The effects of dietary betaine on performance, blood compositions, hepatic amino acid concentrations and hormonal secretions were examined in laying hens. Egg production was significantly higher in birds fed the 16.5 % protein diet compared to those fed 14.5 % protein diet(p<0.05), whereas dietary supplementation of betaine did not show any significant effect. The high level of protein and betaine supplementation significantly improved egg weight, egg mass and feed conversion(p<0.05), while eggshell breaking strength, eggshell thickness and Haugh unit were not influenced by betaine and dietary protein levels. Supplemental betaine did not affect serum total protein, albumin and BUN concentration. However, uric acid concentration significantly increased in 600 ppm betaine-fed groups(p<0.05). Concentrations of most hepatic amino acid were influenced by increased protein feeding and dietary betaine supplementation. Hormone studies recorded significantly higher serum and hepatocyte IGF-I concentration in 600 and 1,200 ppm betaine treatments(p<0.05) compared to those of control group. IGF-I mRNA gene expression of hepatocytes revealed statistically correlated increase in 600 and 1,200 ppm betaine-fed groups compared to the controls(p<0.05). Serum IGFBP-3 concentration was significantly elevated in 600 ppm betaine treatments. However, the secretion of IGFBP-1 in hepatocyte of laying hens fed with 600 and 1,200 ppm of betaine showed a significant decrease compared to the control group(p<0.05). Results of these study show that dietary betaine supplementation affects protein and hormone metabolism in laying hens.
We have intended to accelerate the secretion of human lysozyme(HLY) with permeabilizing agents from the cultivated cells of the recombinant Saccharomyces cerevisiae. The five agents CaCl2, Tween 80, ethanol, Triton X 100, and cetyltrimethylammonium bromide(CTAB) were used as permeabilizing agents. Treatments of the yeast cell with CaCl2, Tween 80, and ethanol were effective to increase the secretion from the yeast cells. Especially, treatment of 10% ethanol increased the extracellular HLY activity by 38.6% at 30oC for 48 h in culture broth. But Triton X 100 and CTAB unexpectedly didn't play a role in increase of HLY secretion. Recovery of a foreign protein by permeabilizing agents is easier than by osmotic shock, and is less expensive than enzymatic digestion.
In this study, we investigated whether cynaroside, cynarin and linarin derived from Chrysanthemum indicum L. affect the secretion, production and gene expression of MUC5AC mucin in airway epithelial cells. Confluent NCI-H292 cells were pretreated with cynaroside, cynarin or linarin for 30 min and then stimulated with PMA (phorbol 12-myristate 13-acetate) for 24 h. The MUC5AC mucin gene expression, mucin protein production and secretion were measured by RT-PCR and ELISA, respectively. Effect of linarin on EGF (epidermal growth factor) - or TNF-${\alpha}$ (tumor necrosis factor-${\alpha}$)-induced MUC5AC mucin gene expression and mucin protein production was also examined. The results were as follows: (1) Cynaroside and cynarin did not significantly affect PMA-induced MUC5AC mucin secretion from NCI-H292 cells. However, linarin decreased MUC5AC mucin secretion; (2) Cynaroside did not affect PMA-induced MUC5AC mucin production and gene expresion from NCI-H292 cells. However, cynarin and linarin inhibited the production and gene expression of MUC5AC mucin; (3) Linarin also inhibited the production and gene expression of MUC5AC mucin induced by EGF- or TNF-${\alpha}$ from NCI-H292 cells. These results suggest that linarin can regulate the gene expression, production and secretion of mucin, by directly acting on airway epithelial cells.
Yoon, Yong Pill;Ryu, Jiho;Park, Su Hyun;Lee, Hyun Jae;Lee, Seungho;Lee, Sang Kook;Kim, Ju-Ock;Hong, Jang-Hee;Seok, Jeong Ho;Lee, Choong Jae
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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제77권5호
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pp.203-208
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2014
Background: In this study, we investigated whether lobetyolin, lobetyol, and methyl linoleate derived from Codonopsis pilosula affect MUC5AC mucin secretion, production, and gene expression from airway epithelial cells. Methods: Confluent NCI-H292 cells were pretreated with lobetyolin, lobetyol, or methyl linoleate for 30 minutes and then stimulated with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) for 24 hours. The MUC5AC mucin gene expression, and mucin protein production and secretion were measured by reverse transcription polymerase chain reaction and enzyme-linked immunosorbent assay, respectively. Results: Lobetyolin, lobetyol, and methyl linoleate inhibited the gene expression of MUC5AC mucin induced by PMA; lobetyolin did not affect PMA-induced MUC5AC mucin production. However, lobetyol and methyl linoleate inhibited the production of MUC5AC mucin; lobetyolin and lobetyol did not significantly affect PMA-induced MUC5AC mucin secretion from NCI-H292 cells. However, methyl linoleate decreased the MUC5AC mucin secretion. Conclusion: These results suggest that among the three compounds, methyl linoleate can regulate gene expression, production, and secretion of MUC5AC mucin by directly acting on the airway epithelial cells.
The present investigation was performed to see a possible influence of the dorsal raphe nucleus (DRN) on pancreatic exocrine secretion in anesthetized rats since the DRN had been known to exert a regulatory mechanism on sympathetic activity which was known to be very important for pancreatic exocrine secretion, particularly in rats. Twenty-nine Sprague-Dawley rats fasted for 24 hours were anesthetized by i.p. injection of 1 g/kg of urethane. The pancreatic duct was cannulated to collect pancreatic juice while bile juice was diverted into the jejunum. The duodenopyloric junction was tightly ligated. After surgery for collection of pancreatic exocrine secretion and recording of carotid blood pressure, a coaxial electrode was stereotaxically inserted in the DRN with a guide of a brain atlas. And then, electrical stimulus of biphasic square wave with 2 v, 2 msec, 40 Hz was applied on the electrode for 10 minutes. Pancreatic volume flow and protein output secreted in 10 min were measured. Either bilateral cervical vagotomy or spinal cord transection at the level of $C4{\sim}C5$ was performed 20 min prior to stimulation of the DRN. 1) Electrical stimulation of the DRN resulted in significant (p<0.05) increase in pancreatic volume flow and protein output. These stimulatory effects were not affected by cervical vagotomy but completely abolished by cervical cord transection. 2) Electrical stimulation of the DRN also resulted in significant (p<0.05) rise of blood pressure of the carotid artery. The hypertensive effect was not affected by cervical vagotomy but completely abolished by cervical cord transection. The results strongly suggest that the DRN, a part of the central serotonergic system, could exert a stimulatory influence on pancreatic exocrine secretion by increasing the sympathetic activity in anesthetized rats.
Repebody는 비면역 글로블린 인공 항체로 저렴하고 빠르게 생산 가능한 맞춤형 항체이다. 그러나 의료용 repebody의 생산은 저수율 및 복잡한 정제 공정으로 인해 여전히 어려움을 겪고 있다. Pseudomonas fluorescens의 ABC transporter를 사용한다면 생산 공정을 간소화하고 비용을 줄일 수는 있지만 repebody는 양전하를 띠어 분비 효율이 낮다. 따라서 등전점(pI)이 높은 repebody의 등전점을 낮추어 음전하를 띄도록 해야 한다. 이것을 위해 repebody의 N 말단과 C 말단에 연속된 아스파탐산을 붙여 보았지만 분비가 증가하지 않았다. 다른 방법으로 ABC transporter를 통한 repebody 분비 효율을 높이기 위해 repebody의 항원 결합 부위의 반대쪽에 존재하는 열다섯 개의 양전하 아미노산을 아스파탐산으로 변환하여 repebody 표면이 강한 음전하를 띠도록 하였다. 그 결과, 기존 repebody의 발현 단백질 당 분비효율은 21.2%였으나 변형한 과음전하 repebody의 분비효율은 58.5%로 향상되었다. 결론적으로 과음전하를 통해 만들어진 repebody는 P. fluorescens에 의해 세포 바깥에 분비 생산할 수 있었다.
This study was undertaken establish the relationship between trypsin inhibitor in raw soybean and antinutritional effect of raw legumes. 1) Among legumes produced in Korea, Glycine max contains a relatively high amount of protein(higher than 40%) compared with kindey bean, sword bean and mung bean and, furthermore, soybean which contains a high amount of protein possesses high trypsin inhibitory activity. 2) Disc electrophoretic pattern exhibited pattern exhibited that the crude protein preparation from Glycine max produced about 9-12 protein bands, and the pattern of electrophoretic mobility was very similar to each other. However, only a few protein bands were observed from the crude protein preparation of yard long bean, sword bean, adzuki bean, mung bean and rice adzuki. From the eluate of the sliced gel, it was confirmed that among those bands, only the fastest moving band contains trypsin inhibitory activity. 3) In chicks fed the normal diet the body weight was increased steady from one week and reached to 40% increase for three weeks but in chick fed raw bean diet, there was no body weight gain until two weeks feeding and only 10-20% of body weight gain was observed at the end of three week feeding. On the other hand, in chicks fed raw bean diet the weight of pancreatic tissue per 100g body weight was increased to about two-fold for two or three weeks but there was no change in liver weight. 4) In the case of amylase secretion from the pancreatic fragment, very strong stimulation on amylase secretion from pancreatic tissue of chicks fed a normal diet was produced by one unit of cholecystokin-pancreozymin. However, no stimulation was observed from pancreatic fragment of chick fed raw bean diet.
Objectives : This study was conducted to confirm the skin anti-aging effect of Chungpyesagan-tang(CPSGT) extract. Methods : We performed MMT assay to confirm the cytotoxicity of CPSGT. After inducing matrix metalloproteinase-1(MMP-1) with tumor necrosis factor-α(TNF-α), we investigated mRNA expression and protein secretion of MMP-1 by real-time RT-PCR and ELISA. In addition, we measured the protein expression of mitogen-activated protein kinases(MAPKs) and transcription factors by western blot. Results : CPSGT was not cytotoxic at 25-800㎍/㎖. The mRNA expression and protein secretion of MMP-1 decreased when treated with CPSGT. The protein expression of p-ERK, p-JNK, p-p38 was decreased by CPSGT. In addition, the protein expression of p-c-jun and p-NF-κB, which are transcription factors, were also decreased. Conclusion : This suggests that CPSGT can inhibit MMP-1 and thus be a potential anti-aging substance.
The present study was attempted to examine the effect of staurosporine (STS) on secretion of catecholamines (CA) evoked by cholinergic stimulation and membrane depolarization from the isolated perfused rat adrenal gland and to establish its mechanism of action. The perfusion of STS $(3{\times}10^{-7}{\sim}3{\times}10^{-8}\;M)$ into an adrenal vein for 20 min produced a dose-dependent inhibition in CA secretion evoked by ACh $(5.32{\times}10^{-3}\;M),$ high $K^+\;(5.6{\times}10^{-2}\;M),$ DMPP $(10^{-4}\;M\;for\;2\;min),$ McN-A-343 $(10^{-4}\;M\;for\;2\;min),$ cyclopiazonic acid $(10^{-5}\;M\;for\;4\;min)$ and Bay-K-8644 $(10^{-5}\;M\;for\;4\;min).$ Also, in the presence of tamoxifen $(2{\times}10^{-6}\;M),$ which is known to be a protein kinase inhibitor, CA secretory responses evoked by ACh, high $K^+,$ DMPP, McN-A-343, Bay-K-8644 and cyclopiazonic acid were also significantly depressed. However, in adrenal glands preloaded with STS $(10^{-7}\;M)$ under the presence of phorbol-12, 13-dibutyrate $(10^{-7}\;M),$ a specific activator of protein kinases (for 20 min), the inhibitory effect of STS on CA secretory responses evoked by ACh, high $K^+,$ DMPP, McN-A-343, Bay-K-8644 and cyclopiazonic acid was greatly recovered to the extent of the control release as compared to those in the presence of STS only. These results demonstrate that STS causes the marked inhibition of CA secretion evoked by stimulation of cholinergic (both nicotinic and muscarinic) receptors as well as by membrane depolarization, indicating strongly that this effect may be mediated by inhibiting influx of extracellular calcium and release in intracellular calcium in the rat adrenomedullary chromaffin cells through preventing activation of protein kinases. Furthermore, these findings also suggest that these STS-sensitive protein kinases play a modulatory role partly in regulating the rat adrenomedullary CA secretion.
In order to identify the protein(s) secreted into culture medium by the sool-l/retl-l mutation of Saccharomyces cerevisiae, proteins from the culture medium of cells grown at permissive (28$^{\circ}C$) and non-permissive temperatures (37$^{\circ}C$), were analyzed. Comparison of protein bands separated by SDS-PAGE identified a prominent band of 47-kDa band from a mutant grown at 37$^{\circ}C$. N-terminal amino acid sequencing of this 47-kDa protein showed high identity with enolases 1 and 2. Western blot analysis revealed that most of the cell wall-bound enolase was released into the culture medium of the mutant grown at 37$^{\circ}C$, some of which were separated as those with lower molecular weights. Our results, presented here, indicate the impairment of cell wall enolase biogenesis and assembly by the sool-l/retl-l mutation of S. cerevisiae.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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