• Journal of Chest Surgery
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• 제27권9호
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• pp.723-731
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• 1994

We have modified the isolated perfused working rabbit lung model [IPWL] by perfusing the isolated lung with a hollow fiber membrane deoxygenator.For assessment the stored lung was ventilated with FIO2 0.4 and perfused with 37$^{\circ}$C deoxygenated circulating blood at a rate 5ml/kg/min for several hours until lung failure.We chose to compare our developing solution which contained low potassium and pentastarch with the modified Euro-Collins solution .Experiments were divided into four groups[n=6] based on the type of flushing preservation solution and preservation time.The flushed lungs were then preserved into same solution at 8~10$^{\circ}$C with 100% O2 inflated condition for 1 or 20 hours.These following results were obtained.The IPWL model requires only one animal per experiment and allows for the continuous assessment of aerodynamic performance. This should therefore be used as screening test in lung preservation.One hour preservation groups, there were no significant difference in recovery rates of PaO2, PAP and Paw. Survival time in the one hour preservation groups were very significant long in the Group II[LPPS, p<0.01]. Twenty hours preservation groups, there were no significant difference in the recovery rates of PAP and Paw between Group III[m-ECS] and Group IV[NS], but PaO2 was significantly worse at onset of reperfusion in Group III when compared with Group IV [p<0.05]. And also survival time in the 20 hours preservation groups were significant long in the Group IV [p<0.05].

• Journal of Chest Surgery
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• 제30권1호
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• pp.1-10
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• 1997

심장이식 수술의 성공의 관건은 공여자와 수혜자의 적절한 조합과 이미 정립된 수술수기와 합께 적출된 심장의 효과적인 기능 보존에 달려있다. 심장 보존에 있어서 괄목할 만한 발전이 있었음에도 불구하고 최근의 가장 진보된 방법으로 심 허 혈 상태의 최대 허용기간은 약 4~6시간정도이다 저자는 이식을 위한 적출 심장의 보존 용액 이 갖추어야 할 적정 요건에 대한 자료를 축적하고자, 단순 저온 침적방법에 의거하여, H/S용액(I군)을 대조군으로 하여 저자가 고안한 CK용액(W군)을 기존의 MEC용액( ll군) 및 MUW용액(E군)과 비교 실험하였다. 적출된 가토의 심장을 실험 대상으로 하고 정압형 Langendorff실험모형을 사용하여, 20분간의 평형 상태, 4시간동안의 심장 저장 및 20분간의 재관류시기를 거치게 한 후, 심근 조직을 절제하여 냉동 보관하였다. 실험 계획에 따라 관관류량,좌심실압, 압력 미분치를 측정하였고, 동결 심근조직내의 효소치를 정량 분석하였다. 결론적으로, 저자의 비교 실험에서 MUW용액과 CK용액의 심근보호 능력이 우수하였고, MEC용액은 대조군에 비해 저조하였다. potassium의 농도가 MVW용액보다 낮고()4.2nM/L), 문헌상에서 \ulcorner\ulcorner보호에 유익한 것으로 보고된 각종의 substrate을 첨가하여 제작된 CK용액의 성적이 MUW용액 과 비슷한 수준으로 우수하였는데, 이는 심장보존용액의 전해질 농도의 조정과 첨가물질의 선택 및 조정에 있어서 지속적인 연구와 발전이 필요함을 시사한다고 할 수 있다.

• KSBB Journal
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• 제24권3호
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• pp.312-320
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• 2009

치료용 단백질을 생산하는 생물의약품 산업이나 세포치료제 및 이식용 세포를 다루는 재생의학 분야 등의 세포기반 산업에서 안정적인 세포의 보존은 필수적인 요소이다. 본 연구에서는 인간 피부 섬 유아세포의 $4^{\circ}C$ 저온보존에서 우수한 성능을 나타내는 개선된 저온보존액을 개발하고, 저온에 의한 세포 손상을 보호함으로써 보다 안정적인 세포 저온보존 기술을 제공하고자 하였다. 세포의 저온보존에서 우수한 효능을 나타내는 핵심 성분을 탐색한 결과, yeast hydrolysate 등의 단백질 가수분해물을 첨가한 보존액에서 월등히 뛰어난 보존효과가 나타남을 확인하였다. 단백질 가수분해 물은 미생물, 식물, 동물유래 단백질 가수분해 물에서 모두 우수한 효과를 나타냈으며, 특히 단백질 가수분해물 성분 중 분자량 10kDa 이하의 펩타이드를 첨가한 저온보존에서 우수한 보존효과가 나타났다. 저온에 의한 세포손상에 대해 단백질 가수분해물은 세포내 ATP level의 감소를 막아주고 ROS 생성을 억제하는 것으로 나타났으며, 항산화제 및 삼투압 조절물질을 단백질 가수분해 물과 함께 첨가하였을 때 더욱 우수한 세포 보존효과를 보였다. 최종적으로 본 연구에서 개발한 KUL261 저은보존액 (DMEM/F12 1 : 1 medium, yeastolate 1%, $\alpha$-tocopherol $100{\mu}M$, dextran 2.5%)은 기존의 저온 보존액에 비해 세포 생존을 및 성장률에서 월등히 우수한 성능을 나타내었다. 결론적으로, 핵심 유효성분으로 단백질 가수분해물을 포함하는 개선된 저온보존액은 기존의 보존액보다 월등히 우수한 보존효과를 제공하며, 세포치료제 및 재생의학 분야의 발전과 글로벌 상업화에 기여할 수 있을 것이다.

• Journal of Chest Surgery
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• 제33권5호
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• pp.377-384
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• 2000

Background: Numerous studies of safe, long term preservation for lung transplantation have been performed using ex vivo models or in vivo single lung transplantation models. However, a safe preservation time which is applicable for clinical use is difficult to determine. We prepared LPDG solution for lung preservation study. In this study we examined the efficacy of LPDG(low potassium dextran glucose) solution in 24-hour lung preservation by using a sequential bilateral canine lung allotransplant model. Material and Method: Seven bilateral lung transplant procedures were performed using weight-matched pairs(24 to 25kg) of adult mongrel dogs. The donor lungs were flushed with LPDG solution and maintained hyperinflated with 100% oxygen at 1$0^{\circ}C$ for a planned ischemic time of 24 hours for the lung implanted first. After sequential bilateral lung transplantation, dogs were maintained on ventilators for 3 hours: arterial resistance were determined if the recipients hourly after bilateral reperfusion and compared with pretransplant-recipient values, which were used as controls. After 2hours of reperfusion, the chest X-ray, computed tomogram and lung perfusion scan were performed for assessmint of early graft lung function. Pathological examinations for ultrastructural findings of alveolar structure and endothelial structure of pulmonary artery were performed. Result: Five of seven experiments successfully finished the whole assessments after bilateral reperfusion for three hours. Arterial oxygen tension in the recipients was markedly decrased in immediate reperfusion period but gradually recovered after reperfusion for three hours. The pulmonary artery and pulmonary vascular resistance showed singificant elevation(p<0.05 versus control values) but also recovered after reperfusion for three hours(p<0.05 versus immediate period value). The ultrastructural findings of alveolar structure and endothelial structure of pulmonary artery showed reversible mild injury in 24 hours of lung perservation and reperfusion. Conclusion : This study suggests that LPDG solution provides excellent preservation in a canine model in which the dog is completely dependent on the function of the transplanted lung.

• 한국임상수의학회지
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• 제26권5호
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• pp.445-449
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• 2009

이식분야에서 University of Wisconsin (UW)용액과 Histidine-Tryptophan Ketoglutarate (HTK)용액은 장기 보존액으로 주로 이용되고 있다. 바이오 장기 동물모델인 미니돼지를 이용하여 신장 저온보존에서 발생하는 허혈손상을 비교함으로써 각 보존액의 효용성을 검토하고자 하였다. 이 연구에서는 12마리의 미니돼지가 이용되었으며, 각 6마리씩 무작위로 선별하여 UW군(n = 6)과 HTK군(n = 6) 두 군으로 나누었다. 미니돼지의 신장을 적출, 세척, 각각 저온 보관(0, 24, 48, 72시간, $4^{\circ}C$) 후에 조직학적 평가를 실시하였다. 저온보관시간이 증가할수록 신장의 손상이 증가하였다. 저온보관 24시간까지는 UW와 HTK용액의 저온보관 효과는 유사하였지만, 48시간 이후에는 HTK 용액의 저온보관손상이 증가하였다. 따라서, 미니돼지 신장의 저온 보존액은 UW 용액이 효과적이며 특히 장기간 보존에 적합한 용액으로 사료된다.

• 한국포장학회지
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• 제7권1호
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• pp.25-30
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• 2001

The purpose of this study was to examine how can we keep the freshness of peeled chestnuts in distribution process. The 30 minutes impregnation treatment at the preservation solution of 0.3% consistency showed a good result. The solution treatment prevented from surface yellowing and quality degradation of peeled chestnuts. And, in vaccum packaging after treating chemicals surface drying was faster than the other packaging from 7th day. A vitamin C treatment was no effective to restrain the growth of microbials.

• Journal of Chest Surgery
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• 제29권10호
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• pp.1066-1075
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• 1996

한국산 잡견을 대상으로 세 종류의 심정지액으로 심장을 정지 보존 후,심장을 적출하여 $0^{\circ}C$에서 보존하면서 일정한 시간별로 6회에 걸쳐 좌심실 근육조직을 채취하여 -75$^{\circ}C$ 냉동고에 저장한 후,초고속 액체 크로마토그라피법으로 purine metabolites를 측정하였다. UW 용액(UWS)군의 ATP 농도는 St. Thomas 용액 (5751군과 혈성 심정 지액 (BCPS)군에 비하여 높으나, 575 군과 BCPS 군 간에는 특이한 차이가 없었다. UWS 군과 BCPS 군의 ADP 농도가 4,8, 12, 24 시간대의 575 군보다 높지만, UWS 군과 BCPS 군 사이에는 특이한 차이가 없었다. AMP 농도는 세군 모두에서 변화가 많지 않았고, adenosine, inoslne, hypoxanthlnc 농도는 시간 경과 에 따라 점차 증가하였고, xanthine의 농도는 매우 소량이어서 비교가 불가능하였다. 본 연구 결과, UW용액이 장시간의 심근보존능력에는 아직 문제점이 있으나, 전신 저체온법을 동시에 시행한 St. Thomas 용액이나 혈성 용액 보다는 보다 우수한 보존용액으로 사료된다.

• Journal of Chest Surgery
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• 제29권8호
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• pp.816-821
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• 1996

장기이식 수술의 개발과 성공은 신장, 간장, 췌장, 심장 및 폐와 이식을 가능하게 하였으나 공여 장기 의 후송, 장시간 보관의 어려움과 이식 중에 발하는 허혈성 손상에 대한 예방에 많은 문제가 있었다. 현 재까지 폐의 장기 보존에 있어서 그 보존용액에 대해서는 많은 연구가 있었으나 혓태학적 연구가 부족 한 것 같다. 따라서 본 연구의 목적은 기존의 Euro-Collin용액과 University of wisconsin용액의 효과를 시간에 따 른 형태학적 변화와 폐의 수분도의 변화를 관찰함으로써 냉한에 보존된 폐의 변화의 차이를 알아보는데 있다. 방법은 황견을 세 군으로 나누어 보존액을 Group 1(n:5)은 normal saline으로, Group 2(n:5)는 Euro-Collins solution으로, Group )(n:6)는 University of Wisconsin solution등으로 나누어 60시 간까지 냉한에 보존하면서 시간에 따른 형태학적 변화와 폐의 수분율의 변화를 관찰하였다. 결과를 보면 폐의 수분율은 보존 후 6시간부터 증가하여 12시간 후 최대치가 되나,각군 별로는통계 적 인 차이는 없었다. 형 태학적 인 변화로는 제 1군에서 5예 중 1예에서 냉한 보존 1시간 후 자장 먼저 al- veolar septum의 변화를 \ulcorner였고, 2군은 냉한 럴존 6시 간 후부터 5예 중 )예에서 alveolar septum의 distor- tion과 swelling이 있었으며 또 pneumocyte의 변화를 보였고, 3군에서는 6시간 후에는 5예 중 I예에서, 12시간 후에는 5예 중 4예에서 alveolAr septum의 swelling을 보였다. 또 pneumocyte에 대한 변화는 1군 에서는 24시간 후부터, 2군에서는 48신간 후부터, 3군에서는 냉한 보존 60시 간 후에 나타났다 이와 같이 세포의 형태학적 보존은 3군에서 잘 되는 것으로 나타났다.두 군간에 퇴원일자가 P value 0.03으로 의의 있게 흥강경으로 수술한 군에서 짧았다. Group C는 평균연령 45.8세, 수술시간 105분, 통증제거 3.2회, 흥관삽관 6.1일이 었으며 진단율은 81.8 % 였고 group D는 평균연령 53.3세, 수술시간 121분, 통증제거 2.6회, 흥관삽관 10.5일이었으며 진단율 은 100%였다. 수술과 관련된 합병증으로 Group A는 수술중 혈액 량감소성쇽과 심장마비가 각각 1예씩 있었으나 회 복이 되었고수술후농흥과출혈이 각각 1예씩, 일시적 호흡정지 1예, 흉관 7일 이상유지가)예 있었다. Group B에서는 성Til마비와 흥관 7일 이상 유지가 각각 2예씩 있었으며 Horner's 증후군과 brachial neuropathy가 각각 1예씩 있었다. 본 저자들은 비디오 흥강경을 이용한 종격동 종양의 제거를 비교적 안전하게 하였으며 입원기간도 짧 고 수술과 관련된 이병율 및 사망율도 적어 환자를 적절히 선택함으로서 비디오 흥강경수술이 종격동종 괴 절제시 에 좋은 치료방법이라고 사료된다.지수가 유의한 증가를 보였는데 이는 수술 \ulcorner 동반된 폐동맥 성형술등의 영향이 있었음을 감안하여야 할 것으로 생각되었다. 한편 수술전 폐동맥 크기에 대한 지표로서 폐동맥 지수(PAI)와 McGoon 비(MGR)와는 다음과 같은 유의한 상관관계가 있 음을 알 수 있었다 상관식 : PAI : MGRxl18.0-12.4. 결론적으로 양방향성 상대정맥-폐동맥 단락술이 동맥혈내 산소포화도는 증가시키나 폐동맥 지수는 단기간의 본 연구에서는 증가하지 않는 것으로 나타났다. 향후 박동성 양방향성 상대정맥-폐동맥 단락 술이나 또는 Blalock-Taussig 단락술등이 폐동맥의 성 장에 미치는 영 향에 대한 연구가 필요할 것으로 생각된다.0s, in addition to the topics which were interested in before

• Journal of Chest Surgery
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• 제21권3호
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• pp.425-446
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• 1988

After 24 hours of preservation under 15 mmHg perfusion pressure the recovery rates of isolated canine hearts were determined. Preservation was performed in a cold room maintained at 4*C with 4 different types of perfusates bubbled with a mixture of 95% 0y and 5% CO~ using a modified perfusion unit designed in our institute. The perfusates used were as follows; Group 1: Krebs-Henseleit solution, Group 2: Krebs solution added by albumin and PGE1. Group 3: Modified Wicomb*s solution, Group 4: Modified Collin*s solution. The extent of myocardial recovery was evaluated using a modified isolated carmine perfusion model by measuring heart rate, systolic arterial pressure, left atrial pressure[LAP] and cardiac output. In addition to the above hemodynamic parameters, biochemical and enzymatic assays from perfusates and electron microscopic changes of the myocardium were also studied. The results were as follows; 1] The heart recovery rates were 41.6%, 53.4% and 108.9% in groups 1, 2 and 3, respectively, and group 3 elicited the best result[p< 0.001]. The heart beat was never recovered in group 4. 2] Recovered systolic arterial pressures[mmHg] were 63.3% in group 1, 94.9% in group 2 and 94.3% in group 3. 3] LAPs[mmHg] were 20 in group 1, 13.5 in group 2 and 11.2 in group 3, which suggested that the best myocardial preservation was elicited in group 3[p< 0.05]. 4] Cardiac output, the sum of aortic stroke volume and coronary leakage, were 69.1% in group 2, and 90.7% in group 3, but these were not statistically significant[p=0.24]. No aortic stroke output was measured in group 1 and 4. 5] The degree of myocardial edema increase was 17.5` in group 1, 24.6% in group 2, 20.9% in group 3 and 55.3% in group 4. But there were no statistical differences in each group[p= 0.08]. 6] CPK-MB[U/L] levels were increased 750% and 332%[p< 0.05], glucose levels[mg/dl] 60.5% and 78.2% and SGOT[U/L] levels 523% and 333%, in groups 2 and 3, respectively. Biochemical and enzymatic assays could not be performed in group 1 and group 4, because of poor recovery of heart beat. 7] Electron microscopic findings in the myocardium of most groups revealed slight to moderate muscle cell and mitochondrial edema. But all these findings were within the limits of reversible change. From these above results, it is suggested that modified Wicomb*s solution seems to be the most useful physiologic salt solution for preservation of the heart. We propose that after further study and improvement, our portable continuous hypothermic perfusion system will contribute to the development of a better preservation method for donor hearts for human heart transplantation.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제36권3호
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• pp.163-166
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• 2012

This study was conducted to determine the relationship between elapsed time after semen preservation on the changes of bacteria and semen quality. Semen was diluted with BTS(Beltsville Thawing Solution) extender without antibiotic for 7 days and sperm parameter and fertility were measured. Sperm motility was measured by CASA and total bacteria number was counted after 22~24 hr incubation from counting agar plate in which sperm dilute to $10{\sim}10^6$ in 0.9% saline solution and inoculate to agar. Acrosomal integrity was measured by Chlortetracycline (CTC) staining. CTC patterns were uniform fluorescence over the whole head (pattern F), characteristic of incapacitated acrosome-intact spermatozoa; fluorescence-free band in the post-acrosomal region (pattern B), characteristic of capacitated acrosome-intact spermatozoa; and almost no fluorescence over the whole head except for a thin band in the equatorial segment (pattern AR), characteristic of acrosome reacted spermatozoa. Total number of bacteria was significantly increased (p<0.0001) 3 days after preservation. Sperm motility, viability, and morphological abnormality on elapsed time after preservation were lower from 5 ($77.24{\pm}6.47$, p<0.001) and 7 days ($77.24{\pm}6.47$, p<0.001) after preservation compared to 1 ($15.71{\pm}7.18$) and 3 days($18.39{\pm}7.22$) after preservation, respectively. Sperm viability was significantly lower ($53.25{\pm}35.03$, p<0.0001) at 7 days after preservation. Morphological abnormality of sperm was lower (p<0.001) at 1 ($15.71{\pm}7.18$) and 3 ($18.39{\pm}7.22$) days compared to 5 ($21.84{\pm}7.91$) and 7 ($22.59{\pm}9.93$) days after preservation. Acrosomal integrity and capacitation rate (pattern F) were significantly lower (p<0.001) from 5 days after preservation. Based on the data we obtained from this study suggested that semen preserved more than 5 days without antibiotic would not recommend use for artificial insemination.