Pre-pentration activity of Pyricularia oryzae Cav. from the stage of conidia germination to appressorium formation was examined on rice leaf epidermis under light and scanning electron microscopes to determine the causes· for differences in blast susceptibility between plants grown under three different soil moisture conditions in the greenhouse. No significant differences were found in the external shape of leaf epidermal cells including bulliform cells between plants grown under different soil moisture conditions. Growth and orientation of germ tube and morphology and size of appressorium of P. oryzae did not vary with soil moisture treatment. Site of appressorium formation was consistent over soil moisture treatment with the highest frequency of bulliform cell $(35\~48\%)$, followed by short cell $(19\~27\%)$, and long and guard cells $(13\~20\%)$. No appressorium was formed on trichome. This result suggests that the observed differences in blast susceptibility between plants grown under different soil moisture conditions were not due to the differences in the pre-pentration activity of P. oryzae on those plants.
The multicellular layers(MCL) of human cancer cells is a three dimensional(3D) in vitro model for human solid tumors which has been used primarily for the assessment of avascular penetration of anti-cancer drugs. For anti-cancer drugs with penetration problem, MCL represents a good experimental model that can provide clinically relevant data. Calcein-AM is a fluorescent dye that demonstrates the cellular vitality in a graded manner in cancer cell culture system. In the present study, we evaluated the use of calcein-AM for determination of anti-proliferative activity of anti-cancer agents in MCL model of DLD-1 human colorectal cancer cells. Optical sectioning of confocal imaging was compromised with photonic attenuation and penetration barrier in the deep layers of MCL. By contrast, fluorescent measurement on the cryo-sections provided a feasible alternative. Cold pre-incubation did not enhance the calcein-AM distribution to a significant degree in MCL of DLD-1 cells. However, the simultaneous determination of drug penetration and cellular vitality appeared to be possible in drug treated MCL. In conclusion, these data suggest that calcein-AM can be used for the simultaneous determination of drug-induced anti-proliferative effect and drug penetration in MCL model.
This study reports light and electron microscope examination of rumen fungal colonization of alkali-treated roughage feeds incubated in decron bags in the rumen of cannulated sheep for varying time intervals. Six roughages, pre-treated with ammonium hydroxide or sodium hydroxide at 4% (w/w) level were examined together with untreated control samples. Alkali pre-treatment was associated with an earlier and more pronounced fungal colonization than all control roughages. Sodium hydroxide pre-treatment was significantly more effective than ammonium hydroxide in improving the susceptibility of roughages to rumen fungal colonization and studies by SEM showed that the pre-treatment permitted greater penetration of feeds by fungi. Sodium hydroxide pre-treatment also significantly increased dry matter disappearance from feed held in Dacron bags in the rumen with all feeds except Lucerne stem. It is not known to what extent fungal activity contributed to increased breakdown of the feeds.
Defense mechanisms against anthracnose disease caused by Colletotrichum orbiculare on the leaf surface of cucumber plants after pre-treatment with plant growth promoting rhizobacteria(PGPR), amino salicylic acid(ASA) or C. orbiculare were compared using a fluorescence microscope. Induced systemic resistance was mediated by the pre-inoculation in the root system with PGPR strain Bacillus amylolquefaciens EXTN-1 that showed direct antifungal activity to C. gloeosporioides and C. orbiculare. Also, systemic acquired resistance was triggered by the pre-treatments on the bottom leaves with amino salicylic acid or conidial suspension of C. orbiculare. The protection values on the leaves expressing SAR were higher compared to those expressing ISR. After pre-inoculation with PGPR strains no change of the plants was found in phenotype, while necrosis or hypersensitive reaction(HR) was observed on the leaves of plants pre-treated with ASA or the pathogen. After challenge inoculation, inhibition of fungal growth was observed on the leaves expressing both ISR and SAR. HR was frequently observed at the penetration sites of both resistance-expressing leaves. Appressorium formation was dramatically reduced on the leaves of plants pre-treated with ASA, whereas EXTN-1 did not suppress the appressorium formation. ASA also more strongly inhibited the conidial germination than EXTN-1. Conversely, EXTN-1 significantly increased the frequency of callose formation at the penetration sites, but ASA did not. The defense mechanisms induced by C. orbiculare were similar to those by ASA. Based on these results it is suggested that resistance mechanisms on the leaf surface was different between on the cucumber leaves expressing ISR and SAR, resulting in the different protection values.
This study attempted to evaluate the water repellency and drying effectiveness of linseed oil treated-solid wood at high temperature by immersion. The moisture content of green wood (Pinus densiflora) sample (above 90%) was reduced about 10% after 6 hours treatment at 150℃. When the treated samples were cut into cross section along the length, it was observed that the linseed oil penetrated into up to 20% of the sample cross section area in all locations. However, a strength loss of the specimen was not detected. The pre-drilling before linseed oil treatment was effective in reducing the defects such as checks and splits, and improved the linseed oil penetration into all samples from the surfaces. The result of water absorption test of treated-wood showed that the water repellent efficacy of treated-wood was greater than that of the control. The anti-fungal activity of treated samples using five sap stains and thee decay fungi was not detected in broad-spectrum toxic mechanism. However, decay test using white rot fungi (Tyromyces palustris) and brown rot fungi (Trametes versicolor) showed that the treated sample has a decay resistance to these two fungi.
Histone methylation plays important roles in regulating chromatin dynamics and transcription in eukaryotes. Implication of histone modifications in fungal pathogenesis is, however, beginning to emerge. Here, we report identification and functional analysis of a putative JmjC-domain-containing histone demethylase in Magnaporthe oryzae. Through bioinformatics analysis, we identified seven genes, which encode putative histone demethylases containing JmjC domain. Deletion of one gene, MoJMJ1, belonging to JARID group, resulted in defects in vegetative growth, asexual reproduction, appressorium formation as well as invasive growth in the fungus. Western blot analysis showed that global H3K4me3 level increased in the deletion mutant, compared to wild-type strain, indicating histone demethylase activity of MoJMJ1. Introduction of MoJMJ1 gene into ${\Delta}Mojmj1$ restored defects in pre-penetration developments including appressorium formation, indicating the importance of histone demethylation through MoJMJ1 during infection-specific morphogenesis. However, defects in penetration and invasive growth were not complemented. We discuss such incomplete complementation in detail here. Our work on MoJMJ1 provides insights into H3K4me3-mediated regulation of infection-specific development in the plant pathogenic fungus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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