• 분석과학
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• 제28권2호
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• pp.106-111
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• 2015

얇은 유리판 위에 인지질과 항균성 펩타이드 protegrin-1을 혼합한 용액을 도포시키고, 95% 상대습도 하에서 방치함으로써 형성된 지질-펩타이드 혼합체의 변화를 ³¹P 고체 핵자기 공명분광법을 이용하여 조사하였다. 수화에 의한 변화와 공기 중에서 건조한 상태에서의 변화 그리고 반복적인 수화와 건조 과정에 의한 시료의 변화를 관찰하였다. 각 과정에서의 지질 이중막의 파괴 정도를 이론적 모사 과정을 통해 정량적으로 확인하였다. 지질-펩타이드 혼합체는 수화와 건조를 통해 가역적인 변화를 일으켰고, 반복과정에 의해 가장 안정한 평형 상태로 접근하고 있음을 확인하였다.

• 분석과학
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• 제26권1호
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• pp.61-66
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• 2013

얇은 유리판 위에 잘 정렬된 인지질 이중막에 작용하는 항균성 펩타이드 protegrin-1의 활성작용을 고체 $^2H$ 핵자기 공명 분광법을 이용하여 조사하였다. 수화 전후에 있어서 인지질 분자의 배향분포와 그 운동성을 고체 $^2H$ 핵자기 공명 스펙트럼을 통하여 확인하였다. 진공으로 건조된 상태에서는 인지질 분자의 운동성이 작다는 사실 외에는 인지질 분자들의 배향분포에 대한 정확한 상태를 알 수 없었다. 그러나 시료가 수화된 이후에는 시간이 지남에 따라 인지질 분자들이 잘 정렬되어 간다는 것과 원환체 기공이 형성되어 간다는 것을 확인할 수 있었다. Protegrin-1과 같은 항균성 펩타이드에 의한 인지질 이중막 변화를 본 연구논문에서 사용한 방법으로 확인하기 위해서는 상당히 긴 반응시간이 필요하다는 것을 확인하였다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제31권2호
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• pp.372-378
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• 2010

Membrane disruption by an antimicrobial peptide, protegrin-1 (PG-1), was investigated by measuring the $^2H$ solid-state nuclear magnetic resonance (SSNMR) spectra of 1-palmitoyl-$d_{31}$-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine (POPC_$d_{31}$) in the mixture of PG-1 and POPC_$d_{31}$ lipids deposited on thin cover-glass plates. The experimental line shapes of anisotropic $^2H$ SSNMR spectra measured at various peptide-to-lipid (P/L) ratios were simulated reasonably by assuming the mosaic spread of bilayers containing pore structures or the coexistence of the mosaic spread of bilayers and a fast-tumbling isotropic phase. Within a few days of incubation in the hydration chamber, the pores were formed by the peptide in the POPC_$d_{31}$ and POPC_$d_{31}$/cholesterol membranes. However, the formation of the pores was not clear in the POPC_$d_{31}$/1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphatidylglycerol (POPG) membrane. Over a hundred days after hydration, a rapidly rotating isotropic phase increased in the POPC_$d_{31}$ and the POPC_$d_{31}$/cholesterol membranes with the higher P/L ratios, but no isotropic phase appeared in the POPC_$d_{31}$/POPG membrane. Cholesterol added in the POPC bilayer acted as a stabilizer of the pore structure and suppressed the formation of a fast-tumbling isotropic phase.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2000년도 추계학술발표대회 및 bio-venture fair
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• pp.669-671
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• 2000

Antimicrobial cationic peptides have attracted increasing research and clinical interest as a natural antibiotics due to their broad spectrum of antimicrobial activites and the rapid development of multidrug-resistant pathogenic microorganisms. In this study, first, we synthesized artificial fusion partner and cationic peptide genes (lactoferricin, magainin, protegrin-1, and indolicidin). Second, we constructed recombinant expression vectors and then transformed Pichia pastoris. Finally, expressed cationic peptides were purified and tested for their antimicrobial activites. Antimicrobial activity has been tested upon the appearance of clearing zone on the plate with the lawn of gram negative E.coli XL- I blue and garm positive Staphylococcus aureus. Protegrin-1 and Indolicidin have apparant activity of cationic peotides. This fusion technique may lead to a general and suitable tool for production of pure antimicrobial cationic peptides in Pichia pastoris.

• 분석과학
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• 제26권6호
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• pp.395-400
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• 2013

얇은 유리판 위에서 자동적으로 정렬되는 인지질 분자의 정렬도에 대한 수분 및 항균성 펩타이드의 효과를 고체 핵자기 공명 분광법을 이용하여 조사하였다. 순수한 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphotidylcholine (POPC) 인지질 만을 유리판 위에서 정렬시킬 때에는 직접적인 물의 투입 없이 95% 상대 습도에서 수일간 수화시키는 것만으로 충분했다. 하지만, protegrin-1 (PG-1)과 같은 항균성 펩타이드가 혼합되어 있는 인지질의 경우에는 95%의 상대 습도에서 수일간 수화시키는 것과 약간의 물을 시료에 직접 투입하여 수화시키는 것이 크게 달라진다는 것을 확인하였다. 충분한 양의 물이 투입되었을 때, 지질 이중막 위에서 인지질 분자들의 표면 움직임이 매우 활발하였다. 순수한 POPC 분자들이 얇은 유리판 위에서 정렬되는 시간에 비해 항균성 펩타이드가 혼합되어 있는 경우에는 POPC 분자들이 평형상을 이루어질 때까지는 상당한 시간이 필요함을 확인하였다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제33권2호
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• pp.426-432
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• 2012

The activity of an antimicrobial peptide, protegrin-1 (PG-1), on lipid membranes was investigated using solidstate NMR and a new sampling method that employed mechanically aligned bilayers between thin glass plates. At 95% hydration and full hydration, the peptide respectively disrupted 25% and 86% of the aligned 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphotidylcholine (POPC) bilayers at a P/L (peptide-to-lipid) ratio of 1/20 under the new experimental conditions. The kinetics of the POPC bilayers disruption appeared to be diffusioncontrolled. The presence of cholesterol at 95% hydration and full hydration reduced the peptide disruption of the aligned POPC bilayers to less than 10% and 35%, respectively. A comparison of the equilibrium states of heterogeneously and homogeneously mixed peptides and lipids demonstrated the importance of peptide binding to the biomembrane for whole membrane disruption.