,600 mg/kg (47.6%)]이었고, 나머지 두 제품은 capsaicin[228 mg/kg~368 mg/kg (1.14%~1.84%)]과 dihydrocapsaicin [224 mg/kg~414 mg/kg (1.12%~2.07%)] 혼합성분으로 구성되어 있었다.
한국산 고추분들의 매운맛 성분을 조사한 결과 한국산 고추의 capsaicin과 dihydrocapsaicin의 합은 7.0~75.9mg/100g으로 매운맛이 광범위하게 존재하였고, 품종의 지표값인 이들 두 capsaicinoids량의 비값도 0.8~1.1로 여러 품종의 고추들이 존재함을 알 수 있었다. 매운맛에 대한 관능검사 결과 강도는 기기 분석의 결과와 완전히 비례하였고 매운맛이 10ppm 이상부터는 관능이 포화상태에 도달하였다. 우리 나라 사람들의 매운맛 선호 농도는 7.8~15.6ppm으로 넓은 범위에 걸친 기호도를 나타내었다.
무우 속의 매운 맛 성분을 용매추출법 ($CCl_4$,사용)으로 분리하여 RP-HPLC법에 의해 정제한 후에 관능검사에 의해 pungency test를 하고, UV spectrum분석, GC/MC 분석을 수행한 결과 4-methylthio-3-butenyl isothiocyanate 임을 확인하였다. RP-HPLC에서 mobile Phase로 70% acetonitrile을 사용하였는데, 정제된 4-methylthio-3-butenyl isothiocfanate는 단일 peak로 분리되어 나왔고 이때의 retention time은 5.2분이였다. 아울러 RP-TLC에서 Rf치는 0.9이었다.
고속 액체크로마토그래피를 이용하여 고추 중의 주요 신미성분인 Capsaicin 및 Dihydrocapsaicin을 분석하기 위한 최적 조건을 검토하고 고추의 품종, 재배지역 및 건조 방법에 따른 함량의 차이를 비교 검토하였다. 시료중의 Capsaicin 및 Dihydrocapsaicin을 70% ethanol, $60^{\circ}C$에서 1시간 동안 처리함으로써 효과적으로 추출할 수 있었으며 재현성 및 회수율시험 결과 분석데이타의 해석은 피이크의 면적을 기준으로 하는 것이 바람직함을 알수 있었다. 고추의 품종, 재배지역 및 건조 방법에 따라 함량의 차이가 큰 것으로 나타났으며 특히 건조방법에 의한 차이가 더욱 현저하여 태양건조의 경우가 기계건조의 경우에 비하여 capsaicin의 경우는 최고 80%, dihydrocapsaicin의 경우는 최고 60% 정도 높게 나타났다.
본 연구에서는 생각의 매운맛을 주요성분인 gingerol 화합물의 분석방법을 개선할 목적으로, 원료 생각을 아세톤으로 추출한 후 그 추출물을 TLC 및 LiChrosorb RP-18 column으로 장착된 HPLC를 사용하여 3가지 gingerol 동족체 화합물을 분리하였고, LC/MS 및 NMR로 확인한 결과 생강의 동족체 화합물은 [6]-, [8]-, [10]-gingerol로 확인되었다. 본 방법으로 추출한 gingerol 표준품을 사용하여 시판 원료생강 및 생각 페이스트 중의 gingerol 함량을 측정한 결과, 전자의 경우 [6]-, [8]-, [10]-gingerol 함량은 635.5 mg%, 206.6 mg%, 145.7 mg%이었고, 후자의 경우는 418.2 mg%, 142.6 mg%, 103.3 mg%로 각각 구성되어 있었다.
Capsaicin(8-methyl-N-vanillyl-6-nonenamide) is the principal pungent component of Capsicum fruits. This work is directed to the capsaicin-hydrolyzing enzyme playing a key role in the rate limiting and critical step of capsaicin metabolism. In order to get precise information on the enzyme's subcellular location, rat liver homogenate was divided into six subcellular fractions by differential centrifugation technique: crude nuclear pellet, PNS(post nuclear supernatant) fraction, lysosomal pellet, cytosol, Tris wash fraction, micrisomes. Capsaicin-hydrolysing enzyme activity was analysed by high performance liquid chromatography(HPLC). This enzyme was found at the highest specific activity in the microsomal fraction and co-distributed with marker enzymes of the endoplasmic reticulum, NADPH-cytochrome c reductase and nucleoside diphosphatase. This is compatible with the result of ninhydrin color reaction of vanillylamine, primary metabolite of capsaicin hydrolysis, on thin layer chromatography(TLC). This enzyme is most active at pH $8.0{\sim}9.0$. Definite subcellular location of this enzyme will make it easy to proceed with further study.
Capsaicin(CAP) is a pungent ingredient of hot pepper that has been used as a spicy food additive, pre-servative, and medicine. In this study, the effect of CAP on L-ascorbic acid(AsA)level in various tissues as well as its urinary excretion. and drug-metabolizing enzyme activity in rats were investigated. Rats fed AsA-deficient diets for 17days were injected intraperitoneally with 1mg of CAP in 0.5ml of ethanol-Tween 80-saline(20 :10 : 70, v/v/v). Control rats received the equal volume of the same solution without CAP. Urine was collected for 3 day after the CAP injection, and after 5 days tissues were removed; their AsA contents were measured by high performance liquid chromatography combined with and electrochemical detector. In addition, hepatic microsomal ethoxyresorfin O-deethylase(EROD) activity as measured. Urinary AsA excretion changed significantly following CAP injection. One and two days after CAP injection, the urinary AsA increased 2-and 3-fold in the CAP injected group, compared to the control, but the contents of adrenal glands and brain were lower than those of the control Dehydroascorbic acid contents in adrenal glands of the CAP injected group were higher than that of the control These results suggested that a single large dose of CAP could temporarily cause the redistribution of AsA in tissues accompanying by its urinary excretion, by affecting probably a biological system including mixed function oxygenase system(MFOS)
본 실험에서는 국내에서 널리 사용되어지고 있는 고추의 매운 성분인 캡사이신 및 올레오신을 세절시킨 베이컨 육에 첨가하여 그 저장성효과를 TBA가 및 최근에 개발된 형광 발광 검출기가 부착된 CL-HPLC법을 이용한 과산화물가를 측정하였다. 세절 베이컨 육에 있어서의 TBA가는 캡사이신 0.02% 첨가구, 올레오레신 0.02% 첨가군이 기존에 사용해 온 에리 솔빈산 0.02% 첨가수준보다 항산화 효과가 더 크게 나타났다. CL-HPLC로 검출한 hydroperoxide의 생성은 에리솔빈산 첨가구가 대조군에 비해 효과가 더 크게 나타났으나, 에리솔빈산 0.01% 및 0.02%간의 첨가수준에 따른 차이 보이지 않았다. 캡사이신 0.01% 첨가구는 에리솔빈산 0.02% 첨가효과와 거의 같은 효과를 나타냈으며, 5주째에 있어서는 캡사이신 0.02% 첨가구가 캡사이신 0.01% 첨가구에 비해 항산화효과가 유의하게(p<0.05) 더 높게 나타났다. CL-HPLC를 이용해 세절 베이컨에 대한 과산화물가를 책정한 결과, 올레오레신 0.02% 첨가구는 에리솔빈산 0.02% 및 캡사이신 0.01% 첨가수준의 효과와 거의 비슷한 효과를 나타 냈으며, 올레오레신 0.02% 첨가구는 캡사이신 0.02% 첨가수준과 거의 필적할 정도의 항산화 효과를 나타냈다. CL-HPLC는 항상화 효과 측정에 도입할 수 있는 방법임을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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