Hox proteins containing DNA-binding homedomain act as transcription factors important for anteroposterior body patterning during vertebrate embryogenesis. However, the precise mechanisms by which signal pathways are transduced to regulate the Hox gene expression are not clear. In the course of an attempt to isolate an upstream regulatory factor(s) controlling Hox genes, protein kinase B alpha (Akt1) has been identified as a putative regulator of Hox genes through in silico analysis (GEO profile). In the Gene Expression Omnibus (GEO) dataset GDS1784 at the NCBI (National Center for Biotechnology Information) site, Hox genes were differentially expressed depending on the presence or absence of Akt1. Since it was not well known how Akt1 regulates the specific Hox genes, whose transcription was reported to be regulated by epigenetic modifications such as histone acetylation, methylation etc., the expression of Gcn5, a histone acetyltransferase (HAT), was analyzed in wild type (WT) as well as in $Akt1^{-/-}$ mouse embryonic fibroblast (MEF) cells. RT-PCR analysis revealed that the amount of Gcn5 mRNA was similar in both WT and $Akt1^{-/-}$ MEFs. However, the protein level of Gcn5 was significantly increased in $Akt1^{-/-}$ MEF cells. The half life of Gcn5 was 1 hour in wild type whereas 8 hours in $Akt1^{-/-}$ MEF. These data all together, indicate that Gcn5 is post-transcriptionally down-regulated and the protein stability is negatively regulated by Akt1 in MEF cells.
Objectives : Many surgical procedures have been introduced to a symptomatic lumbar stenosis. Most of these procedures still have been regarded as an extensive surgical intervention with respect to normal aging process of the lumbar spine. We adopted a microsurgical decompression procedure via unilateral exposure as a minimally invasive intervention for symptomatic lumbar stenosis without instability. Materials and Methods : Fifty-seven patients with symptomatic lumbar stenosis underwent microsurgical decompression via unilateral laminotomy between March 1998 and December 1999. The conceptual modification and technical refinements were added to the previously reported microsurgical decompression procedure. Bilateral decompression through a unilateral laminotomy hole was performed in 11 patients. These patients profile also included 9 cases of degenerative spondylolisthesis(Grade I) without instability. Results : Preoperative neurogenic intermittent claudication(NIC) was more notably improved than low back pain, 60% to 82% during the follow-up period. Overall clinical results were excellent in 20(35%), good in 29(51%), fair in 6(11%) and poor in 2(3%). Conclusions : Microsurgical decompression for lumbar stenosis with stable spine provided a satisfactory symptomatic improvement without extensive destruction of the weight-bearing structures and functional mobile segments, even bilateral symptoms existed.
Our previous study showed that isoflavone profile of soybean undergoes a significant change during cheonggukjang preparation. In particular, the content of metabolite(s) with similar retention time to glycitein under the high performance liquid chromatography (HPLC) condition was significantly increased while the levels of genistein and its derivatives were notably lowered. Therefore, we hypothesized that genistein and its derivatives might be converted to genistein glucosides with similar elution time to glycitein. Our current data suggest that genistein and its derivatives are extensively metabolized into various compounds including genistein glycosides, but not glycitein or its derivatives, by Bacillus species isolated from traditional cheonggukjang. Some of daidzein was also converted into a derivative with shorter retention time by Bacillus amyloliquefaciens 51 and 86-1 but not by Bacillus subtilis 3-5 and 3-17. As metabolism of soy isoflavones, major health-promoting components in soy products, is widely variable depending upon Bacillus species, it is essential to select microorganism that minimizes the breakdown or modification of soy isoflavones in the process of fermented soy product manufacture.
Staphylococal infection still remains to be one of the most serious infections, having various complications in the clinical use of indwelling polymeric medical devices. However, there are a few promising systems showing a high antibacterial effect without causing any demage of polymer backbone under biological environments such as blood or body fluid. In order to resolve this problem, we have designed a new antibiotic releasing system via a hydrolysis mechanism. The surface of biomedical polyurethane (PU) was modified by using 1,6-diisocyanatohexane (HMDI) to immobilize the rifampicon. Also, the immobilized rifampicin was designed to be released by a selective cleavage of the unstable carbamate linkage that exists on the rifampicin-immobilized polyurethane (PHR). The immobilization of rifampicin on the surface of polyurethane was confirmed by the disappearance of the characteristics IR absorbance peak of the isocyanate (-NCO) group at $2,267\;cm^{-1}$. The PHR showed a continuous rifampicin release profile under an aqueous environment of 10 mM of PBS (phosphate-buffered saline) for ove 6 days. The rifampicin molecules, which are released from PHR under an optimal bacterial infection environment, had a higher antibacterial activity against both S. aureus and S. epidermidis than rifampicin-incorporated polyurethane (RIP). In addition, the PHR maintained a stable antibacterial effect under a blood-mimic aqueous environment such as bovine calf serum.
Guo, Chao;Liu, Ye;Yu, Haoran;Du, Kun;Gan, Yiru;Huang, He
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.7
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pp.1163-1172
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2016
The Ω-loop is a nonregular and flexible structure that plays an important role in molecular recognition, protein folding, and thermostability. In the present study, molecular dynamics simulation was carried out to assess the molecular stability and flexibility profile of the porcine trypsin structures. Two Ω-Loops (fragment 57-67 and fragment 78-91) were confirmed to represent the flexible region. Subsequently, glycosylation site-directed mutations (A73S, N84S, and R104S) were introduced within the Ω-loop region and its wing chain based on its potential N-glycosylation sites (Asn-Xaa-Ser/Thr consensus sequences) and structure information to improve the thermostability of trypsin. The result demonstrated that the half-life of the N84S mutant at 50℃ increased by 177.89 min when compared with that of the wild-type enzyme. Furthermore, the significant increase in the thermal stability of the N84S mutant has also been proven by an increase in the Tm values determined by circular dichroism. Additionally, the optimum temperatures of the wild-type enzyme and the N84S mutant were 75℃ and 80℃, respectively. In conclusion, we obtained the thermostability-improved enzyme N84S mutant, and the strategy used to design this mutant based on its structural information and N-linked glycosylation modification could be applied to engineer other enzymes to meet the needs of the biotechnological industry.
Kim, Yang-Hoo;Choi, Young-Jin;Bae, Hae-Rahn;Woo, Jae-Suk
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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v.13
no.1
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pp.9-14
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2009
We cultured canine kidney(MDCK) cells stably expressing aquaporin-2(AQP2) on collagen-coated permeable membrane filters and examined the effect of extracellular ATP on arginine vasopressin(AVP)-stimulated fluid transport and cAMP production. Exposure of cell monolayers to basolateral AVP resulted in stimulation of apical to basolateral net fluid transport driven by osmotic gradient which was formed by addition of 500 mM mannitol to basolateral bathing solution. Pre-exposure of the basolateral surface of cell monolayers to ATP(100 ${\mu}M$) for 30 min significantly inhibited the AVP-stimulated net fluid transport. In these cells, AVP-stimulated cAMP production was suppressed as well. Profile of the effects of different nucleotides suggested that the $P2Y_2$ receptor is involved in the action of ATP. ATP inhibited the effect of isoproterenol as well, but not that of forskolin to stimulate cAMP production. The inhibitory effect of ATP on AVP-stimulated fluid movement was attenuated by a protein kinase C inhibitor, calphostin C or pertussis toxin. These results suggest that prolonged activation of the P2 receptors inhibits AVP-stimulated fluid transport and cAMP responses in AQP2 transfected MDCK cells. Depressed responsiveness of the adenylyl cyclase by PKC-mediated modification of the pertussis-toxin sensitive $G_i$ protein seems to be the underlyihng mechanism.
Thermal treatment techniques are used for modifying wood and wood-based materials to improve dimensional stability and hygroscopicity. This study investigated the effects of press pressure and temperature on density, vertical density profile, thickness swelling and surface hardness of eucalyptus wood boards. The experimental wood boards were prepared from Turkish River Gum ($Eucalyptus$$camaldulensis$ Dehn.). The surface hardness value increased with increasing press pressure in the treated groups. The application of a higher pressure at the same temperature level increased the amount of swelling of wood. It means that it is not needed for application of higher pressure to enhance the dimensional stability of wood. It is expected that it is possible to produce increased hardness, dimensional stability and durability by application of hot pressing treatment. This research showed that different press pressure and temperature values should be used to improve the performance properties of eucalyptus wood so that the end-use of the wood materials could be expanded.
Objectives: This study surveyed doctors of Korean medicine on how they treat hypertension in their Korean clinical practices. Methods: An invitation to take an Internet-based questionnaire was sent to doctors who were registered in the Association of Korean Medicine in September 2016. Participants were first asked general profile questions, which included age, gender, work experience as a practitioner, and specialties. Second, they were asked whether they had experience with hypertension treatment and additional questions related to hypertension. Results: A total of 991 replies were received to the questionnaire. Most of the Korean medical doctors (95%) had blood pressure units and had monitored blood pressure. A majority of the Korean medicine doctors (55%) had provided hypertension treatment. Acupuncture and herbal medicine were commonly used for the treatment of hypertensive patients. In addition, bloodletting, moxibustion, pharmacopuncture, cupping, Chuna, Qigong exercise, meditation, and Tai Chi were used. Many doctors also recommended lifestyle modification. The respondents said that Korean medicine improves general health conditions (42.6%) and has low adverse effects (29.9%). One of the most common opinions about the revitalization measures of Korean medicine was expanding health insurance benefits (20.8%). Conclusions: Through this survey, we found out information about the present situation of hypertension treatment in Korean medicine. In the future, it is possible that hypertension treatment using Korean medicine will be demanded and used by practitioners if it is covered by public health insurance.
Acanthamoeba infection is difficult to treat because of the resistance property of Acanthamoeba cyst against the host immune system, diverse antibiotics, and therapeutic agents. To identify encystation mediating factors of Acanthamoeba, we compared the transcription profile between cysts and trophozoites using microarray analysis. The DNA chip was composed of 12,544 genes based on expressed sequence tag (EST) from an Acanthamoeba ESTs database (DB) constructed in our laboratory, genetic information of Acanthamoeba from TBest DB, and all of Acanthamoeba related genes registered in the NCBI. Microarray analysis indicated that 701 genes showed higher expression than 2 folds in cysts than in trophozoites, and 859 genes were less expressed in cysts than in trophozoites. The results of real-time PCR analysis of randomly selected 9 genes of which expression was increased during cyst formation were coincided well with the microarray results. Eukaryotic orthologous groups (KOG) analysis showed an increment in T article (signal transduction mechanisms) and O article (posttranslational modification, protein turnover, and chaperones) whereas significant decrement of C article (energy production and conversion) during cyst formation. Especially, cystein proteinases showed high expression changes (282 folds) with significant increases in real-time PCR, suggesting a pivotal role of this proteinase in the cyst formation of Acanthamoeba. The present study provides important clues for the identification and characterization of encystation mediating factors of Acanthamoeba.
Opisthorchis viverrini (OV)-induced cholangiocarcinoma (CCA) is an important cancer in the Great Mekong region, particularly in Thailand. Limitations of treatment options and the lack of an effective diagnostic tool for early detection of CCA are major concerns for the control of this type of cancer. The aim of the study was to investigate anti-CCA activity of the ethanolic extract of Atractylodes lancea (Thunb.) DC., and the applicability of positron emission tomography-computed tomography (PET-CT) as a tool for detection and monitoring the progression of CCA in Opisthorchis viverrini (OV)/dimethylnitrosamine (DMN)-induced CCA hamsters. Male Syrian hamsters were used for toxicity tests and anti-CCA activity evaluation. Development of CCA was induced by initial feeding of 50 metacercariae of OV, followed by drinking water containing 12.5 ppm of DMN in hamsters. The ethanolic extract of A. lancea (Thunb.) DC. was administered orally for 30 days. PET-CT was performed every 4 weeks after initiation of CCA using 18F-fluorodeoxyglucose ($^{18}F-FDG$). Results from the present study suggest that the ethanolic extract of A. lancea (Thunb.) DC. rhizome exhibited promising anti-CCA activity and safety profile in the OV/DMN-induced hamster model. To successfully apply PET-CT as a tool for early detection of tumor development and progression, modification of radiolabeling approach is required to improve its specificity for CCA cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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