• 제목/요약/키워드: primary hepatocyte culture

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Xenopus laevis 초기 배의 동물극 분리배양에서 bFGF와 HGF 혼합처리에 의한 기관유도 (Organ Induction by Combined Dose of bFGF and HGF in Animal Cap Assay of Early Xenopus laevis Embryos.)

  • 진정효;윤춘식;이호선;박용욱;정선우
    • 생명과학회지
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    • 제14권3호
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    • pp.375-384
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    • 2004
  • FGFs는 Xenopus의 초기 배발생에서 중배엽 형성, 전후축패턴형성, scatter factor로서 낭배기의 기관형성에 관여하는 등 다양한 기능을 가지고 있는 것으로 알려져 있다 그 중 bFGF는 배양 분리편으로부터 다양한 기관을 유도해낼 수 있으며 그 효과는 처리시간 및 농도 의존적이라고 알려져 왔다. 본 연구는 Xenopus의 예정표피역을 분리하여 bFGF와 HGF을 단독 및 복합처리 하였을 때 기관분화 및 유도효과를 검토하기 위하여 실시하였다. 단독처리 및 복합 처리된 배양액에 동물극 분리편을 정상배가 st. 43에 이를 때까지 2$0^{\circ}C$에서 3일간 배양하여 조직학적 및 면역조직화학적 방법으로 조직의 분화양상을 확인하였다. 성장인자는 bFGF를 0, 0.5, 1. 10. 50 ng/ml의 농도와 HGF를 0, 1, 10, 50, 100ng/ml의 농도로 조합하여 처리한 결과 bFGF 단독처리 때보다 HGF와의 혼합처리에서 기관분화율의 상승효과가 관찰되었다. 분화된 기관은 1 ng/ml의 bFGF 와 10ng/ml의 HGF, 10ng/ml의 bFGF와 1ng/ml의 HGF의 농도에서 매우 다양한 것으로 나타났다. 눈은 1과 10ng/ml의 bFGF ,그리고 1과 10 ng/ml의 HGF 농도조합에서 높은 비율로 분화하였다. 또한 분리편 배양에 의해 유도된 눈과 정상 배의 눈에서 RPE65를 인식하는 단일클론 항체 40All, 25F5를 사용하여 AP 반응이 강하게 나타나 눈의 유도를 확인할 수 있었다.

무지개송어, Oncorhynchus mykiss 배양 간세포에서 2,4-Dichlorophenoxy acetic acid이 Vitellogenin 합성과 $E_2$-ER Binding Affinity에 미치는 영향 (Effect of 2,4-Dichlorophenoxy Acetic Acid on Vitellogenin Synthesis and $E_2$-ER Binding Affinity of Hepatocytes in Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss))

  • 황운기
    • 한국양식학회지
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    • 제15권1호
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    • pp.31-37
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    • 2002
  • 이 연구는 무지개송어, O. mykiss 간세포 배양을 이용해 합성화학물질인 2,4-Dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D)가 vitellogenin (VTG) 합성과 estrogen (E$_2$) - estrogen receptor (ER) binding affinity에 미치는 영향을 조사하였다. 간세포는 2일간 전 배양한 후에 E, (2$\times$10$\^$-6/ M) 또는 2,4-D (10$\^$-9/∼10$\^$-6/ M)를 배지에 첨가해 5일간 배양한 후, VTG과 E$_2$-ER binding affinity를 SDS-PAGE와 ELISA를 이용해 각각 조사하였다. 사용된 2,4-D의 농도는 세포의 형태, 생존력 및 DNA 함량에는 영향을 미치지 않았다. 또한, 2,4-D는 VTG의 합성에도 어떠한 영향도 미치지 않았으나 E$_2$-ER binding affinity를 억제하였다. 이 binding affinity는 2,4-D의 농도가 증가할수록 증가하는 경향을 나타내어 10$\^$-7/과 10$\^$-6/ M에서 25%와 30%를 각각 억제하였다. 이 결과들은 비록 2,4-D가 VTG의 합성에는 영향을 미치지 않지만, ER에서 xeno-estrogenic contaminant로서 행동하는 것을 제시하였다.